متوسطة الثقافة مجموعة حقوق الأمعاء الدقيقة

مجموعة Organoid في الأمعاء البشرية

الأمعاء الدقيقة البشرية متوسطة الثقافة مجموعة

و وصف المنتج

حقوق الأمعاء الدقيقة جهاز الثقافة كيت )مجموعة Organoid في الأمعاء البشريةمجموعة كاملة من وسائل الإعلام من أجل إنشاء والحفاظ على الأمعاء الدقيقة البشرية المستمدة من الخلايا الجذعية للبالغين ، والتي توفر مجموعة كاملة من الكواشف عن العزلة ، استرداد ، تحليل النشاط والثقافة من الأمعاء الدقيقة عطلة . الأمعاء الدقيقة البشرية الجهاز يتكون أساسا من الخلايا الجذعية في الأمعاء الدقيقة ، سريع التوسع في الخلايا ، خلايا امتصاص الأمعاء ، بان الخلايا ، الخلايا على شكل كأس و عدد قليل من خلايا الغدد الصماء في الأمعاء الدقيقة البشرية الجهاز يمكن أن تتكاثر جزئيا خصائص الإنسان ظهارة الأمعاء الدقيقة في تجديد الذات ، وهيكل الأنسجة ، نوع الخلية ، وظيفة ، لذلك هو نموذج مثالي في المختبر لدراسة حالة مستقرة الأمعاء و آلية المرض .

و معلومات المنتج

و غيرها من المواد والكواشف

و إعداد جهاز الأمعاء الدقيقة البشرية متوسطة الثقافة

الهدف : إعداد الأمعاء الدقيقة البشرية متوسطة الثقافة في العقيم سوبر نظيفة الجدول . إعداد10 ملعلى سبيل المثال ، إذا كان المبلغ المطلوب هو مختلف ، الجرعة المقابلة يمكن تعديلها .

و ذوبان الجليد في الأمعاء الدقيقة البشرية عامل الثقافةب (50x)الأمعاء الدقيقة البشرية عامل ثقافة الجهازC(250x)الأمعاء الدقيقة البشرية عامل ثقافة الجهازD(250x)منتدى

ملاحظة : بعد ذوبان الجليد ، فمن المستحسن أن الإنسان الأمعاء الدقيقة مثل جهاز عامل الثقافةب (50x)الأمعاء الدقيقة البشرية عامل الثقافةC(250x)يتم تخزينها واستخدامها بعد التحميل على التوالي لتجنب تكرار التجميد والذوبان .

و بعد إذابة الجليد ، متوسطة الثقافة يجب أن تكون مختلطة تماما رأسا على عقب و رأسا على عقب ، ثم يتم تعبئتها بشكل منفصل في مجلس الوزراء السلامة البيولوجية أو تنظيف طاولة العمل حسب الطلب اليومي .10 مل/أنابيب .

و وسائل الإعلام بعد التعبئة والتغليف مختومة وتخزينها في-20℃عندما يستخدم نموذج المنفعة ، متوسطة الثقافة التي هي معبأة بشكل منفصل يؤخذ بها ووضعها في درجة حرارة الغرفة لتحقيق التوازن .

ملاحظة : إعداد الإنسان الأمعاء الدقيقة مثل الجهاز متوسطة الثقافة2-8°Cالتخزين ، من المستحسن أن تستخدم في غضون أسبوعين . الأمعاء الدقيقة البشرية مثل جهاز عامل الثقافةب (50x)يحتوي على المضادات الحيوية البكتيرية والفطرية(50x)منتدى

و إنشاء ثقافة فرعية من الأمعاء الدقيقة البشرية

ملاحظة : البحث في المواد التي تنطوي على الأنسجة البشرية الرئيسية يجب أن تتبع جميع المؤسسات ذات الصلة واللوائح الحكومية . ويجب الحصول على موافقة مستنيرة من جميع المشاركين قبل جمع مواد الأنسجة البشرية الرئيسية .

)أ( إنشاء جهاز الأمعاء الدقيقة البشرية الأولية

و أخذ العينات : استخدام أنبوب الطرد المركزي لجمع أنسجة الأمعاء الدقيقة البشرية الأولية في البرد حماية الأنسجة الأولية الحل ، والحفاظ على عينات الأنسجة في4 درجة مئوية، حتى بداية الانفصال .

و التنظيف : نقل عينة من الأنسجة التي تحتوي على precoolingDPBSفي طبق الثقافة من حل العازلة ، سطح تجويف الأمعاء تواجه التصاعدي ، يد واحدة تستخدم لعقد نهاية واحدة من أنسجة الأمعاء ، ومن ناحية أخرى يستخدم قطعة بلطف كشط قبالة سطح تجويف الأمعاء الأمعاء الزوائد .DPBSتنظيف طبق بتري2مرة . كسر تنظيف الأمعاء الدقيقة2 ممواسعة ، ونقلها إلى طبق الثقافة الجديدة ، وذلك باستخدامDPBSنظف2في جميع أنحاء .

و الهضم : نقل تنظيف أجزاء من الأمعاء التي تحتوي على5 مم / لتر EDTAقبل التبريدDPBSالهضم في4℃احتضان في الثلج المجروش20 ~ 30 دقيقةالهضم20 دقيقةاليسار واليمين يمكن استخدام ماصة بلطف ضربة الأمعاء الجزء ، تأخذ طاف تحت المجهر لمراقبة ، حتى تظهر في طاف كامل عطلة يمكن أن تنهي عملية الهضم ، إذا لم يكن هناك عطلة يمكن أن تطيل فترة الهضم بشكل صحيح .

و التنظيف : بعد الانتهاء من عملية الهضم ، نقل شظايا الأنسجة إلىDPBSتنظيف طبق بتري2إزالة الثانويةEDTAمنتدى

و تعليق : مع الثقيلة5 ملماصة في precooling0.1٪ BSAالDPBSطبق الثقافة50 ملفائدة نموذج يتميز في ذلك : جزء من تعليق مرآة تستخدم لفحص جزء من الأنسجة ، عندما كمية كبيرة من هيكل مثل عطلة يمكن أن ينظر إليه ، ضربة توقف ، و تعليق الأنسجة بعد ضربة يمكن أن يؤديها .70 ميكرومفلتر الشاشة .

و جمع : جمع الأنسجة تعليق من خلال تصفية الشاشة ،300gقوة الطرد المركزي4℃طرد مركزي3 دقايقمنتدى

و العد : تجاهل طاف ، واستخدام1mL0.1٪ BSAالDPBSتعليق هطول الأنسجة20 ميكرولترتعليق يتم فحصها من قبل المجهر و عد العطلة ، وبعد الانتهاء من العد ، تعليق يحتوي على كمية من العطلة المطلوبة يتم امتصاصه .300gقوة الطرد المركزي4℃طرد مركزي3 دقايقبعد التخلص منها ، ووضعها على الجليد .

و كمية مناسبة من مصفوفة الغراء المستخدمة في إعادة تعليق ترسب الأنسجة .10μLمصفوفة تحتوي على تعليق70إلى100بعد أن علقت مرة أخرى ، وضعت على الجليد .الثلاثيناتمن أجل تجنب مصفوفة الغراء قبل التجمد .

ملاحظة : تخفيف نسبة مصفوفة الغراء70%من أجل ضمان الاستقرار الهيكلي الركيزة الغراء في عملية الثقافة .

و نقطة مختلطة تعليق مصفوفة الغراء و خلايا الأنسجة في24ثقب أسفل لوحة إيجابية ، كل ثقب30 ميكرولتراليسار واليمين ، وتجنب تعليق الاتصال الجدار الجانبي من فتحة لوحة .10.لوحة الثقافة بعد التلقيح37℃ثاني أكسيد الكربون في درجة حرارة ثابتة حاضنة الحضانة30 دقيقةاليسار واليمين حتى مصفوفة الغراء تجمد .

و بعد المصفوفة هلام تجلط الدم ، متوسطة الثقافة من الأمعاء الدقيقة البشرية مثل الجهاز تضاف ببطء على طول الجدار .24ثقب لوحة في حفرة500 ميكرولترتجنب تدمير الهيكل الصلب .

و ويل24ثقب لوحة37℃ثاني أكسيد الكربون حاضنة .

و كل2-3استبدال وسائل الإعلام مرة واحدة في اليوم ، وتجنب تدمير الركيزة الغراء . من الناحية المثالية ، الأمعاء الدقيقة البشرية ينبغي أن يكون الجهاز5إلى7في غضون أيام .

)ب( ثقافة فرعية من الأمعاء الدقيقة البشرية

و الأمعاء الدقيقة البشرية كانت تزرع في200 ~ 500 ميكروممرور الأمعاء الدقيقة البشرية مثل الأجهزة يمكن أن يؤديها في وقت لاحق في كل جيل .5أيام أو نحو ذلك الجهاز من الأمعاء الدقيقة مثل الجهاز و تعليق متوسطة الثقافة يتم نقلها إلى الجهاز من الأمعاء الدقيقة مثل الجهاز و تعليق متوسطة الثقافة المتوسطة التي يتم غسلها بواسطة بندقية الرأس .1.5mLEPأنبوب .

و ضربة ثقيلة تعليق الجهاز مع رئيس بندقية التي تم غسلها مع محلول مائي ، ضربة متعددة )5-10( 2 ) فصل الأمعاء الدقيقة من مصفوفة الغراء تهب ،300gطرد مركزي3 دقايقمنتدى

و تخلى عن طاف1 ملمتوسطة الثقافة الأساسية مرة أخرى ضربة الأجهزة5-10مرة أخرى ، مع كمية صغيرة من تعليق الفحص المجهري لمراقبة حالة الجهاز :

( 1 ) إذا كان الجهاز قد تم تفريقها إلى قطع صغيرة ، الميكانيكية ضربة يمكن اختيارها مباشرة بعد تفريق الجهاز .300gطرد مركزي3 دقايقبعد الطرد المركزيPBSتنظيف قاعدة متوسطة2مرة .

( 2 ) إذا كان الجهاز هو أكثر اكتمالا300gطرد مركزي3 دقايقبعد التخلي عن طاف5الجهاز الهضمي السائل الذي هو أكبر من حجم المصفوفة الغراء و خليط من الأمعاء الدقيقة البشرية الجهاز .37℃الهضم في حاضنةدقيقتينانضم5قاعدة متوسطة الحجم أكبر من حجم السائل الهضمي ينهي الهضم . بعد الطرد المركزيPBSتنظيف قاعدة متوسطة2مرة .

و بعد تنظيف الجهاز مع كمية مناسبة من مصفوفة الغراء ، الجهاز يعجل و يوضع على الجليد بعد تعليق .الثلاثيناتمن أجل تجنب مصفوفة الغراء قبل التجمد .

ملاحظة : تخفيف نسبة مصفوفة الغراء70%من أجل ضمان الاستقرار الهيكلي الركيزة الغراء في عملية الثقافة .

و نقطة مختلطة تعليق مصفوفة الغراء مثل الجهاز في24تعليق السائل هو تجنب الاتصال مع الجدار الجانبي من ثقب لوحة .30 ميكرولتر左右。

ملاحظة : هذه الخطوة ينبغي أن تكتمل في أقرب وقت ممكن لمنع مصفوفة من ترسيخ في درجة حرارة الغرفة .

و لوحة الثقافة بعد التلقيح37℃ثاني أكسيد الكربون في درجة حرارة ثابتة حاضنة الحضانة15 دقيقةاليسار واليمين إلى الركيزة الغراء بعد التصلب .

و إعداد الأمعاء الدقيقة البشرية متوسطة الثقافة .

و عندما مصفوفة الغراء هو متخثر ، قبل التسخين الأمعاء الدقيقة البشرية مثل الجهاز متوسطة الثقافة تضاف على طول جدار المسام .24ثقب لوحة في حفرة500 ميكرولترمنتدى

و وضع خلية ثقافة المجلس في37℃حالة نمو الأمعاء الدقيقة البشرية لوحظ عن كثب .3مورفولوجيا وتوزيع حقوق الأمعاء الدقيقة مثل الأجهزة في العديد من المجالات البصرية تم تسجيلها .

V2.0طبعات

وقت التحديث :2025 / 6 / 17