بيورت طريقة تحديد محتوى البروتين كيت

طريقة تتبع 100T/96S

ملاحظة : اختيار قبل التصميم الرسمي 2-3 من أجل ضمان تركيز البروتين في 1 ~ 10mg / مل نطاقداخل .

تحديد المعنى :

محتوى البروتين للذوبان في العينة غالبا ما تستخدم في حساب نشاط انزيم . وبالإضافة إلى ذلك ، فإن محتوى البروتين للذوبان يمكن أن تستخدم أيضا في تحليل نوعية الغذاء .

مبدأ القياس :

في محلول قلوي قوي ، بيورت كوسو4 تشكيل الأرجواني المعقدة . عمق اللون الأرجواني معقدة تتناسب مع تركيز البروتين .الوزن الجزيئي للبروتين لا علاقة لها مع تكوين الأحماض الأمينية . تحديد نطاق هذه الطريقة 1 ~ 10 ملغ البروتين هو مناسبة لعينات مع تركيزات عالية من البروتين ، وخاصة المواد الحيوانية .

biurea طريقة تحديد محتوى البروتين كيت

تكوين

معيار : سائل 1 مل × 1 قارورة5 ملغ / مل ، 4 ℃حفظ .

المعدات واللوازمس

الطرد المركزي ، الطيف المرئي/ أجهزة وضع العلامات الأنزيمية / تتبع الكوارتز أطباق اللونية / 96 فتحة لوحة ، ماصة ، الماء المقطر .

معايير محددة من المنتجات تخضع المعايير الواردة في مواصفات المنتج

استخراج البروتينات القابلة للذوبان من العينات :

1 . عينات السائل :يمكن تحديد عينة سائل عديم اللون واضحة مباشرة .

2 . عينات الأنسجة :حسب نوعية المنظمة )ز ) : استخراج حجم ( مل )في 1 : 5-10 نسبة )اقتراح دعوة 0.1g الانضمام إلى منظمة 1 ملاستخراج ( عصامي ، حسب الاقتضاء ، اختيار انزيم استخراج العازلة أو الماء المقطر أو محلول فسيولوجي(

حمام الثلج خليط ،8000g ، 4 ℃طرد مركزي 10min， إزالة ، وهذا هو ، السائل إلى اختبار . عينات من الحيوانات غالبا ما تحتاج إلى تخفيفو

3 البكتيريا والفطريات : حسب عدد الخلايا )( 104 وظائف )حجم استخراج )(مل)في نسبة 500 إلى 1000 : 1 )اقتراح خليةانضمام 1 مل استخراج السائل ) ، حمام الثلج بالموجات فوق الصوتية سحق الخلايا )قوة . 300wبالموجات فوق الصوتية 3 ثانية ، فاصل 7 مجموع الوقت 3 دقائق)؛ثم 8000g，

4℃الطرد المركزي 10 دقايقإزالة وتوضع على الجليد .

تحديد العمليات :

1. طيفيوجهاز التسخين 30 دقيقةضبط الطول الموجي 540 نانومترالماء المقطر .

2. أنابيب فارغة取 0.5 مل إيب أنبوب 40 ميكرولتر الماء المقطر200 ميكرولتر الكاشف 1 ، مختلطة في درجة حرارة الغرفة بعد الوقوف 15 دقيقة， 取 200 ميكرولتر تتبعزجاج طبق اللونيةس ثقب لوحة ،540 نانومتر قياس الألوانA أنابيب فارغة .

3. أنبوب القياسية :取 0.5 مل إيب أنبوب 40 ميكرولتر السائل القياسية ،200 ميكرولتر الكاشف 1 ، مختلطة في درجة حرارة الغرفة بعد الوقوف 15 دقيقة， 取 200 ميكرولتر تتبع الزجاج طبق اللونيةلوحة فتحة 540 نانومترقياس الألوان معيار الأنابيب .

4. تحديد أنبوب :取 0.5 مل إيب أنبوب 40 ميكرولتر السائل تحت الاختبار ،200 ميكرولتر الكاشف 1 ، مختلطة في درجة حرارة الغرفة بعد الوقوف 15 دقيقة， 取 200 ميكرولتر تتبعزجاج طبق اللونيةس ثقب لوحة ،540 نانومتر قياس الألوانA تحديد أنبوب .

ملاحظة : فارغة أنبوب أنبوب القياسية يجب أن تقاس مرة واحدة فقط .

صيغة حساب تركيز البروتين في العينةس

C تحت الاختبار )ملغ/مل)سC أنبوب القياسية× أ تحديد أنبوبA أنبوب فارغ÷ (أ) أنبوب القياسيةA أنبوب فارغو

= 5 × A تحديد أنبوبA أنبوب فارغ÷ (أ) أنبوب القياسيةA أنبوب فارغو

الاحتياطاتس

1. تركيز البروتين في العينة 1 ~ 10mg / ملفي نطاق 1 ملغ / مللا يمكن استخدام هذا الأسلوب ، أعلى من 10 ملغ / مل يجب أن تضعف وفقا لذلك . حتى قياسقبل استخدام 1-2من أجل ضمان تركيز البروتين مجموعة من 1 إلى 10 ملغ / مل .

2. البروتين المستخرج من عينة يمكن الكشف عنها بواسطة محلول فسيولوجي ، مزدوجة تبخير الماء أو لا تحتوي على البروتين . PBS استخراج . كبريتات الأمونيوم ، كبريتات الأمونيومتريس العازلة تدخليجب أن لا تحتوي على هذه المواد في السائل . أو تغييرBCA عدة لتحديد محتوى البروتين .

biurea طريقة تحديد محتوى البروتين كيت