h9c2 الفئران خلايا عضلة القلب

الفئران خلايا عضلة القلب h9c2

تحديد الخلايا ل

تحديد الأنواع قد مرت

ل مصدر الخلية

قاعدة الموارد الوطنية

ل خلية الخلفية

( 2-1 ) h9c2 خط الخلية subcloned من bd1x المستمدة من قلب فأر جنيني الأنسجة ، والتي أظهرت العديد من خصائص العضلات والهيكل العظمي . myoblasts في هذا الخط من الخلايا يمكن أن تنصهر في القنوات العضلية المتعددة النوى و الرد على تحفيز أستيل . إذا كان تركيز المصل في المتوسط انخفض إلى 1 ٪ ، والانصهار يحدث بسرعة .

ل خصائص الخلية

1 ) المصدر : القلب

2 ) التشكل : Myoblasts ، نمو ملتصقة

3 ) المحتوى : > 1x106 عدد الخلايا

4 ) المواصفات : T25 زجاجة أو 1ml حزمة أنبوب التخزين المجمد

5 ) إستعمال : فقط لأنّ بحث إستعمال .

ل ظروف الثقافة :

1 ) إعداد dmem ( بما في ذلك 1.5g / l nahco3 التوصية : awcell-128-0001 ) أو ( gibco رقم 12800017 ، إضافة nahco3 1.5g / l ) متوسطة الثقافة . مصل بقري جنيني عالي الجودة ، 10 ٪ ؛ مقاومة مزدوجة

2 ) الثقافة شرط : بخار المرحلة : الهواء ، 95 ٪ ؛ ثاني أكسيد الكربون درجة الحرارة : 37 درجة مئوية ، حاضنة الرطوبة 70 ٪ - 80 ٪ .

( ل ) الاحتياطات :

ملاحظة : الفئران خلايا عضلة القلب h9c2 نمت بشكل جيد في dmem ( تحتوي على 1.5g / lnahco3 ) متوسطة ، ومعظم العلامات التجارية dmem تحتوي على تركيزات عالية من nahco3 ( 3.7g / l ) .

يمكن الإشارة إلى الطرق التالية من أجل مرور الخلايا الملتصقة :

1 - إزالة طاف ، وغسل الخلايا مع برنامج تلفزيوني بدون أيونات الكالسيوم والمغنيسيوم 1-2 مرات .

2 - إضافة 0.25 ٪ ( ث / ت ) trypsin-0.53 ملم EDTA في قارورة ( T25 1-2ml ، T75 2-3ml ) في 37 ℃ لمدة 1-2 دقيقة ( عسر الهضم الخلايا يمكن أن تطيل فترة الهضم بشكل صحيح ) ، ثم لاحظ تحت المجهر الهضم . إذا كان جزء كبير من الخلايا تصبح مستديرة و تقشر ، ثم العودة إلى طاولة العمليات بسرعة ، اضغط على عدة زجاجات ، إضافة 3-4ml تحتوي على 10 مل في المتوسط لإنهاء عملية الهضم .

3 - ضخ بلطف ، الطرد المركزي في 1000 دورة في الدقيقة لمدة 3-5 دقائق ، تجاهل طاف ، إضافة 1-2 مل متوسطة الثقافة ثم تهب بالتساوي . تعليق خلية تم تقسيمها إلى 2 : 1 زجاجة جديدة T25 ، 6-8ml * الثقافة المتوسطة التي تم تكوينها وفقا لمتطلبات تعليمات للحفاظ على نمو الخلايا وحيويتها .

cryopreserved الخلايا : بعد تلقي الخلايا ، فمن المستحسن أن cryopreserved دفعة من بذور الخلايا في أول 3 أجيال من الثقافة لاستخدامها في التجارب اللاحقة .

أشكال النقل :

انخفاض درجة الحرارة : ( 1 ) 1 مل من الجليد الجاف التعبئة والتغليف والنقل ، بعد تلقي - 80 درجة الثلاجة بين عشية وضحاها بعد الحفظ في النيتروجين السائل أو الانتعاش المباشر ، إذا وجدت أن الثلج الجاف قد تبخرت نظيفة ، تجميد أنبوب غطاء زجاجة قبالة ، تلف الخلايا الملوثة ، يرجى الاتصال بنا على الفور .

درجة الحرارة العادية ( 2 ) زجاجة T25 تعافى الخلايا الحية يتم شحنها في درجة الحرارة العادية ، بعد أن وردت ، الخلايا الحية يتم تشغيلها وفق طريقة المعالجة بعد تلقي الخلايا .

ل السلامة البيولوجية :

1 - جميع الخلايا الحيوانية تعتبر خطرة بيولوجيا ، يجب أن تعمل في المرحلة الثانية من السلامة البيولوجية منصة . يرجى ملاحظة أن جميع النفايات السائلة والأواني التي تأتي في اتصال مع هذه الخلايا يجب أن تكون معقمة قبل التخلص منها .

2 - ينصح دائما استخدام القفازات الواقية ، والملابس الواقية أقنعة الوجه عند استعادة الخلايا المجمدة . ملاحظة : تجميد الأنابيب المغمورة في النيتروجين السائل سوف تتسرب ، وسوف ببطء ملء النيتروجين السائل . عندما يذوب النيتروجين السائل في مرحلة الغاز يمكن أن يؤدي إلى انفجار السفينة أو ضربة قبالة غطاء مع قوة خطيرة ، مما أدى إلى ارتفاع الحطام ، مما تسبب في أضرار بشرية .