الخلايا الكلوية الجنينية البشرية 293t

hek-293t الخلايا الكلوية الجنينية البشرية

يا 293t ' 293t ' .

تحديد الخلايا ل

شارع التوثيق قد مرت

ل مصدر الخلية

قاعدة الموارد الوطنية

ل خلية الخلفية

hek-293t الخلايا المشتقة من 293t ( 293tsa1609neo ) خط الخلية ( atcc crl-11268 ) . الخلايا باستمرار عن sv40 مستضد ، والتي غالبا ما تستخدم في تعداء التجربة . ( transfected عادة مع 50 ٪ كثافة اللوح ، حتى الخلايا فقط عصا على الجدار ( عادة 8-10 ساعات ) ، يمكن أن تعداء العملية )

ل خصائص الخلية

1 ) المصدر : الكلى الجنينية البشرية

2 ) التشكل : epithelioid ، ملتصقة النمو وضعف القدرة على الالتصاق

3 ) المحتوى : > 1x106 عدد الخلايا

4 ) المواصفات : T25 زجاجة أو 1ml حزمة أنبوب التخزين المجمد

5 ) إستعمال : فقط لأنّ إستعمال علميّة

ل ظروف الثقافة :

1 ) إعداد DMEM ( أوصت AWCELL - 0001 ) متوسطة الثقافة؛ مصل بقري جنيني عالي الجودة ، 10 ٪ ؛ ل - الجلوتامين ( 2 مم ) 1 ٪ ؛ NEAA 1% ； مقاومة مزدوجة 1%

2 ) الثقافة شرط : بخار المرحلة : الهواء ، 95 ٪ ؛ ثاني أكسيد الكربون درجة الحرارة : 37 ℃ ، الرطوبة في حاضنة 70 ٪ - 80 ٪ .

( ل ) الاحتياطات :

هذه الخلايا هي خلايا ملتصقة تعليق طفيف ، ويمكن أن يكون مرور المشار إليها في الطرق التالية :

1 . جمع : جمع تعليق الخلايا في الثقافة زجاجة في أنبوب الطرد المركزي . برنامج تلفزيوني الخلايا تغسل 1-2 مرات دون الكالسيوم والمغنيسيوم الأيونات . برنامج تلفزيوني يجب أن تعاد إلى أنبوب الطرد المركزي لأن الخلايا لا تعلق على الجدار بعد غسلها .

2 - إضافة 0.25 في المائة ( ث / ت ) trypsin-0.53 ملم يدتا في قارورة ( T25 1-2ml ، T75 2-3ml ) في 37 ℃ لمدة 1-2 دقيقة ( عسر الهضم الخلايا يمكن أن تطيل فترة الهضم بشكل صحيح ) ، ثم لاحظ تحت المجهر ، إذا كان الجزء الأكبر من الخلايا مستدير و تقشر بسرعة العودة إلى طاولة العمليات ، اضغط على قارورة عدة مرات ، إضافة 3-4ml تحتوي على 10 مل متوسطة الهضم لإنهاء .

3 - تعليق الخلايا ، الخلايا في تنظيف السائل PBS وهضم خلايا ملتصقة تم طرد 1000 دورة في الدقيقة لمدة 5 دقائق ، طاف تم التخلص منها ، ثم تعليق 1-2 مل متوسطة أضيفت إلى تعليق 1 : 2 ، ثم تم تقسيم تعليق خلية جديدة في زجاجة T25 ، 6-8 مل * متوسطة أضيفت إلى الحفاظ على نمو الخلايا .

cryopreserved 293t الخلايا الجنينية البشرية خلايا الكلى : بعد الحصول على الخلايا ، فمن المستحسن للحفاظ على مجموعة من بذور الخلايا في أول 3 أجيال من الثقافة لاستخدامها في التجارب اللاحقة .

أشكال النقل :

انخفاض درجة الحرارة : ( 1 ) 1 مل من الجليد الجاف التعبئة والتغليف والنقل ، بعد تلقي - 80 درجة الثلاجة بين عشية وضحاها بعد الحفظ في النيتروجين السائل أو الانتعاش المباشر ، إذا وجدت أن الثلج الجاف قد تبخرت نظيفة ، تجميد أنبوب غطاء زجاجة قبالة ، تلف الخلايا الملوثة ، يرجى الاتصال بنا على الفور .

درجة الحرارة العادية ( 2 ) زجاجة T25 تعافى الخلايا الحية يتم شحنها في درجة الحرارة العادية ، بعد أن وردت ، الخلايا الحية يتم تشغيلها وفق طريقة المعالجة بعد تلقي الخلايا .

ل السلامة البيولوجية :

1 - جميع الخلايا الحيوانية تعتبر خطرة بيولوجيا ، يجب أن تعمل في المرحلة الثانية من السلامة البيولوجية منصة . يرجى ملاحظة أن جميع النفايات السائلة والأواني التي تأتي في اتصال مع هذه الخلايا يجب أن تكون معقمة قبل التخلص منها .

2 - ينصح دائما استخدام القفازات الواقية ، والملابس الواقية أقنعة الوجه عند استعادة الخلايا المجمدة . ملاحظة : تجميد الأنابيب المغمورة في النيتروجين السائل سوف تتسرب ، وسوف ببطء ملء النيتروجين السائل . عندما يذوب النيتروجين السائل في مرحلة الغاز يمكن أن يؤدي إلى انفجار السفينة أو ضربة قبالة غطاء مع قوة خطيرة ، مما أدى إلى ارتفاع الحطام ، مما تسبب في أضرار بشرية .