الماوس خلايا CD4 T إليسا كيت

إيزيزو^TMالماوس CD16 / CD32 منع

4 درجة مئويةحفظ وتجنب تجميد

PBSو 0.1٪ BSA

مغلقFcRمستقبلات ، والحد من الأجسام المضادة غير محددة ملزمة

إيزيزو^TMكوكتيل عزل الخلايا T CD4 الماوس

4 درجة مئويةحفظ وتجنب تجميد

PBSو 0.1٪ BSA

تحديد غيرCD4 تيالأجسام المضادة للخلايا مختلطة ، المسمى الخلايا غير المستهدفة

إيزيزو^TMكوكتيل استنفاد الخلايا T الذاكرة الماوس

4 درجة مئويةحفظ وتجنب تجميد

PBSو 0.1٪ BSA

إزالة الذاكرةTخلية

إيزيزو^TMستريبتافيدين Nanobeads

4 درجة مئويةحفظ وتجنب تجميد

PBSو 0.1٪ BSA

الخرز المغناطيسي المستعبدين غيرCD4 تيالخلايا التي يتم إزالتها بواسطة الأقطاب المغناطيسية

1

إعداد خلية واحدة تعليق الطحال إلى تركيز معين

1 × 10 ^ 8 الخلايا / مل

2

انضمامإيزيزو^TMالماوس CD16 / CD32 منع

100 مل / مل

3

انضمامإيزيزو^TMكوكتيل عزل الخلايا T CD4 الماوسفي عينة

100 مل / مل

4

الأجسام المضادة والخلايا الحضانة

الحضانة في درجة حرارة الغرفة7.5 دقيقة

5

انضمامإيزيزو^TMكوكتيل استنفاد الخلايا T الذاكرة الماوس

100 مل / مل

6

الأجسام المضادة والخلايا الحضانة

الحضانة في درجة حرارة الغرفة2.5 دقيقة

7

خلط متذبذبةستريبتافيدين Nanobeads

مزيج متجانس30 s

8

زائدستريبتافيدين Nanobeadsفي عينة

100 مل / مل

9

بلطف خلط الخرز المغناطيسي والخلايا ، الحضانة

الحضانة في درجة حرارة الغرفة5 دقايق

10

انضمامFACS العازلةفي العينة ، مزيج بلطف

مجموع حجم إضافة2.5 mL( أ )5 ملأنبوب التدفق (

مجموع حجم إضافة 7.5 ملتر (15 ملتر)أنبوب الطرد المركزيو

11

العينة هي التي شنت على الإطار المغناطيسي لجعل الخرز المغناطيسي كثف

فتحة واحدة الامتزاز المغناطيسي رف )3 دقايقو

رف الامتزاز المغناطيسي )5 دقايقو

12

إمالة الإطار المغناطيسي ، صب العينة في جمع أنبوب جديد ، وجمع عينة

عزل الخلايا بنجاح