القط عدة للكشف عن الفيروس الكأسي

القط عدة للكشف عن الفيروس الكأسيتفاصيل التعبئة والتغليف : 25T / مربع & 50T / مربع

مبدأ التفتيش

القط عدة للكشف عن الفيروس الكأسيكاشف عدة تصاميم محددة التمهيدي و منارة الجزيئية التحقيق تهدف إلى الجينات ، تفاعل البلمرة المتسلسل يمكن أن تنفذ و تنبعث منها إشارة مضان بشرط أن يكون الحمض النووي الواردة في عينة لفحصها . في الوقت الحقيقي رصد وإخراج إشارة مضان المقابلة في عملية الاسترداد باستخدام أداة التحليل النوعي للكشف عن النتائج التي تحققت .

[ العنصر الرئيسي ]

[ ظروف التخزين وفترة الصلاحية ] تجنب الضوء - أقل من 20 ℃ التخزين ، وتجنب تكرار التجميد والذوبان ، صالحة لمدة 12 شهرا .

[ أداة ] أبي سلسلة ، سلسلة بيو راد ، اجيلنت stratagene MX سلسلة ، روش lightcycler r480 ، سيفيد smartcycler ، روتر جين سلسلة ، وهانغتشو بوري سلسلة ، الخ .

[ متطلبات العينة ]

1 . إذا كانت العينة الأصلية المستخدمة في الاختبار . العينات ( السائل النخاعي ، الدم الوريدي ، السائل المفصلي من المريض ، الدم الوريدي من الحيوانات المريضة ، الحليب ، المستعمرات ، والطحالب ، وما إلى ذلك ) يجب أن تكون العينات الأصلية التي تم جمعها حديثا و علقت مع الماء المغلي أو محلول فسيولوجي معقم .

2 . إذا كان بكر الفحص مطلوب بعد زيادة البكتيريا ، البكتيريا زيادة انتقائية السائل ينبغي أن تستخدم لزيادة البكتيريا في العينة الأصلية .

3 . إذا كان لا يمكن الكشف عنها على الفور بعد جمع العينات ، يمكن تخزينها في 2 ～ 8 ℃ بين عشية وضحاها . إذا كانت العينة تحتاج إلى الحفاظ على المدى الطويل ، يجب أن تكون مجمدة في - 20 ℃ - 80 ℃ . . . . . . .

[ طريقة الاختبار ]

1 . إعداد الكاشف ( الكاشف إعداد المنطقة )

( 1 ) إزالة عدة من الثلاجة ، وإزالة كاشف اللازمة للتجربة من عدة ، يذوب تماما ويخلط بشكل موحد وعلى الفور طرد مركزي لإزالة السائل تعلق على جدار الأنبوب .

( 2 ) حساب عدد ( ن ) من ردود الفعل المطلوبة في التجربة الحالية ، وحساب كمية الكواشف المطلوبة في التجربة الحالية على أساس نظام رد الفعل المبين في الجدول أدناه .

ن = عدد السيطرة السلبية ( 1 ر ) + عدد السيطرة الإيجابية ( 1 ر ) + خطأ الحجز ( 1 ر ) + عدد العينات

( 3 ) إضافة الكواشف المذكورة أعلاه في العقيم أنابيب الطرد المركزي ، الطرد المركزي الفوري بعد الاختلاط الكامل . الكواشف كانت معبأة في تفاعل البلمرة المتسلسل ( PCR ) أنبوب في 20 ميكرولتر / أنبوب .

( 4 ) تفاعل البلمرة المتسلسل ( PCR ) أنبوب نقل إلى عينة تجهيز المنطقة بعد أن تم إغلاق غطاء . الكواشف المتبقية يتم تخزينها في الثلاجة تحت 20 ℃ . . . . . . .

2 . إعداد العينة ( عينة تجهيز المنطقة )

الحمض النووي الريبي / استخراج الحمض النووي الريبي عدة يمكن استخراج الحمض النووي ، عملية محددة وفقا لتعليمات من عدة .

3 - إضافة عينات

الحمض النووي من العينات التي تم تجهيزها 5 μ ل و 25 μ ل / أنبوب على التوالي أضيفت إلى إعداد رد فعل PCR عينة الأنابيب ، ثم رد فعل PCR تغطية مختلطة بالتساوي ، ثم تم نقله إلى جهاز PCR في سرعة منخفضة على الفور الطرد المركزي . السيطرة السلبية والإيجابية على حد سواء إضافة 5 ميكرولتر مجموعات من السيطرة السلبية والإيجابية على حد سواء ، مع حجم النهائي 25 ميكرولتر / أنبوب ، بعد تغطية رد فعل البلمرة المتسلسل مختلطة بالتساوي ، على الفور انخفاض سرعة الطرد المركزي ، ونقل إلى بكر الصك .

بكر ( PCR التضخيم المنطقة )

( 1 ) الحصول على رد فعل PCR أنبوب في منطقة تجهيز العينة ، ووضعها في موقف المقابلة في الوقت الحقيقي الاسترداد الكمية الفلورية الصك .

( 2 ) تحديد المعايير ذات الصلة من أجل تضخيم الحمض النووي في الجدول أدناه .

ملاحظة : أبي سلسلة PCR الفلورسنت الصك لا يختار روكس التصحيح عند الإعداد .

القيمة المرجعية ( إشارة النطاق )

1 . تحديد فعالية عدة :

( 1 ) مراقبة إيجابية : هناك عادة S - نوع منحنى التضخيم أو CT قيمة أقل من 35 .

( 2 ) السيطرة السلبية : CT قيمة أكبر من 38 أو لا CT القيمة ، خط مستقيم أو مائل قليلا ، أي فترة من النمو المتسارع .

2 - تحديد نتائج العينات :

( 1 ) إيجابية : نتائج اختبار العينات CT قيمة أقل من أو يساوي 35 أو فترة النمو المتسارع .

( 2 ) المشبوهة : نتائج اختبار العينات CT قيمة 35 ~ 38 . في هذا الوقت ، ينبغي أن يكون اختبار عينات مرارا وتكرارا ، إذا كان تكرار نتائج الاختبار لا تزال في نطاق 35-38 CT ، هناك زيادة كبيرة في الفترة ، ثم الحكم على إيجابية ، أو سلبية .

( 3 ) السلبية : نتيجة فحص العينات CT قيمة > 38 أو لا CT القيمة .

[ تفسير نتائج الاختبار ]

[ القيود المفروضة على طرق الاختبار ]

1 - نتائج سلبية كاذبة قد تحدث عند تركيز الحمض النووي في عينة الاختبار أقل من الكشف عن هذه المجموعة .

2 - الحمض النووي من تدهور نتيجة سلبية كاذبة يمكن أن تحدث بسهولة في عملية جمع ونقل وتخزين ومعالجة العينات .

3 . إذا كان التلوث يحدث في عملية جمع العينات ونقلها وتخزينها ومعالجتها ، نتائج إيجابية كاذبة يمكن الحصول عليها بسهولة .

[ مؤشر أداء المنتج ] الحد من الكشف عن المنتج هو 103 copies / مل ، السيرة الذاتية قيمة المنتج هو أقل من أو يساوي 3 في المائة .

[ ملاحظة ]

1 - المختبرات التي تستخدم هذه المجموعة يجب أن تدار بدقة وفقا للقواعد ذات الصلة بشأن إدارة المختبرات من التضخيم الجيني اختبار الصادرة عن الإدارات ذات الصلة في الدولة .

2 . لتجنب تدهور الحمض النووي الريبي ، ينبغي أن تكون العينة في 0-4 ℃ العملية ، وعلى الفور بعد الانتهاء من الاختبار على الجهاز . المواد الاستهلاكية من الأجهزة المستخدمة في تجهيز العينة يجب أن تكون خالية من رايبوزيم العلاج .

3 - المواد في كل منطقة هي لأغراض خاصة ، لا ينبغي أن تستخدم عبر لتجنب التلوث . تنظيف الجدول فورا بعد الاختبار .

4 - تجنب فقاعات الهواء عند استيعاب رد فعل السائل ؛ قبل وضع الاسترداد ، ينبغي إيلاء الاهتمام إلى التحقق من ما إذا كان رد فعل أنبوب مغطى بإحكام ، وذلك لتجنب نتيجة غير دقيقة بسبب تبخر السائل .

5 . جميع الكواشف في مجموعات يجب أن تذوب في درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام ، وينبغي أن يكون الطرد المركزي لحظية .

6 - جميع الضوابط السلبية والإيجابية في مجموعات ينبغي نقلها إلى منطقة إعداد العينة وتخزينها بشكل منفصل قبل الاستخدام الأول .

7 - لمنع التدخل الفلورسنت ، ينبغي تجنب الاتصال المباشر مع رد فعل PCR أنبوب عارية اليدين ، وينبغي تجنب أي علامة على رد فعل PCR أنبوب ؛

8 - شفط المستخدمة في عملية الاختبار يجب أن تصل مباشرة إلى خزان النفايات تحتوي على 10 ٪ حمض هيبوكلوريك ، PCR أنبوب الانتهاء من الاختبار ، لا تفتح الغطاء ، جنبا إلى جنب مع غيرها من النفايات المعقمة بعد التخلص منها . مقاعد البدلاء العمل وجميع أنواع المواد التجريبية يجب أن تكون دورية مع 10 ٪ حمض هيبوكلوريك ، 75 ٪ من الكحول أو الأشعة فوق البنفسجية مصباح التطهير ؛

المعلمات ذات الصلة من أجل تضخيم الصك يجب أن تكون مجموعة وفقا للمتطلبات ذات الصلة من هذه المواصفات . الكواشف مع دفعات مختلفة لا يمكن أن تكون مختلطة . و استخدامها خلال فترة الصلاحية . وتستخدم المنتجات فقط للبحث العلمي .