- البريد الإلكتروني
- الهاتف
-
العنوان
رقم 8 ، تشونغ قوان تسون البرمجيات بارك ، حي هايديان ، بكين
فئات المنتج
بكين lanbolide للتجارة المحدودة
الكلوروفورم كاشف عن trizol بال استخراج الحمض النووي
قابلة للتفاوضتحديث05/06
- نموذج
- طبيعة المصنع
- المنتجين
- فئة المنتج
- مكان المنشأ
نظرة عامة
trizol بال استخراج الحمض النووي هو كاشف الكلوروفورم المستخدمة في استخراج الحمض النووي الريبي . trizol بال ( كلوروفورم كاشف ) يمكن أن تستخدم بالاقتران مع trizol reagent ( المادة رقم : R1000 ) يمكن أن تحل محل الكلوروفورم ، مرارا وتكرارا استخراج نظام تكسير لإزالة البروتين ، وتستخدم على نطاق واسع ، يمكن استخراج الحمض النووي الريبي من الأنسجة الحيوانية ، والمواد النباتية ، وجميع أنواع الكائنات الحية الدقيقة والخلايا المستزرعة ، مثل عينات . عينة يمكن أن تكون مجزأة تماما في تريزول ، وفي الوقت نفسه ضمان سلامة الحمض النووي الريبي إلى أقصى حد .
تفاصيل المنتج
تريزول بال الكلوروفورم كاشف لاستخراج الحمض النووي الريبيرقم الشحن : R1200
حالة التخزين : 0-30 ℃ ضوء تجنب التخزين
تريزول بال الكلوروفورم كاشف لاستخراج الحمض النووي الريبيوصف المنتج :
تريزول بال يمكن استخدامها بالاقتران مع تريزول reagent ( المادة رقم : R1000 ) ، يمكن أن تحل محل الكلوروفورم ، مرارا وتكرارا استخراج نظام الانحلال الحراري لإزالة البروتين ، ويستخدم على نطاق واسع ، يمكن استخراج الحمض النووي الريبي الكلي من الأنسجة الحيوانية ، والمواد النباتية ، وجميع أنواع الكائنات الحية الدقيقة والخلايا المستزرعة وغيرها من العينات . عينة يمكن أن تكون مجزأة تماما في تريزول ، وفي الوقت نفسه ضمان سلامة الحمض النووي الريبي إلى أقصى حد . بعد إضافة trizol بال الطرد المركزي ، الحل يمكن تقسيمها إلى ثلاث طبقات : الطبقة العليا من المياه عديم اللون المرحلة ، الطبقة الوسطى و الطبقة السفلى من الأحمر المرحلة العضوية ، والجيش الملكي النيبالي في طاف طبقة . بعد جمع supernatants ، مجموع الحمض النووي الريبي يمكن استردادها من خلال هطول الأمطار من الكحول الآيزوبروبيل . . . . . . . مجموع الحمض النووي الريبي هو جيد في السلامة ، لا تلوث البروتين والحمض النووي ، ويمكن استخدامها في مختلف التجارب التقليدية في علم الأحياء الجزيئي ، مثل RT-PCR、Real-time RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、 الترجمة في المختبر .
كاشف الذاتي
trizol reagent ( البند رقم : R1000 ) ، كحولالأيسوبروبيل ، 75 ٪ إيثانول ، ريبونوكلياز خالية من الماء
جهاز استخراج الحمض النوويملاحظة :
1 . لمنع تلوث ريبونوكلياز ، ينبغي إيلاء الاهتمام إلى الجوانب التالية :
1 ) استخدام المنتجات البلاستيكية RNASE الحرة ورئيس بندقية ، وتجنب التلوث الصليب .
2 ) الأواني الزجاجية يجب أن تكون جافة خبز في درجة حرارة عالية 180 درجة مئوية لمدة 4 ساعات قبل الاستخدام ، والأواني البلاستيكية يمكن أن تكون غارقة في 0.5 م هيدروكسيد الصوديوم لمدة 10 دقائق ، شطف مع Chedi بعد التعقيم ذات الضغط العالي .
3 ) إعداد الحل ينبغي أن تستخدم المياه دون ريبونوكلياز .
4 ) مشغلي ارتداء أقنعة المتاح والقفازات ، والقفازات يجب أن تتغير في كثير من الأحيان أثناء التجربة .
2 ، تجنب تكرار تجميد والذوبان ، أو تؤثر على استخراج الحمض النووي الريبي العائد والجودة .
3 ، عند استخدام هذا المنتج ، ينبغي ارتداء المواد الواقية ، مثل القفازات ، قناع العين ، قناع الوجه ، الخ . إذا كنت تأتي في اتصال مع العين ، شطف فورا مع الكثير من الماء و الذهاب إلى المستشفى للعلاج . عندما يستخدم نموذج المنفعة ، نماذج المنفعة هي بعيدة عن النار و مصدر الحرارة .
3 ، والحفاظ على 75 ٪ من الإيثانول في الحمض النووي الريبي هطول ، 2-8 ℃ يمكن الحفاظ عليها لمدة أسبوع ، 20 ℃ يمكن الحفاظ عليها لمدة سنة واحدة .
4 ، الجيش الملكي النيبالي هو نصف الحياة قصيرة نسبيا ، من السهل أن تتحلل ، اقترح بعد استخراج في أقرب وقت ممكن بعد متابعة التجارب ، مثل النسخ العكسي كدنا ، شمال لطخة وهلم جرا .
5 ، إذا كان المصب تجربة حساسة جدا إلى الحمض النووي ، نوصي باستخدام الحمض النووي الريبي لا تحتوي على الحمض النووي الريبي أنا للتعامل مع .
خطوات التشغيل :
1 ، وتجهيز المواد المختلفة .
1-1 الأنسجة النباتية : الأنسجة النباتية الطازجة تماما مطحون في النيتروجين السائل أو قطع زهي إلى قطع ، ثم بسرعة مطحون في تريزول ، إضافة 1 مل تريزول كل 30-50 ملغ من الأنسجة ، ثم يخلط جيدا .
ملاحظة : حجم العينة عادة لا تتجاوز 10 ٪ من حجم تريزول .
1-2 الأنسجة الحيوانية : الطازجة أو المجمدة الأنسجة الحيوانية - 70 ℃ قطع قدر الإمكان ، كل 30-50 ملغ من الأنسجة إضافة 1 مل من تريزول ، خليط من العلاج . أو إضافة تريزول 1 مل بعد طحن في النيتروجين السائل .
ملاحظة : حجم العينة عادة لا تتجاوز 10 ٪ من حجم تريزول .
1-3 طبقة واحدة من الخلايا المستزرعة : امتصاص الثقافة المتوسطة ، إضافة كمية مناسبة من تريزول ( 1 مل تريزول لكل 10 سم 2 ) مباشرة في الثقافة لوحة ، ثم استخدام العينات مرارا وتكرارا ضربة لجعل الخلية الانقسام . بعد العلاج مع pancreatopeptidase باي حل الخلية يمكن نقلها إلى أنبوب الطرد المركزي ريبونوكلياز مجانا ، 300 × ز الطرد المركزي لمدة 5 دقائق .
ملاحظة : 1 ) عدد الخلايا التي تم جمعها لا يتجاوز 1 × 10 7 .
2 ) جرعة من trnzol يتحدد حسب مساحة لوحة الثقافة ، وليس عدد الخلايا . إذا trizol إضافة كمية كافية ، قد يؤدي إلى الحمض النووي الريبي المستخرج من التلوث .
3 ) عند جمع الخلايا ، يجب إزالة خلية ثقافة السائل نظيفة ، وإلا فإنه سوف يؤدي إلى انقسام كامل وان ، مما أدى إلى انخفاض في إنتاج الحمض النووي الريبي .
1-4 تعليق خلية : الطرد المركزي جمع الخلايا . كل 5 × 10 6-1 × 10 7 الحيوانات والنباتات وخلايا الخميرة أو 10 7 الخلايا البكتيرية إضافة 1 مل تريزول .
ملاحظة : 1 ) لا تغسل الخلايا قبل إضافة تريزول لتجنب تدهور الحمض النووي الريبي .
2 ) بعض خلايا الخميرة والبكتيريا قد تحتاج إلى جهاز خلط أو النيتروجين السائل لطحن العلاج .
1-5 الدم العلاج : أخذ الدم الطازج مباشرة ، إضافة 3 مرات حجم تريزول ( 0.25 مل من الدم الكامل الموصى به إضافة 0.75 مل من تريزول ) ، كامل التذبذب والخلط .
الخطوة 1-6 : عينة تحتوي على نسبة عالية من البروتين ، الدهون ، السكريات ، أو المواد خارج الخلية ، مثل الأنسجة العضلية ، الأنسجة الدهنية أو الدرنات النباتية ، يمكن أن تكون مختلطة في 4 ℃ ، 12 ، 000 دورة في الدقيقة ( ~ 13 ، 400 × ز ) الطرد المركزي لمدة 10 دقائق لإزالة المواد غير القابلة للذوبان ، في حين أن الرواسب تحتوي على مادة خارج الخلية ، السكاريد ، عالية الوزن الجزيئي الحمض النووي الريبي في supernatants . . . . . . .
2 ، بعد إضافة تريزول في العينة ، مرارا وتكرارا ضربة عدة مرات ، حتى أن العينة تماما متصدع . في درجة حرارة الغرفة لمدة 5 دقائق ، البروتين والحمض النووي معقدة تم فصلها .
3 ، إضافة إلى الحل أعلاه تريزول بال ، كل استخدام 1 مل تريزول إضافة 0.2 مل تريزول بال ، وتغطي الأنابيب ، التذبذب العنيف لمدة 15 ثانية ، درجة حرارة الغرفة لمدة 2-3 دقائق .
في 4 و 4 ℃ 12 , 000 دورة في الدقيقة الطرد المركزي لمدة 15 دقيقة ، ثم العينة مقسمة إلى ثلاث طبقات : الأحمر المرحلة العضوية ، الطبقة الوسطى والطبقة العليا عديم اللون المرحلة المائية ، الحمض النووي الريبي هو أساسا في المرحلة المائية ، المرحلة المائية ( حوالي 600 ميكرولتر ) نقل إلى رواية ريبونوكلياز مجانا أنبوب الطرد المركزي ( عصامي ) .
5 ، في الحصول على محلول مائي ، إضافة isovolume الآيزوبروبيل الكحول ، مختلطة رأسا على عقب ، وضعت في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق .
الطرد المركزي في 6 ، 4 ℃ 12 ، 000 دورة في الدقيقة لمدة 10 دقائق .
7 ، إضافة 75 ٪ من الإيثانول ( مع عدم وجود ريبونوكلياز إعداد المياه ) غسل التساقط . كل استخدام 1 مل تريزول كان يغسل مع 1 مل 75 ٪ من الإيثانول .
8 ، 4 ℃ 12 ، 000 دورة في الدقيقة الطرد المركزي لمدة 3 دقائق ، بعناية إزالة طاف ، وإيلاء الاهتمام إلى عدم امتصاص الحمض النووي الريبي هطول .
ملاحظة : ما تبقى من كمية صغيرة من السائل يمكن أن تكون قصيرة الطرد المركزي ، ثم يتم امتصاصه من قبل رئيس بندقية ، وإيلاء الاهتمام إلى عدم التخلي عن الرواسب .
9 ، وضعت في درجة حرارة الغرفة لمدة 2-3 دقائق ، الجافة . إضافة 30-100 ميكرولتر من الماء دون ريبونوكلياز ، حل الحمض النووي الريبي ، والحفاظ على الحمض النووي الريبي في - 70 ℃ لمنع التدهور .
ملاحظة : هطول لا ينبغي أن تكون جافة جدا ، حتى لا يكون من الصعب حل .
