أسيتيل دان القلوي استريز )تشيهوطقم اختبار النشاط

طريقة تتبع 100T/96S

يجب أن تؤخذ قبل التصميم الرسمي 2-3 توقعات الطقس من عينة كبيرة مع توقع الفرق .تحديد المعنى :

تشيه سيرين هيدرولاز ، وجدت على نطاق واسع في مختلف الأنسجة الحيوانية والمصل .تشيه أسيتيل قاعدة دان الحفاز )آخوتحللتنظيم التوصيل العصبي .

مبدأ القياس :

تشيهالحفزآخالتحلل من حمض p-nitrobenzoic كبريتيد( أ )DTNBوعمل جيل 5سلفهيدريل-نيترو حمض البنزويك( أ )TNBون TNBفي 412 نانومترذروة امتصاص 412 نانومترزيادة معدل الامتصاص ، حساب تشيهنشط .

أسيتيل دان القلوي استريز النشاط تحديد عدة P450 سلسلة

تكوين

الكاشف الثالث : مسحوقس رامي4℃حفظ . قبل الانضمام 1.3 مل الكاشف الثاني ، تماما ارتجاج في المخ حل .كاشف أربعة : مسحوقس رامي4℃حفظ . قبل الانضمام 1.3 مل الكاشف الثاني ، تماما ارتجاج في المخ حل .

معايير محددة من المنتجات تخضع المعايير الواردة في مواصفات المنتج

المعدات واللوازم :

الطيف المرئيوenzymic جهاز قياس الألوان ، تتبع الكوارتز طبقس فتحة لوحة ، وانخفاض درجة الحرارة الطرد المركزي ، حمام الماء وعاء ، قابل للتعديل بندقية نقل السائل والماء المقطر .

انزيم الخاماستخراج السائلس

1. التنظيم : حسب نوعية التنظيم )g) : كاشف حجم واحد(مل)في 1س5-10نسبة )اقتراح دعوة 0.1gالانضمام إلى منظمة 1 ملالكواشفأ ) إجراء حمام الثلج خليط ،8000g 4 ℃طرد مركزي 10 دقايقأخذ طاف اختبار .

2. البكتيريا والفطريات : حسب عدد الخلايا )10⁴ كاشف حجم واحد )ملوفي 500-1000س1 نسبة )اقتراح 500 مليون خلية زائددخل 1 مل كاشفوحمام الثلج بالموجات فوق الصوتية سحق الخلايا )قوة . 300wبالموجات فوق الصوتية 3 ثانية ، فاصل 7 مجموع الوقت 3 دقايقوثم 8000gو 4℃الطرد المركزي 10 دقايقإزالة وتوضع على الجليد .

3. مصل السائل : تحديد مباشرة .

تحديد العمليات :

1. طيفيوجهاز التسخين 30 دقيقةضبط الطول الموجي 412 نانومترالماء المقطر .

2. الكاشف الثاني 37℃التسخين في حمام مائي 30 دقيقةمنتدى

3. تتبع الكوارتز طبق اللونيةس فتحة لوحة ، إضافة تباعا 20 ميكرولترطاف160 ميكرولترالكاشف الثاني10 ميكرولتر كاشف ثلاثة 10 ميكرولتركاشف أربعة ، خلط سريعحتى في412 نانومتر تحديد مكان3 دقايق تغيير قيمة امتصاص الضوء الداخليعشرات قيمة امتصاص الضوءA1， 第190s قيمة امتصاص الضوءA2منتدىدلتاA تحديد أنبوب= A2-A1منتدى تشيهحساب النشاط

أ.الصيغة الحسابية لتحديد أثر الكوارتز اللونية طبق على النحو التالي

1. منظمةتشيه نشط

（1）حسب تركيز البروتين

تعريف وحدة النشاط : كل ملليغرام من البروتين في الدقيقة التي تنتج بشكل حفاز 1nmol TNB كمية الانزيم 1 نشاط انزيم وحدة .

تشيه نشاط انزيم(nmol / دقيقة / ملغ بروتمدلتاA ÷ e ÷ d × V عكس مجموعس⁹م( أ )سي بي آر × V عينةو÷T

س سدلتاA ÷ Cpr

（2）حسب نوعية العينة

تعريف وحدة النشاط : تحفيز الإنتاج في الدقيقة لكل غرام من الأنسجة 1nmol TNB كمية الانزيم 1 نشاط انزيم وحدة .

تشيه نشاط انزيم(nmol / دقيقة / غرام الوزن الطازجمدلتاA ÷ e ÷ d × V عكس مجموعس⁹م( أ )W × V عينة÷V مجموع العينةو÷T

سسدلتاA ÷ W

2. البكتيريا والخلاياتشيه نشط

تعريف الوحدة النشطة : لكل 10⁴ إنتاج الخلايا المحفزة في الدقيقة الواحدة 1nmol TNB كمية الانزيم 1 نشاط انزيم وحدة .

تشيه نشاط انزيم(nmol / دقيقة / 10⁴ الخليةمدلتاA ÷ e ÷ d × V عكس مجموعس⁹معدد الخلايا )× V عينة÷V مجموع العينةو÷T

سسدلتاأ ÷عدد الخلايا

3. سيرومتشيه نشط

تعريف وحدة النشاط : تحفيز الإنتاج في الدقيقة لكل مل من المصل 1nmol TNB كمية الانزيم 1 نشاط انزيم وحدة .

تشيه نشاط انزيم(nmol / دقيقة وملمدلتاA ÷ e ÷ d × V عكس مجموعس⁹(÷V) عينة÷T

سدلتاA

εسTNBمعامل الخمود المولي13-6 × 10³ ل / مول / سمنd: طبق اللونية مسار الضوء ،1 سمنVعكس مجموع : مجموع حجم نظام رد الفعل )Lو 200 ميكرولتر = 2 × 10^-4LنV مجموع العينة : استخراج حجم ،1 ملن10⁶س1 مول = 1 × 10⁶ميكرومولنسي بي آرتركيز البروتين )ملغ / مل) ;V عينة : إضافة حجم طاف )ملو0.02 mlنW : عينة نوعية ;Tزمن رد الفعل )دقيقةو3 دقايقمنتدى

ب.استخدام 96 الصيغة الحسابية لتحديد فتحة لوحة على النحو التالي

1. منظمةتشيه نشط

（1）حسب تركيز البروتين

تعريف وحدة النشاط : كل ملليغرام من البروتين في الدقيقة التي تنتج بشكل حفاز 1nmol TNB كمية الانزيم 1 نشاط انزيم وحدة .

تشيه نشاط انزيم(nmol / دقيقة / ملغ بروتمدلتاA ÷ e ÷ d × V عكس مجموعس⁹م( أ )سي بي آر × V عينةو÷T

س سدلتاA ÷ Cpr

（2）حسب نوعية العينة

تعريف وحدة النشاط : تحفيز الإنتاج في الدقيقة لكل غرام من الأنسجة 1nmol TNB كمية الانزيم 1 نشاط انزيم وحدة .

تشيه نشاط انزيم(nmol / دقيقة / غرام الوزن الطازجمدلتاA ÷ e ÷ d × V عكس مجموعس⁹م( أ )W × V عينة÷V مجموع العينةو÷T

س سدلتاA ÷ W

2. البكتيريا والخلاياتشيه نشط

تعريف الوحدة النشطة : لكل 10⁴ إنتاج الخلايا المحفزة في الدقيقة الواحدة 1nmol TNB كمية الانزيم 1 نشاط انزيم وحدة .

تشيه نشاط انزيم(nmol / دقيقة / 10⁴ الخليةمدلتاA ÷ e ÷ d × V عكس مجموعس⁹معدد الخلايا )× V عينة÷V مجموع العينةو÷T

سسدلتاأ ÷عدد الخلايا

3. سيرومتشيه نشط

تعريف وحدة النشاط : تحفيز الإنتاج في الدقيقة لكل مل من المصل 1nmol TNB كمية الانزيم 1 نشاط انزيم وحدة .

تشيه نشاط انزيم(nmol / دقيقة وملمدلتاA ÷ e ÷ d × V عكس مجموعس⁹(÷V) عينة÷T

سدلتاA

εسTNB معامل الخمود المولي13-6 × 10³ ل / مول / سمنdس96 فتحة قطرها الخفيفة ،0.5 سمنV عكس مجموع : مجموع حجم نظام رد الفعل )Lو 200 ميكرولتر = 2 × 10^-4LنVمجموع العينة : استخراج حجم ،1 ملن10⁶س1 مول = 1 × 10⁶ميكرومولنسي بي آرتركيز البروتين )ملغ / مل) ;Vعينة : إضافة حجم طاف )ملو0.02 mlنW : عينة نوعية ;Tزمن رد الفعل )دقيقةو3 دقايقمنتدى

أسيتيل دان القلوي استريز النشاط تحديد عدة P450 سلسلة