- البريد الإلكتروني
- الهاتف
-
العنوان
رقم 221 shenzhuan الطريق ، منطقة كوينغبو ، شنغهاي
شنغهاي yanqi التكنولوجيا الحيوية المحدودة
رقم 221 shenzhuan الطريق ، منطقة كوينغبو ، شنغهاي
مواصفات التعبئة والتغليف 25Tوصندوق وTوصندوق
مبدأ التفتيش
كاشف عدة تصاميم محددة التمهيدي الجزيئية بيكون التحقيق تهدف إلى الجينات .الحمض النوويالقضيةالـ PCRرد فعل يمكن أن يؤديها و تنبعث منها إشارة الفلورسنت . باستخدام أداةالـ PCRوفي الوقت نفسه ، في الوقت الحقيقي رصد الإشارات الفلورية ذات الصلة والنواتج في عملية التحليل النوعي الكشف عن النتائج المحققة .
[ العنصر الرئيسي ]
رقم التسلسل |
تكوين |
25Tوصندوق |
50Tوصندوق |
1 |
الـ PCRرد فعل السائل |
500ميكرولتر × 1أنبوب |
1000ميكرولتر × 1أنبوب |
2 |
السيطرة الإيجابية |
40 ميكرولتر × 1أنبوب |
40 ميكرولتر × 1أنبوب |
3 |
السيطرة السلبية |
40 ميكرولتر × 1أنبوب |
40 ميكرولتر × 1أنبوب |
4 |
تعليمات |
1نسخ |
1نسخ |
[ ظروف التخزين وفترة الصلاحية ]تجنب الضوء-20℃بعد الحفظ ، وتجنب تكرار التجميد والذوبان ، صالحة12أشهر .
[ الصكوك المنطبقة ]أبيسلسلةبيو رادسلسلةAgilent ستراتيجين MXسلسلةروش لايت سيكلر R480وسيفيد SmartCyclerوروتور جينسلسلة ، وهانغتشو بوري سلسلة ، الخ .الـ PCRأداة .
[ متطلبات العينة ]
1. على سبيل المثال ، باستخدام العينة الأصلية . العينات ( السائل النخاعي ، الدم الوريدي ، السائل المفصلي من المريض ، الدم الوريدي من الحيوانات المريضة ، الحليب ، المستعمرات ، والطحالب ، وما إلى ذلك ) يجب أن تكون العينات الأصلية التي تم جمعها حديثا و علقت مع الماء المغلي أو محلول فسيولوجي معقم .
2. إذا لزم الأمر بعد زيادة البكتيرياالـ PCRإذا كانت العينة الأصلية تم الكشف عنها ، يجب أن تكون العينة الأصلية زيادة البكتيريا انتقائية زيادة السائل .
3. إذا كانت العينة لا يمكن الكشف عنها على الفور بعد جمع2و8℃التخزين البارد بين عشية وضحاها . إذا كانت العينة تحتاج إلى الحفاظ على المدى الطويل ، يجب أن تكون مجمدة في-20℃~-80℃。
[ طريقة الاختبار ]
1. إعداد الكاشف ( الكاشف إعداد المنطقة )
(1) إزالة عدة من الثلاجة,الكواشف اللازمة للتجربة مأخوذة من عدة ، يذوب تماما و يخلط بشكل موحد و طرد على الفور لإزالة السائل تعلق على جدار الأنبوب .
(2حساب عدد الردود المطلوبة عند التجربة )nكمية من الكواشف المختلفة اللازمة لهذه التجربة تحسب على أساس نظام رد الفعل المبين في الجدول أدناه .
ن =عدد الضوابط السلبية )1Tوسعدد الضوابط الإيجابية )1Tوسخطأ الحجز )1Tوسعدد العينات
إعداد قائمة SLR(كل نسخةو |
الـ PCRرد فعل السائل )مجموعة الأمم المتحدةالإنزيماتتاكأنزيم ( |
20ميكرولتر |
(3إضافة الكواشف المذكورة أعلاه في العقيم أنبوب الطرد المركزي ، الطرد المركزي الفوري بعد الاختلاط الكامل . حسب20 ميكرولتر/الكواشف هي معبأة في أنبوبالـ PCRرد فعل أنبوب .
(4( غطاء محكمالـ PCRبعد رد فعل أنبوب غطاءالـ PCRرد فعل أنبوب نقل إلى عينة تجهيز المنطقة . كاشف المتبقية مرة أخرى-20℃الثلاجة التالية مجمدة .
2.إعداد العينة ( عينة تجهيز المنطقة )
استخدامالحمض النووي / الحمض النووياختراع يمكن استخراج الحمض النووي من خلال استخراج كاشف عدة .
3.إضافة عينة
في إعداد أعلاهالـ PCRرد فعل عينة أنبوب على التوالي إضافة إلى معالجة العينات لفحصهاالحمض النوويكل5 ميكرولترالحجم النهائي25 ميكرولتر/تغطية الأنابيبالـ PCRبعد رد فعل تغطية مختلطة بالتساوي ، لحظية منخفضة السرعة الطرد المركزي هو نقلها إلىالـ PCRالصكوك . السيطرة السلبية والإيجابية على الرعاية5 ميكرولترالسلبية أو الإيجابية على النقيض من المواد المرجعية التي تأتي مع عدة .25 ميكرولتر/تغطية الأنابيبالـ PCRبعد رد فعل تغطية مختلطة بالتساوي ، لحظية منخفضة السرعة الطرد المركزي هو نقلها إلىالـ PCRالصكوك .
4.PCR( أ )الـ PCRمنطقة التضخيم (
(1( أخذ عينات من منطقة المعالجة جاهزةالـ PCRرد فعل أنبوب ، وضعت في الوقت الحقيقي قياس مضانالـ PCRوضع النظام هو مسجل .
(2مجموعة من المعلمات ذات الصلة أداة تضخيم الحمض النوويالـ PCRالتضخيم .
حجم التفاعل |
25 ميكرولتر |
اختيار القناة |
FAMقناة جمع إشارة مضان |
|
الـ PCR رد فعل . شرط |
خطوة |
شرط |
عدد الحلقات |
مجموعة الأمم المتحدةمعالجة |
37℃س2دقيقة )دقيقةو |
1 |
|
قبل التشويه والتحريف |
95℃:3دقيقة )دقيقةو |
1 |
|
الـ PCRالتضخيم |
95℃س5ثانية )sو |
40 |
|
|
55℃س40ثانية )sو ( جمع إشارة مضان في نهاية هذه المرحلة ) |
ملاحظة :أبيسلسلة مضانالـ PCRلا اختيار أداة في الإعدادروكسمجموعة مختارة من مجموعة التبريدلا أحدمنتدى
القيمة المرجعية ( إشارة النطاق )
1.تحديد فعالية عدة :
(1الضوابط الإيجابية : نموذجيةSمنحنى التضخيمسي تيالقيمةأقل من 35منتدى
(2الضوابط السلبية :سي تيقيمة38أو لاسي تيخط مستقيم أو مائل قليلا ، أي فترة النمو المتسارع .
2.تحديد نتائج العينة :
(1) إيجابية : نتائج اختبار العينةسي تيالقيمةأقل من 35فترات النمو المتسارع .
(2المشبوهة : نتائج اختبار العينةسي تيقيمة35و38مجموعة . في هذا الوقت ، ينبغي أن تكون العينات التي تم اختبارها مرارا وتكرارا ، مثل تكرار النتائج التجريبيةسي تيالقيمة لا تزال في35و38مجموعة ، فترة النمو المتسارع الواضح ، تقرر أن تكون إيجابية ، وإلا تكون سلبية .
(3السلبية : نتائج اختبار العينةسي تيقيمة38أو لاسي تيالقيمة .
[ تفسير نتائج الاختبار ]
قناة نتائج الكشف |
تفسير نتائج اختبار العينة |
FAM | |
إيجابية )سو |
الكشف عن عينة |
سلبي )-و |
لم يتم الكشف عن عينات |
[ القيود المفروضة على طرق الاختبار ]
1 - نتائج سلبية كاذبة قد تحدث عند تركيز الحمض النووي في عينة الاختبار أقل من الكشف عن هذه المجموعة .
2 . عملية غير صحيحة في جمع العينات ، والنقل ، والتخزين ، وتجهيز يمكن أن يؤدي بسهولة إلىDNAو تنتج نتائج سلبية كاذبة .
3 . إذا كان التلوث يحدث في عملية جمع العينات ونقلها وتخزينها ومعالجتها ، نتائج إيجابية كاذبة يمكن الحصول عليها بسهولة .
[ مؤشرات أداء المنتج ] حد الكشف عن المنتج103نسخ / ملالمنتجاتالسيرة الذاتيةالقيمةص31%منتدى
[ ملاحظة ]
1 - المختبرات التي تستخدم هذه المجموعة يجب أن تدار بدقة وفقا للقواعد ذات الصلة بشأن إدارة المختبرات من التضخيم الجيني اختبار الصادرة عن الإدارات ذات الصلة في الدولة .
2 - تجنبالرناتدهور عملية معالجة العينة0-4℃تحت ظروف التشغيل ، وعلى الفور بعد الانتهاء من التجربة على جهاز الكشف . المواد الاستهلاكية من الأجهزة المستخدمة في تجهيز العينة يجب أن تكون خالية من رايبوزيم العلاج .
3 - المواد في كل منطقة هي لأغراض خاصة ، لا ينبغي أن تستخدم عبر لتجنب التلوث . تنظيف الجدول فورا بعد الاختبار .
4 - تجنب فقاعات الهواء عند استيعاب رد فعل السائل ؛ أعلىالـ PCR قبل اختبار ، والتحقق من ما إذا كان كل رد فعل أنبوب مغطى بإحكام لتجنب نتيجة غير دقيقة بسبب تبخر السائل .
5 . جميع الكواشف في مجموعات يجب أن تذوب في درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام ، وينبغي أن يكون الطرد المركزي لحظية .
6 - جميع الضوابط السلبية والإيجابية في مجموعات ينبغي نقلها إلى منطقة إعداد العينة وتخزينها بشكل منفصل قبل الاستخدام الأول .
7 . لمنع التدخل الفلورسنت ، ينبغي تجنب الاتصال المباشر مع اليدين العاريتينالـ PCRرد فعل الأنابيب ، وينبغي تجنبها فيالـ PCRأي علامة على رد فعل أنبوب ؛
8 . شفط المستخدمة في عملية الاختبار يجب أن تصل مباشرة إلى10%هيبوكلوريت النفايات داخل الاسطوانة ، نهاية الاختبارالـ PCR رد فعل أنبوب ، لا تفتح الغطاء ، جنبا إلى جنب مع غيرها من النفايات بعد التعقيم والتخلص منها . مقاعد البدلاء العمل وجميع أنواع المواد التجريبية ينبغي أن تستخدم بانتظام 10%هيبوكلوريت5%الكحول أو الأشعة فوق البنفسجية مصباح التعقيم ؛
المعلمات ذات الصلة من أجل تضخيم الصك يجب أن تكون مجموعة وفقا للمتطلبات ذات الصلة من هذه المواصفات . الكواشف مع دفعات مختلفة لا يمكن أن تكون مختلطة . و استخدامها خلال فترة الصلاحية .المنتجات المستخدمة في البحث العلمي فقطمنتدى