- البريد الإلكتروني
- الهاتف
-
العنوان
غرفة 503 ، وحدة 2 ، بناء 3 ، baicaoyuan 128 malianwa شمال الطريق ، حي هايديان ، بكين
nuobolaide بكين التكنولوجيا المحدودة
غرفة 503 ، وحدة 2 ، بناء 3 ، baicaoyuan 128 malianwa شمال الطريق ، حي هايديان ، بكين
العام تي الناقل مستعمرة PCR كيت
تي العالمي الناقل مستعمرة بكر تحديد كيت
رقم الدليل :42015
تكوين مجموعات التخزين والاستقرار :
تكوين |
80 - 100 مرة (V015-100) |
400 - 500 مرة (V015-500) |
2 × تاك بي سي آر ماسترميكس |
1 مل |
5 مل |
أولية عالمية F |
50ml |
250ml |
البداية العالمية R |
50ml |
250ml |
ddH2O |
1 مل |
5 مل |
خزن-20 ℃ 保存。
منتوج عرض :
مستعمرةالـ PCRتحديدTطريقة سريعة ومريحة لتحديد ما إذا كان أو لم يكن هناك إيجابية استنساخ ( بما في ذلك إدراج جزء ) زوي ولكن يمكن أن نرى في السوق مستعمرةالـ PCRأدوات تحديد الهويةT3، T7أوSP6isospecificTالناقل التمهيدي ، يمكن استخدامها فقط لبعضTالتعرف على ناقلات مرتبطة استنساخ إيجابية . . . . . . . إذا كان استخدام مختلفTولذلك ، نماذج المنفعة يحتاج إلى شراء مختلف أدوات تحديد الهوية في وقت واحد ، مما يزيد كثيرا من تكلفة الاستخدام . وتستخدم الشركة العامةTالعام الناقل التمهيديTالناقل مستعمرةالـ PCRتحديد عدة ، تحتاج فقط إلى شراء عدة ، يمكن استخدامها في السوق في جميعTالناقل(بما في ذلكpGEMوpUCوبرنامج pBluescriptسلسلةوربط إيجابية استنساخ . وبالإضافة إلى ذلك ، اعتمدتT3، T7أوSP6مستعمرة التمهيديالـ PCRالمسافة من التمهيدي الإدراج في الموقع من تحديد عدة قصيرة جدا .100bpعندما يتم إدراج جزء من اليسار واليمين أو أصغر جزء ، التمهيدي ديمر باند من استنساخ السلبية هي مماثلة لتلك التي من استنساخ إيجابية التضخيم ، وبالتالي لا يمكن تمييزها . في كثير من الأحيان ، التمهيدي ديمر العصابات تعتبر إيجابية التضخيم العصابات ، مما أدى إلى إيجابية كاذبة . وعلى العكس من ذلك ، فإنه يسبب سلبية كاذبة . كيت العالميTالمسافة من الناقل التمهيدي على الأقل150bpوبالإضافة إلى ذلك ، فإن طول الإدراج جزء يمكن أن تميز بوضوح ما إذا كانت الفرقة التي تم تضخيمها من قبل الإدراج جزء أو الفرقة التي تم تضخيمها من قبل التمهيدي ديمر . فائدة نموذج يتجنب إيجابية كاذبة أو سلبية كاذبة ، وبالتالي حد كبير في تحسين دقة .الشركة [ ر & د ] أحد أنابيب [ بورتبل ]PCR ماسترميكسنظام خلط ، لا تحتاج إلى إضافة جميع أنواع المكونات ، إضافة مباشرة تحتاج إلى فحص مستعمرة واحدة1حوالي ساعةالـ PCRنتائج تحديد المؤتلف مستعمرة يمكن الحصول عليها من خلال تفاعل البلمرة المتسلسل و الكهربائي الفحص .
شظايا التضخيم المتوقع :
Tاسم الناقل |
مصدر الناقل |
عندما لا يتم إدراج جزء عام .Tالمسافة بين الناقل التمهيدي |
طول شظية التضخيم المتوقع إدراج300bpأمثلة على شظايا ( |
pGEM-T سهل |
pGEM |
281bp |
581bp |
pGEMX-T سهل |
pGEM |
289bp |
589bp |
pMD18-T |
pUC18 |
158bp |
458bp |
pMD19-T |
pUC19 |
158bp |
458bp |
pSURE-T |
pUC19 |
239bp |
539bp |
pUCm-T |
pUC19 |
239bp |
539bp |
pBLUE-T |
برنامج pBluescript |
300bp |
600bp |
ملاحظة :
1. عند تحديد المؤتلف مستعمرة ، قبل اختيار مستعمرة واحدة ، يجب أن يكون علامة جيدة ، من السهل استخدام بعد تحديد الهوية .
2. عند اختيار مستعمرة ، ينبغي اختيار مستعمرة واحدة ، لا اختيار الكثير من البكتيريا ، لئلا تؤثر علىالـ PCRنتائج .
3. مجموعةالـ PCRالبرنامج ، يرجى تحديد تمديد الوقت وفقا لحجم إدراج جزء .1 كيلوبايتتمديد الوقت30-45إذا كان الجزء هو أطول ، تمديد الوقت يمكن زيادة في هذه النسبة .
خطوات التشغيل25mlعلى سبيل المثال ، يمكن للعملاء أيضا استخدام20mlالنظام (
{ج}1. تحتوي على التمهيدي1 x تاك ماسترميكسرد فعل السائل .
2 × تاك بي سي آر ماسترميكس |
12.5ml |
UniversalprimerF(10)mم) |
0.5ml |
UniversalprimerR(10)mم) |
0.5ml |
ddH2O |
11.5ml |
2. بعد مستعمرة عدد على لوحة مسطحة التي تزرع بين عشية وضحاها هو اختيار جزء من مستعمرة واحدة تضاف إلى رد فعل السائل باستخدام بندقية تعقيم الرأس .
أنبوب واحد من دون مراقبة سلبية مستعمرة يمكن أن تكون أكثر ملاءمة لتحليل النتائج التجريبية .
3. ويلالـ PCRأنبوب يوضع على جهاز الدورة الدموية الحرارية لبدء رد الفعل وفقا للشروط التالية ، والشروط المقترحة هي كما يلي :
94℃10 دقايق
94℃30 ثانية
55℃30 ثانية 30-33 دورات
72℃0.5-1 دقيقة
72℃5 دقايق
ملاحظة : تمديد الوقت حسب حجم إدراج جزء . قبل تبديل طبيعة الوقت تمتد إلى10دقيقة ، وذلك أساسا من أجل تقسيم المستعمرات ، والإفراج عنالحمض النوويقالب
بعد رد فعل5-10mlمباشرة على عينة الكهربائي الكشف .
ملاحظة : إذا كانت البكتيريا من الصعب تقسيم أو الشوائب أكثر سلبية كاذبة ، جرب الطريقة التاليةالحمض النوويبعد ذلك .
1. اختيار مستعمرة إضافة 50mل دالماء10mل دتحت الماء
2. 99درجة10تعطيل الإنزيمات في البكتيريا الحل لمدة دقيقة ، والإفراج عنالحمض النوويمنتدى
3. 12000 دورة في الدقيقةطرد مركزي1دقيقة لإزالة شظايا الخلية .
4. إزالة طافالـ PCRو25mل PCRنظام جلب5mlطاف ( بداية )50mل دالماء1mlطاف ( بداية )10mل دالماء ) جعل القالب .
تي العالمي الناقل مستعمرة بكر تحديد كيت