الفوسفاتيز القلوية )حزب العدالة والتنمية/ALPوطقم اختبار النشاط

طريقة تتبع 100T/48S

يجب أن تؤخذ قبل التصميم الرسمي 2-3 توقعات الطقس من عينة كبيرة مع توقع الفرق .تحديد المعنى :

حزب العدالة والتنمية/ALP هو بروتين سكري يحتوي على الزنك ، والتي يمكن أن تحلل مختلف الطبيعية والاصطناعية فسفوليبيد monoester المركبات في البيئة القلوية .

حزب العدالة والتنمية/ALP وزعت على نطاق واسع في جميع أجهزة الجسم البشري ، وذلك أساسا في الكبد .

مبدأ القياس :

في بيئة قلوية ،حزب العدالة والتنمية/ALP حفز phenylenedisodium الفوسفات على شكل مواقف الفينول . الفينول 4رد الفعل الأحمر الفرعي مع البوتاسيوم سيانيد الحديديك aminoantipyrineكينون المشتقات 510 نانومترخاصية امتصاص الضوء . من خلال تحديد 510 نانومترزيادة معدل الامتصاصحزب العدالة والتنميةنشط .

النشاط الفوسفاتيز القلوية اختبار كيت استريز سلسلة

تكوين

الكاشف الرابع : سائلس قارورة4℃تجنب الضوء ، ويمكن استخدامها قبل أن يتحول إلى اللون الأزرق والأخضر . معيار : سائلس رامي )إيب الأنابيب2 ميكرومول / مل الفينول حل القياسية ،4℃حفظ .

المعدات واللوازم :

الطيف المرئيوenzymic جهاز قياس الألوان ، تتبع الكوارتز طبقس فتحة لوحة ، الجدول نوع الطرد المركزي ، حمام الماء عموم ، قابل للتعديل ماصة السائل والماء المقطر .

معايير محددة من المنتجات تخضع المعايير الواردة في مواصفات المنتج

استخراج انزيم الخام :

1. التنظيم : حسب نوعية التنظيم )g) : كاشف حجم واحد(مل)في 1س5-10نسبة )اقتراح دعوة 0.1gالانضمام إلى منظمة 1 ملالكواشفأ ) إجراء حمام الثلج خليط ،4℃و8000gطرد مركزي 10 دقايقأخذ طاف اختبار .

2. البكتيريا أو الخلايا : حسب عدد البكتيريا أو الخلايا )104 كاشف حجم واحد )ملوفي 500-1000س1 نسبة )اقتراح 500 عشرة آلافإضافة الخلايا 1 ملالكاشف الأول ) ، حمام الثلج بالموجات فوق الصوتية سحق الخلايا )قوة . 300wبالموجات فوق الصوتية 3 ثانية ، فاصل 7 مجموع الوقت 3 دقايق) ;ثم 8000gو4℃الطرد المركزي 10 دقايقإزالة وتوضع على الجليد .

3. الدم يمكن قياسها مباشرة أو بعد تخفيف مناسب . . .

تحديد الخطوات :

1. طيفيوجهاز التسخين 30 دقيقةضبط الطول الموجي 510 نانومترالماء المقطر .

2. كاشف ثلاثة 37℃التسخين في حمام مائي 30 دقيقةمنتدى

3. أنابيب فارغة取إيب أنبوب 4 ميكرولتر الماء المقطر40 ميكرولتر الكاشف الثاني40 ميكرولتر الكاشف الثالث ، بعد خلط 37℃العزل الحراري في حمام مائي 15 دقيقةنإضافة كاشف أربعة 120 ميكرولتربعد خلط 510 نانومترتحديد الامتصاصAأنابيب فارغة .

4. أنبوب القياسية :取إيب أنبوب 4 ميكرولتر السلع القياسية ،40 ميكرولتر الكاشف الثاني40 ميكرولتر الكاشف الثالث ، بعد خلط 37℃العزل الحراري في حمام مائي 15 دقيقةن

إضافة كاشف أربعة 120 ميكرولتربعد خلط 510 نانومتر تحديد الامتصاصA أنبوب القياسية .

5. الرعاية取إيب أنبوب 4 ميكرولتر طاف40 ميكرولتر الماء المقطر40 ميكرولتر الكاشف الثالث ، بعد خلط 37℃العزل الحراري في حمام مائي 15 دقيقةنإضافة كاشف أربعة 120 ميكرولتربعد خلط 510 نانومترتحديد الامتصاصAتحديد أنبوب .

6. تحديد أنبوب :取إيب أنبوب 4 ميكرولتر طاف40 ميكرولتر الكاشف الثاني40 ميكرولتر الكاشف الثالث ، بعد خلط 37℃العزل الحراري في حمام مائي 15 دقيقةن

إضافة كاشف أربعة 120 ميكرولتربعد خلط 510 نانومتر تحديد الامتصاصA تحديد أنبوب .معيار أنبوب أنبوب فارغة تحتاج فقط إلى جعل أنبوب ، أنبوب قياس و رعاية كل عينة تحتاج إلى القيام به .

ملاحظة : فارغة أنبوب أنبوب القياسية يجب أن تقاس مرة واحدة فقط .

حزب العدالة والتنمية/ALP حساب النشاط

1. في الدمحزب العدالة والتنمية/ALP حساب النشاط

تعريف الوحدة النشطة :37℃في كل ملليلتر من الدم في الدقيقة 1 ميكرومول الفينول بأنها 1 نشاط انزيم وحدة .

حزب العدالة والتنمية/ALP 活力(ميكرومول / دقيقة / مل) = [ج] معيار المنتج× أ تحديد أنبوب- ألف رعاية÷ (أ) أنبوب القياسية- ألف أنبوب فارغ) × V عكس مجموع• •V عينة

÷T = 6.8 × A تحديد أنبوب- ألف رعاية÷ (أ) أنبوب القياسية- ألف أنبوب فارغو

2. في الأنسجة أو البكتيريا أو الخلايا .حزب العدالة والتنمية/ALP حساب النشاط

（1）حسب تركيز البروتين

تعريف الوحدة النشطة :37℃كل ملليغرام من البروتين في الدقيقة 1 ميكرومولالفينول بأنها 1 نشاط انزيم وحدة . AKP / ALP (ميكرومول / دقيقة / ملغ) prot) =[ج] معيار المنتج× أ تحديد أنبوب- ألف رعاية÷ (أ) أنبوب القياسية- ألف أنبوب فارغ) × V عكس مجموع]÷ (Cpr × V)عينة÷T = 6.8 × Aتحديد أنبوب- ألفرعاية÷ (أ)أنبوب القياسية- ألفأنبوب فارغ÷Cpr

（2）حسب نوعية العينة

تعريف الوحدة النشطة :37℃في غرام من الأنسجة في الدقيقة 1 م مول الفينول بأنها 1 نشاط انزيم وحدة .

AKP / ALP (ميكرومول / دقيقة / غرام الوزن الطازج)=[C معيار المنتج× أ تحديد أنبوب- ألف رعاية÷ (أ) أنبوب القياسية- ألف أنبوب فارغ) × V عكس مجموع] ÷ (W × V) عينة÷Vمجموع العينة÷T = 6.8 × Aتحديد أنبوب- ألفرعاية÷ (أ)أنبوب القياسية- ألفأنبوب فارغ÷W

（3）حسب عدد البكتيريا أو الخلايا

تعريف الوحدة النشطة :37℃في كل 10⁴ إنتاج البكتيريا أو الخلايا المحفزة في الدقيقة الواحدة 1 ميكرومولالفينول بأنها 1 نشاط انزيم وحدة .AKP / ALP (ميكرومول / دقيقة / 10)⁴ الخليةس[ج] معيار المنتج× أ تحديد أنبوب- ألف رعاية÷ (أ) أنبوب القياسية- ألف أنبوب فارغ) × V عكس مجموعتعدد الخلايا× V عينة÷V مجموع العينة÷T = 6.8 × Aتحديد أنبوب- ألفرعاية÷ (أ)أنبوب القياسية- ألفأنبوب فارغمعدد الخلايا

C المنتجات القياسية :2μmol / ملنV عكس مجموع : مجموع حجم نظام رد الفعل )ملو205μl = 0.205mlن سي بي آرتركيز البروتين الخام( أ )mg/ مlو，وبالإضافة إلى ذلك ، من المستحسن استخدام BCAأدوات تحديد محتوى البروتين .W : عينة نوعية ;Vعينة : إضافة حجم طاف في نظام رد الفعل )ملو0.004mlنVمجموع العينة : استخراج حجم ،1 ملنTزمن رد الفعل )دقيقةو15 دقيقةمنتدى

ملاحظة :

1. كاشف كاشف كاشف 2 ، 3 ، 4 يجب أن تكون محمية من الضوء .

2. الكواشف لا يمكن استخدامها بعد أربعة يتحول الأزرق والأخضر .

3. بعد إضافة الكواشف ، يجب أن تكون مختلطة على الفور .كاملمنتدى

النشاط الفوسفاتيز القلوية اختبار كيت استريز سلسلة