الماوس انترلوكين 1 بيتا

طقم إليسا الماوس انترلوكين 1 بيتا

مقدمةس

IL - 1 ينقسم إلى نوعين : IL - 1 ، IL - 1 β ، IL - 1 الجينات البشرية والفأرة تقع على كروموسوم 2 ، تحتوي على 7 exons . إن proil-1 السلائف ( proil-1 ) هو 31kda ، ناضجة IL - 1 جزيء يتكون من التحلل البروتيني . IL - 1 عالية تماثل في مختلف الأنواع . على مستوى الأحماض الأمينية ، تماثل il-1 α و il-1 β 60 ٪ ～ 70 ٪ و 75 ٪ ～ 78 في المائة ، على التوالي . الوزن الجزيئي il-1 α و il-1 β حوالي 17.5kda ، isoelectric النقاط 5 و 7 ، على التوالي ، تماثل 28 في المائة .IL - 1 β من 17kda الفئران الناضجة و IL - 1 β من القطن الفئران والجرذان أظهرت 90 ٪ من تسلسل الأحماض الأمينية الهوية ، 65 ٪ - 78 ٪ من هوية IL - 1 β من الكلاب والخيول والقطط والبشر والخنازير والقرود .

IL - 1 β تنتج أساسا من وحيدات والضامة في الدم ، والخلايا النجمية ، oligodendrocytes ، قشرة الغدة الكظرية الخلايا ، الخلايا القاتلة الطبيعية ، الخلايا البطانية ، keratinocytes ، megakaryocytes ، الصفائح الدموية ، الخلايا العصبية ، العدلات ، بانيات العظم ، خلايا شوان ، خلايا الأرومة الغاذية ، تي الخلايا الليفية يمكن أن تنتج أيضا IL - 1 β . IL - 1 قد واسعة immunoregulatory وظيفة ، ويمكن أن يسبب الحمى و التوسط في الالتهاب .منتدى

مبدأ الكشفس

سولاربيو (سولاربيو ®)إليسا عدة للكشف عن الأجسام المضادة على أساس ضعف ساندويتشمنتدىسوف تقاومماوس .إيل - 1بالأجسام المضادة وحيدة النسيلة هي المغلفة على لوحة التسمية . تدرج تمييع القياسية قبل تمييع عينة ، على التوالي .ماوس .إيل - 1بالأجسام المضادة على لوحة enzymic المغلفةكافٍملزمبعد غسل المجلسإضافة البيوتين مقاومةماوس .إيل - 1بالأجسام المضادةهذه الأجسام المضادة هي مماثلة لتلك التي من الفئران IL - 1 في لوحة المغلفة مع الأجسام المضادة .بملزمة محددة ؛ بعد غسل المجلسمع إضافة هورس راديش پراكسيداز ( HRP ) المسمى streptavidin البيوتين ،قوة عالية غير تساهميملزمبعد غسل المجلسإضافة المطور الركيزة TMB，إذا كان هناك تركيز مختلفماوس .إيل - 1بثم برنامج الصحة الإنجابية يمكن أن تجعل عديم اللون TMB تتحول إلى مادة زرقاء مع اختلاف العمق ( علاقة طردية ) . ماكس = 450 نانومتر(OD = 450 نانومتر)تحديد امتصاص رد فعل المسام(OD)عينةماوس .إيل - 1بتركيزODمن خلال رسم المنحنى القياسي و أربع معلمات تركيب البرمجيات .خارجعينةماوس .إيل - 1بالتركيز .

رسم تخطيطي

ملاحظة :※ ※

• وينبغي أن تستخدم هذه المجموعة خلال فترة الصلاحية ، من فضلك لا تستخدم الكواشف التي انتهت صلاحيتها .
• وينبغي الحفاظ على مجموعات 2-8 عندما لا تستخدمدرجة مئوية الثلاجة ، قد حللكنتجاهل المعايير غير المستخدمة .
• قبل استخدام عدةمن فضلكالانتعاش في درجة حرارة الغرفة دقيقة，وعلاوة على ذلك ، المكونات المختلفة في عدة مختلطة تماما .إعدادعينة
• أثناء الاختبار ، والمعايير والعينات تشير إلى أن تكون متعددة ثقب اختبار تسلسل إضافة الكواشف ينبغي الحفاظ عليها * .
• لتجنب التلوث الصليب ، يرجى استخدام أنبوب اختبار الثانوية في الاختبار .，لوحة ختم الفيلم（※وتنظيف الحاويات البلاستيكية ..
• تركيز الأجسام المضادة biotinylated وتركيز انزيم كونجوجاتيس أقل في الحجم ، في عملية النقل ، تتبع السائل سوف تلصق على جدار الأنبوب و زجاجة .

قبل استخدام العلاج بالطرد المركزي ( 5-10 ق ) ، حتى أن السائل على جدار الأنبوب تتركز في الجزء السفلي من الأنبوب ، مع استخدام ماصة بعناية ضربة عدة مرات .

• بالإضافة إلى تركيز المنظفات في عدةوإنهاء السوائل يمكن أن تستخدم في الخارج ، من فضلك لا تستخدم مصادر أخرى عدةتحتوي على كاشفاستبدال عنصر واحد في هذه المجموعة .
• لضمان دقة النتائج ، كل اختبارمطلوبجعل منحنى القياسية .

نصائح السلامة :إنهاء الحل في عدة هو حل حامض ،مشغلعند استخداممن فضلكارتداء القفازات الخاصة بك وحماية لهم .أيضا في عمليةتجنب الاتصال مع الجلد والعينين ، إذا كان الاتصال غير مقصود ، يرجى استخدام الكثير من المياه النظيفة . عند اختبار عينات الدم وغيرها من سوائل الجسم ، يرجى اتباع القواعد ذات الصلة في إدارة السلامة والحماية في المختبر البيولوجي الوطني .

تكوين وتخزين عدةس

معدات المختبرات الخاصة ( غير متوفرة ، يمكن شراؤها بدلا من ذلك )

• enzymolyte ( 450nm الطول الموجي الرئيسي ، إشارة الطول الموجي 630nm ) .
• عالية الدقة ماصة ماصة المتاح : 0.5-10 , 2-20 , 20-200 , 200-1000 ميكرولتر
• غسالة أو زجاجة
• 37℃احتضانتربىصندوق
• مزدوجة تبخير المياه ، ديونيزيد المياه ، اسطوانة قياس ، الخ .
• مادة البولي بروبيلين أنبوب اختبار تخفيف

جمع العينات وتخزينها :

• خلية ثقافة طاف

ثقافة الخلية المتوسطة تم نقلها إلى أنبوب الطرد المركزي العقيمسالطرد المركزي لمدة 10 دقائق ، ثم وضع طاف في أنبوب صغير الجيش الشعبي2الحفاظ على( يمكن تخزينها في 2-8 ℃ في غضون 24 ساعة من الاختبار )تجنب تكرار التجميد والذوبان .

• عينة مصل

بعد 20 دقيقة من تخثر الدم الطبيعي في درجة حرارة الغرفةسالطرد المركزي لمدة 10 دقائق ، ثم وضع طاف في أنبوب صغير الجيش الشعبي20 ℃ ( في غضون 24 ساعة يمكن تخزينها في 2-8 ℃ ) أثناء التخزين ، إذا كان هناك هطول الأمطار ، الطرد المركزي مرة أخرى لتجنب تكرار التجميد والذوبان .

• عينات البلازما :

الدم كله تم جمعها في الأنابيب التي تحتوي على مضادات التخثر ، يدتا ، سيترات الصوديوم أو الهيبارين تم اختيارها حسب الطلب الفعلي من العينات .سالطرد المركزي لمدة 10 دقائق ، ثم وضع طاف في أنبوب صغير الجيش الشعبي20 ℃ ( في غضون 24 ساعة يمكن تخزينها في 2-8 ℃ ) لتجنب تكرار التجميد والذوبانمنتدى

※ملاحظةتجنب استخدام عينة مصل الدم الانحلالي ، وارتفاع الدهون في الدم عينة لتجنب التأثير على نتائج الاختبارنإذا كانت العينةالهدفاختبار تركيز أعلى من قيمة عالية من المنتجات القياسية ، يرجى القيام به بشكل صحيح تخفيف العينة بعد الاختبار ، اقترح إجراء اختبار قبل الاختبار الرسمي لتحديد تخفيف متعددة .

إعداد الكواشفس

• كاشف درجة الحرارة : أول 30 دقيقة قبل التجربةطقمتحت الاختبارعينةوضعدرجة حرارة الغرفةتحتإذا كان تركيز محلول الغسيل تبلور ، يرجى وضع في حمام دافئ في 37 ℃ حتى يذوب تمامامنتدى
• إعدادسائل الغسيلاستخدام حجم محلول الغسيل المخفف وتحسب في وقت مبكر .استخدام مزدوج بخار الماء أو الماء منزوع الأيوناتعصرتركيز محلول الغسيل المخفف فيعصرتطبيق السائل ، غير المستخدمة تتركز المنظفات في4℃حفظ الثلاجة .

3. معيار المنتجتمييع التدرجسإضافة معيارعينةمخفف )S(R1)1 ملتجميد المجفف القياسية ، وترك لمدة 15 دقيقة حتى يذوب الخليط بلطف2000pg/ml)， ثمحسبالتركيزات التالية :و1000 , 500 , 250 , 125 , 62.5 , 31.25 , 0 بيكوغرام / مل كانت مخففة . حل القياسية الخام )2000pg / مل)غير المستخدمة يجب أن تكون مهجورة أو تحميلها حسب الحاجة ، وتخزينها في الثلاجة - 20 - 80 درجة مئوية .على وجه التحديد على النحو التاليصورةمنتدى

4. البيوتين الضد السائل العامل :تحسب مسبقاالجرعة المطلوبة للاختبار ، مع الكشف عن تمييع )S(R2)100 مرة تركيز الأجسام المضادةمخففتطبيق سائل العمل إلى 1 مرات )تخلط جيدا قبل تمييعو，من فضلكفي 30 دقيقةإضافة إلى رد فعل حفرة .

البيوتين الضد السائل العامل محددةطريقة التخفيفعلى النحو التالي :

5. عمل حل انزيم كونجوجاتيس : أعد في الجرعة المطلوبة في كل اختبار ، المخفف مع انزيم كونجوجاتيس )SR3 ) تمييع 100 مرة تركيز انزيم كونجوجاتيس فيتطبيقالعامل السائل（قبل تمييعالطرد المركزي (، يرجى استخدام في غضون 30 دقيقةمنتدى

عمل انزيم كونجوجاتيس السائل محددةطريقة التخفيفعلى النحو التالي :

6. طريقة الغسل :

• التلقائي غسل المجلس : قذف السائل من خلال ثقب في انزيم مارك المجلس ، بات الجافة على سميكة مغلفة ورقة ماصة ، حقن سائل الغسيل لمدة 3 دقائق .00ul / حفرة ، حقن وامتصاص فترات 30 ثانية ، وغسل لوحة 5 مرات .
• ومن ناحية غسل المجلس : قذف السائل من خلال ثقب في انزيم علامة المجلس ، بات الجافة على ورقة سميكة مغلفة ماصة ، إضافة سائل الغسيل مع غسل زجاجة 3 .00ul / حفرة ، لا يزال 30 ثانية في وقت لاحق ، ورمي السائل في حفرة من الانزيم المسمى المجلس ، بات الجافة على ورقة ماصة سميكة ، وغسل المجلس 5 مرات .

خطوات الكشف :

نتيجة الحكمس

1 - تحديد قيمة التطوير التنظيمي في 450nm الطول الموجي . اختيار مزدوج الطول الموجي للكشف عن إشارة الطول الموجي 630 نانومتر .ODتحديد القيمةطرحنانومترODتحديد القيمة .

2 - حساب متوسط قيمة التطوير التنظيمي القياسية ، عينة : التطوير التنظيمي قيمة كل معيار عينة تطرح قيمة التطوير التنظيمي من ثقب صفر

3 . منحنى القياسية التي رسمها البرنامج مع تركيز معيار الإحداثي السيني و التطوير التنظيمي قيمة الامتصاصية الإحداثي الطولي .وسطإيل - 1بيمكن تمرير المحتوىالمراسلاتقيمة التطوير التنظيمي هو تحويلها إلى تركيز المقابلة من منحنى القياسية .

4 . إذا كان التطوير التنظيمي قيمة العينة أعلى من الحد الأعلى من منحنى القياسيةفعلبعد تخفيف مناسبإعادة الكشفعند حساب التركيز ، مضروبا في تخفيف متعددةمنتدى

معلمة التمثيلس

1 - البيانات والمنحنيات القياسية

هذا الرسم هو للرجوع اليها فقط ، وينبغي أن تحسب على أساس منحنى القياسية التي رسمها معيار اختبار المنتج .ماوس .إيل - 1بمحتوى العينة

2. حساسية

انخفاض الكشفماوس .إيل - 1بتركيز15pg/ml،

متوسط تركيز التطوير التنظيمي 20 صفر القياسية بالإضافة إلى اثنين من الانحرافات المعيارية ، المقابلة يمكن الكشف عن تركيز محسوبة .

3. خصوصية

لاماوس .إيل2、و4 , 67سIL-1a و IL-1Raرد فعل مماثل

4. التكرار

في لوحة ، لوحة معامل الاختلاف < 10%

5. معدل الاسترداد

في اختيارالصحةماوس .البلازماخلية ثقافة طافثلاثة مستويات مختلفة من التركيزماوس .إيل1بحساب معدل الاسترداد .

6. خطي تخفيفس

على التوالي في اختيار4 حصص صحيةالماوس البلازما و خلية ثقافة طافإضافة تركيز عالماوس .إيل1بفي منحنى القياسية مجموعة ديناميكية ، تمييع ، تقييم خطي .

المراجعس

1ديناريلو، سي.أ. (1994) شبكة سيتوكين اليورو.5: 517 .

2مارس، سي جي وآخرون (1985) الطبيعة315: 641 .

3Sims, J. E. et al. (1989) Proc. ناتل. أكاديمية. العلوم. الولايات المتحدة الأمريكية86: 8946 .

4سيمز، جيه إي وآخرون (1988) العلوم241: 585 .

5هوانغ، ج. وآخرون (1997) Proc. ناتل. أكاديمية. العلوم. الولايات المتحدة الأمريكية94: 12829 .

6Wesche، H. وآخرون (1997) J. Biol. كيمياء.272: 7727 .

7Sims, J. E. et al. (1993) Proc. ناتل. أكاديمية. العلوم. الولايات المتحدة الأمريكية90: 6155 .

8جيري، جي جي وآخرون (1994).153: 5802 .

9Symons, J. A. et al. (1995) Proc. ناتل. أكاديمية. العلوم. الولايات المتحدة الأمريكية92: 1714 .

10Wewers, M.D. وآخرون (1997) J. Immunol.159: 5964 .

11غونزاليس - هرنانديز، ج. أ. وآخرون (1995). إكسب. إيمونول.99: 137 .

المشاكل المشتركة والحلولس

طقم إليسا الماوس انترلوكين 1 بيتاتعليمات الطلب :

1 ، فإن الغالبية العظمى من المنتجات المتاحة في الأوراق المالية ، في ظل الظروف العادية يمكن أن يأمر يوم التسليم .
2 ، بعض المنتجات غير العادية ، تحتاج إلى حجز 1-2 أيام مقدما ، العقود الآجلة في الخارج تحتاج إلى حجز 3-6 أسابيع مقدما .
3 ، بعض أسعار المنتجات سوف تتغير بسبب تاريخ الشحن ، الكثير ، وغيرها من العوامل ، إذا كان هناك تغيير في الأسعار الجديدة في تاريخ النظام .
4 ، من أجل الموعد النهائي اليومي هو 16 دقيقة ، بعض المدن يمكن أن تصل إلى 17 دقيقة ، لأن أكثر من الموعد النهائي في ذلك اليوم لن تكون قادرة على تسليم البضائع سوف تكون مرتبة في اليوم التالي .
5 ، يرجى الانتهاء من الدفع ، جنبا إلى جنب مع أسفل قائمة عنوان المرسل إليه ، الاسم ، الخ الفاكس ، الرسائل القصيرة ، وغيرها من أشكال إعلامنا .

تعليمات النقل :

درجة حرارة منخفضة للغاية من المنتجات : نقل المنتجات المبردة للغاية مع الثلج الجاف أثناء النقل . التفاف المنتجات مع الثلج الجاف ، مختومة مع رغوة مربع ، شريط لاصق طبقة على طبقة من الرغوة مربع ، وضعت في صندوق Solaibao ، ثم تسليمها إلى التعاون السريع ، آمنة وفعالة في أيدي العملاء ، وضمان استقرار طبيعة المنتج ، مثل واحد ، من أجل حماية التجربة الخاصة بك .
انخفاض درجة حرارة المنتج : انخفاض درجة حرارة المنتج في عملية النقل إضافة إلى حقيبة الثلج Solaibao النقل . قبل التفاف المنتج مع كيس الثلج ، ثم استخدام رغوة مربع مختومة ، مختومة بإحكام مع شريط لاصق رغوة مربع ، ثم وضع في مربع ( sulaibao تأثير العزل الحراري يمكن أن تستمر لمدة أقل من أسبوع ) ، ثم تسليمها إلى التعاون السريع ، آمنة وفعالة وموثوق بها تسليم أيدي العملاء ، وضمان استقرار طبيعة المنتج ، مثل واحد ، مرافقة التجربة الخاصة بك .
المنتجات في درجة الحرارة العادية : لا الجليد أو التعبئة والتغليف الخاصة المطلوبة أثناء نقل المنتجات في درجة الحرارة العادية . المنتجات من قبل موظفي الشركة مستودع سريع التسليم ، سريعة ودقيقة وفعالة لضمان التسليم السريع من المنتجات في يديك .