E14 خلية ثقافة خاصة متوسطة

عمليات معقمةثقافة الخلية يجب أن تتم في بيئة معقمة ، الترا نظيفة الجدول يجب أن تكون معقمة بواسطة الأشعة فوق البنفسجية قبل الاستخدام ، حاضنة الثقافة يجب تنظيفها بانتظام . الموظفين بحاجة إلى تغيير ملابس العمل ، والأحذية ، والأقنعة ، والقفازات .

تعقيم المعداتالأواني الزجاجية ، والأدوات المعدنية ، مثل ارتفاع ضغط البخار التعقيم ، والمنتجات البلاستيكية ، وأكسيد الإثيلين التعقيم أو شراء المنتجات المعقمة .

اختيار الكاشفالكواشف المستخدمة في الثقافة المتوسطة ، المصل ، العازلة ، وما إلى ذلك يجب أن تكون خالية من التلوث العقيم العقيم اختبار قبل الاستخدام . الخلايا المختلفة لديها متطلبات مختلفة على مكونات الثقافة المتوسطة ، ينبغي اختيار مناسب متوسطة الثقافة حسب نوع الخلية .

شروط الزراعةدرجة الحرارة المثلى لمعظم خلايا الثدييات الثقافة 37 ℃ و الانحراف يجب أن تسيطر على ± 0.5 ℃ . . . . . . . حاضنة يجب الحفاظ على ختم جيدة ، والتحقق من تركيز الغاز و معدل التدفق بشكل دوري ، خلية ثقافة عادة ما يتطلب 5 ٪ من ثاني أكسيد الكربون للحفاظ على استقرار قيمة الرقم الهيدروجيني من الثقافة المتوسطة . الرطوبة في حاضنة يجب أن تبقى حوالي 95 ٪ .

االمراقبة اليوميةمورفولوجيا الخلايا ونمو الدولة و تغيير لون الثقافة المتوسطة لوحظ تحت المجهر كل يوم .

الفحوصات الدوريةالميكوبلازما والبكتيريا والفطريات وغيرها من التلوث تم الكشف عنها بانتظام .

E14خلية ثقافة خاصة متوسطة

عرض المنتج

E14خلية ثقافة المتوسطفريق التحسين بعناية ، بعد اختبار طويل الأجل ، يمكن الحفاظ على هذا المنتجE14 الخلايا تنمو بشكل جيد .

هذا المنتج يحتوي على جميع المكونات اللازمة لنمو الخلايا E14 يمكن استخدامها مباشرة في زراعة الخلايا E14 دون إضافة أي عنصر .

المكونات الرئيسية

dmem قاعدة متوسطة 405ml

مصل بقري جنيني فائق 75 مل

النقل والتخزين

النقل : النقل في درجة حرارة منخفضة في العزل الحراري حاوية تحتوي على كيس الثلج البيولوجية

طرق الحفظ : 2 ℃ ～ 8 ℃ ، وتجنب الضوء ، والحفاظ على 2 أشهر . ׏

الاهتمام يقتصر على البحث العلمي .

بعض المكونات في نظام الثقافة هي مواد ضارة بصحة الإنسان ، من فضلك لا تلمس السائل من نظام الثقافة مع الجلد المكشوفة و بقايا السائل من نظام الثقافة داخل الحاوية . هذا الجزء من تركيز المواد الضارة و الضرر منخفضة ، إذا كان الاتصال ، على الفور شطف مع ماء الصنبور .

إنعاش

1 ) سخن ماء في [ ترموستاتي ] ماء حمام وعاء إلى 37 درجة [ ك ] ;

2 . إعداد 15ml أنبوب الطرد المركزي ، إضافة 5 مل متوسطة الثقافة تحتوي على 10 ٪ FBS ، سخن في 37 ℃ . . . . . . .

3 ) ارتداء نظارات واقية ، سميكة الصوف القفازات ، إزالة الخلايا من النيتروجين السائل للدبابات إلى الانتعاش ، في أقرب وقت ممكن إلى 37 ℃ ترموستاتي حمام الماء وعاء

إعادة تسخين الأنابيب المجمدة تهز لزيادة معدل إعادة تسخين .

4 ) امتصاص الخلايا في أنابيب التخزين المجمد ذاب في أنابيب الطرد المركزي المعدة مسبقا ، بعد خلط ، الطرد المركزي 1000 دورة في الدقيقة لمدة 5 دقائق ؛

5 ) إعداد زجاجة تي - 25 الثقافة ، اكتب اسم الخلية والتاريخ ، ثم إضافة 4 مل متوسطة الثقافة؛

بعد الطرد المركزي ، supernatants تم التخلص منها ، ثم الخلايا كانت معلقة في 1 مل متوسطة الثقافة ، ثم تحولت إلى تي 25 خلية ثقافة .

الثقافة في ثاني أكسيد الكربون حاضنة .

مرور ( خلية مرور الاقتراح الأول والثاني )

1 ) عندما تقارب درجة الخلية تصل إلى أكثر من 85 ٪ ، يمكن أن تمر .

2 ) في مجلس الوزراء السلامة البيولوجية ، وفتح زجاجة الفم الثقافة وجمع الثقافة المتوسطة في زجاجة ;

3 ) بعد إضافة 3 مل 1 × برنامج تلفزيوني العقيم في الثقافة زجاجة ، زجاجة الثقافة توضع أفقيا حتى أن برنامج تلفزيوني يمكن أن تتسرب إلى جميع المناطق على السطح السفلي من الثقافة زجاجة ، برنامج تلفزيوني يمكن امتصاصها والتخلص منها .

4 ) إضافة 1 مل من السائل الهضمي في زجاجة ، ثم تغمس في السطح السفلي في 37 ℃ ثاني أكسيد الكربون حاضنة الحضانة لمدة 1 ~ 2 دقيقة .

5 ) بعد الحضنة ، لاحظ ما إذا كان أو لم يكن الخلايا تصبح الجولة العائمة تحت المجهر المقلوب ، إذا كان كل من هضمها ، 2 مل من 10 ٪ FBS متوسطة تضاف مباشرة إلى الثقافة زجاجة ، ثم تعليق امتص في 15 مل أنبوب الطرد المركزي .

① إعداد العقيم 15ml أنبوب الطرد المركزي ، إضافة 2 مل تحتوي على 10 ٪ FBS متوسطة الثقافة .

② هضم الخلايا في أنبوب الطرد المركزي في ① و ( تجنب ضربة ③ ) ؛ إضافة 1 مل إلى الثقافة زجاجة قبل الهضم لمدة 2 دقيقة أو نحو ذلك ، بات الثقافة زجاجة ، حوالي 95 ٪ من الخلايا .

6 ) 1000rpm الطرد المركزي لمدة 5 دقائق؛

7 ) إعداد اثنين من زجاجات الثقافة تي 25 جديدة ، كل إضافة إلى 4 مل متوسطة الثقافة .

8 ) بعد الطرد المركزي ، supernatants مهجورة ، الطرد المركزي الخلايا كانت معلقة في 2 مل متوسطة ، ثم الخلايا التي تم نقلها إلى 2 تي 25 قوارير ، كل منها 1 مل .

9 ) وضع قارورة الثقافة أفقيا ، بعد أن يهز ويخلط جيدا ، وضع قارورة الثقافة في 37 درجة مئوية ، 5 ٪ ثاني أكسيد الكربون حاضنة الثقافة الدائمة .

الحفظ بالتبريد ( تجميد خلية واحدة في زجاجة T25 الموصى بها )

1 ) ~ 6 ) إشارة إلى خطوة مرور

7 ) بعد الطرد المركزي ، supernatants تم التخلي عنها ، ثم الخلايا كانت راسب مع 1 مل من تجميد السائل ثم نقلها إلى 1.8ml تجميد أنبوب .

8 ) نقل أنبوب التخزين المجمد في عملية التبريد مربع مليئة كحولالأيسوبروبيل ، ثم نقل إلى - 80 ℃ الثلاجة بين عشية وضحاها التبريد ؛

9 ) في اليوم التالي ، إزالة أنابيب التخزين المجمد في تسلسل التبريد مربع ، ونقلها إلى خزان النيتروجين السائل في أقرب وقت ممكن للحفاظ عليها .

thrombomodulin الخنازير(TM) ELISAكاشف عدة

ميوسين البشري (ميوسين) ELISA Kitالميوسين البشري(ميوسين)كاشف عدة

Rabbitprothrombinfragme1 + 2 ، F1 + 2ELISAKitأرنب الجزء الأصليF1+2(F1+2)كاشف عدة

CLIAKitforAi-TMالغدة الدرقية microsomal الضد(TM)الأجسام المضادةو

血小板因子4 (عامل الصفائح الدموية IV)نشط fluorometric كيت20وقت .

جزيئة الالتصاق الخنزيري الخلوي 2 ، ICAM-2ELISAKitلحم الخنزير جزيئات الالتصاق بين الخلايا2 (ICAM-2 / CD102)كاشف عدة

رات الجلوتامين مخلقة(غلول)طقم إليسامجموعة GLUL ELISA

أرنب إيرلوكين 8 (IL-8 / CXCL8) ELISA Kitأرنب انترلوكين8 (IL-8 / CXCL8)كاشف عدة

كولاي(O157:H7)الحمض النووي عدة(PCR-مسبار الفلورسنت طريقة) 48T

CLIAKitforMIP-1Beta / CCL4 (البشر ماكروفاج التهابي بروتين-1Beta) ELISAkitبلعم البروتين البشري1ب

فيروس كوكساكي الخلطيةB (فيروس كوكساكي B)كميالـ PCRالتضخيم كيت20وقت .

إليزابيثكلاب5السيروتونين

لحم الخنزير ئيB( أ )أبو - بي) طقم الجمعيةوأصلي

لحم الخنزير ئيA1 (apo-A1)طقم الجمعيةوأصلي

حمل الخنزير )بروج) طقم الجمعيةوأصلي

هرمون البروجسترون الخنزيري )P) طقم الجمعيةوأصلي

5اينوزيتول الفوسفات مستقبلات1الأجسام المضادة

عنصر الدوريةد2الأجسام المضادة

IL1R2المؤتلف الفئرانIL1R2 / IL1RB / CD121bبروتينات(لهعلامةالبروتين

GRP94 (gp96 0.5mgGRP94 (gp96) 94kDaتنظيم الجلوكوز البروتين(مستضداتو

ANP32Aالمؤتلف الإنسانANP32A / PHAP1بروتينات(له و GST)علامةالبروتين

بروتين BLOC1S2 البشريالمؤتلف الإنسانBLOC1S2 / بلوس2بروتينات(GST)علامةو

PGLYRP1 بروتين الماوسالماوس المؤتلفPGLYRP1 / PGRP-Sبروتينات(لهم

E14خلية ثقافة خاصة متوسطةGRP94 (gp96 0.5mgGRP94 (gp96) 94kDaتنظيم الجلوكوز البروتين(مستضداتو

بروتين BLOC1S2 البشريالمؤتلف الإنسانBLOC1S2 / بلوس2بروتينات(GST)علامةو

IL1R2المؤتلف الفئرانIL1R2 / IL1RB / CD121bبروتينات(لهعلامةالبروتين

PGLYRP1 بروتين الماوسالماوس المؤتلفPGLYRP1 / PGRP-Sبروتينات(لهعلامةو

ANP32Aالمؤتلف الإنسانANP32A / PHAP1بروتينات(له و GST)علامةالبروتين