البرسيم الذاتية ACC جين يدقق في طريقة qpcr كيت

البرسيم الذاتية ACC جين يدقق في طريقة qpcr كيت

Medicago sativa Endogenous hemL Gene Probe Real Time PCR Kit (بدون مراقبة داخلية)

البرسيم الذاتية ACC جين يدقق في طريقة qpcr كيتمنتوج & سمة :
عند استخدام عدة ، يجب على المستخدمين بدقة وفقا لمتطلبات تعليمات التشغيل ، بما في ذلك جمع العينات ، وتجهيز ، والحفاظ على الظروف التجريبية ، وهلم جرا . وفي الوقت نفسه ، فمن المستحسن أن يكون هناك مراقبة سلبية ( على سبيل المثال ، رد فعل بدون قالب ) و مراقبة إيجابية ( باستخدام الحمض النووي للرقابة إيجابية قدمتها عدة ) لرصد التلوث أو غيرها من الظروف الشاذة أثناء التجربة . إذا كانت نتائج إيجابية في السيطرة على المجموعة السلبية ، أو إذا كانت قيمة إيجابية في السيطرة على المجموعة من الواضح أن الانحراف عن المعدل الطبيعي ، مما يدل على وجود مشاكل في التجربة ، تحتاج إلى العثور على السبب و التجربة مرة أخرى .ويتميز بما يلي :

1 - على استعداد لاستخدام ، يحتاج المستخدم فقط إلى تقديم نموذج الحمض النووي .

2 - الاشعال و التحقيق الأمثل ، تحليل حساسية عالية ، يمكن أن تصل إلى 100 نسخة / رد الفعل .

3 . توفير مراقبة إيجابية ، من السهل التمييز بين عينات سلبية كاذبة .

4 - خصوصية عالية ، التمهيدي مصممة على أساس الحفاظ على المنطقة من الحمض النووي من الجينات الذاتية ACC البرسيم ، لا تتفاعل مع غيرها من الحمض النووي .

5 . يمكن أن تستخدم ليس فقط في الكشف النوعي ، ولكن أيضا في الكشف الكمي . مجموعة خطية لا تقل عن 5 أوامر من الحجم المستخدمة في القياس .

6 - هذا المنتج هو ما يكفي من 50 مرة من 20 ميكرولتر نظام مسبار الفلورسنت الكمية PCR .

7 . هذا المنتج يمكن أن تستخدم فقط في البحث العلمي .

المواصفات والمكونات :

النقل والتخزين :النقل في درجة حرارة منخفضة ، والحفاظ على 20 ℃ لمدة 12 شهرا .
عينة من الحمض النووي .

البرسيم الذاتية ACC جين يدقق في طريقة qpcr كيتطريقة الاستخدام :
تمييع منحنى القياسية عينة( على سبيل المثال ، 10 مرات تخفيف 10e1-10e6 نسخ / ميكرولتر ) . لأن معيار تركيز عال جدا ، بعد تخفيف العمليات يجب أن تتم في مناطق منفصلة ، لا تلوث العينات أو غيرها من مكونات هذه المجموعة . من أجل زيادة استقرار المنتج وتجنب انتشار مسببات الأمراض المعدية ، هذا المنتج لا يوفر عينة حية إيجابية السيطرة ، فقط يوفر غير المعدية الحمض النووي شظايا إيجابية السيطرة .

1 . مارك 6 أنابيب الطرد المركزي ، 6 ، 5 ، 4 ، 3 ، 2 ، 1 ، على التوالي .

2 - إضافة 45 μ ل fluorescence-pcr قالب خاص مخفف مع بندقية رئيس الأساسية ، على التوالي ، ويفضل أن يكون ذلك مع بندقية رئيس الأساسية ، نفس أدناه ) .

3 - إضافة 5 μ ل 1 × 10 نسخة / μ ل السيطرة الإيجابية ( المقدمة من عدة ) في أنبوب 6 ، 1 × 10 نسخة / μ ل منحنى القياسية العينات التي تم الحصول عليها . ضعي الثلج جانبا .

4 - تغيير بندقية الرأس ، إضافة 5 μ ل 1 × 10 × 6 نسخ / μ ل السيطرة الإيجابية ( التي تم الحصول عليها من الخطوة السابقة تمييع ) في أنبوب 5 ، تهتز تماما لمدة 1 دقيقة ، والحصول على 1 × 10 نسخ / μ ل منحنى القياسية عينة . ضعي الثلج جانبا .

5 - تغيير بندقية الرأس ، إضافة 5 μ ل 1 × 10 نسخة / μ ل السيطرة الإيجابية ( الحصول على تخفيف الخطوة السابقة ) في أنبوب 4 ، صدمة 1 دقيقة كاملة ، والحصول على 1 × 10 نسخة / μ ل منحنى القياسية عينة . ضعي الثلج جانبا .

6 - كرر العملية المذكورة أعلاه حتى يتم الحصول على ستة منحنيات القياسية المخفف . ضعي الثلج جانبا .

إعداد عينة من الحمض النووي

7 . إذا كان هناك ن عينات ، فمن الأفضل أن يكون ن + 2 استخراج ، أكثر واحد هو الكمبيوتر ( إعداد عينة إيجابية السيطرة ) ، واحد هو نورث كارولاينا ( إعداد عينة سلبية السيطرة ) . تمييع السائل رقم 4 التي تم الحصول عليها في الخطوة السابقة من 10 ميكرولتر يمكن أن تضاف مع كمية معينة من الماء لجعل مجموع حجم نفس الحجم الأولي المطلوب في كل إعداد .

بالإضافة إلى استخدام المياه كما NC .

8 - تنقية الحمض النووي من عينات من قبل self-selection.this كيت متوافق مع معظم العينات في السوق . يمكنك أيضا شراء الشركة مجانا استخراج الحمض النووي الافراج عن وكيل .

بروب qpcr فعل ( 20 μ ل النظام ، في إعداد نموذج غرفة )

9 - إذا كان التحليل الكمي و تكرار مرة واحدة فقط ، علامة ن + 9 أنابيب الاسترداد ، بما في ذلك ن + 2

ن + 2 العينات التي تم الحصول عليها في الخطوة السابقة ، واحدة تستخدم PCR السلبية السيطرة ( استخدام الماء كقالب ) و 6 تستخدم منحنى القياسية . إذا كان التحليل النوعي و تكرارها مرة واحدة فقط ، ثم ن + 4 أنابيب الاسترداد وصفت ، بما في ذلك ن + 2 ن + 2 عينات من الخطوة السابقة ، واحدة سلبية PCR السيطرة ( استخدام الماء كقالب ) ، واحدة إيجابية PCR السيطرة ( مباشرة باستخدام مخفف من الخطوة 6 ، 4 أنبوب كقالب ) . الإجراء التالي هو موضح فقط مع التحليل الكمي على سبيل المثال .

10 - إضافة المكونات في علامة أنبوب على النحو التالي( هذا الجدول يسرد التكرار مرة واحدة فقط - بعد الانتهاء من وضع أنبوب عينة سلبية السيطرة ، السيطرة الإيجابية يجب أن تكون العينة المضافة في نهاية المطاف بعد كل أنبوب يتم تخزينها مع غطاء ) .

11 - بعد وضع الغطاء على الجهاز ، بكر تتم وفق المعايير التالية :

رابعاً - معالجة البيانات

12 - إذا كان هذا كاشف عدة تستخدم في الكشف الكمي ، سجل قيمة إيجابية السيطرة على تركيز المحور الأفقي ، CT قيمة المحور الطولي ، رسم المنحنى القياسي . ثم سجل قيمة تركيز الحمض النووي من العينة التي تم الحصول عليها من منحنى القياسية باستخدام التصوير المقطعي قيمة العينة التي يمكن قياسها .

13 - إذا كان هذا كاشف عدة تستخدم في الكشف النوعي ، الحكم فقط إيجابية أو سلبية ، ثم السيطرة السلبية CT يجب أن يكون أي قيمة ، أو CT قيمة مساوية أو أكبر من 40 . يجب أن يكون هناك زيادة اللوغاريتم مضان ، نموذجية منحنى التضخيم ، CT قيمة أقل من 40 . اختبار عينة إيجابية إذا كان CT أقل من 40 . إذا لم يكن هناك قيمة CT ، أو أكبر من أو يساوي 40 هو سلبي .
فقط للبحث العلمي ، لا يمكن أن تستخدم في التشخيص السريري ! جميع المنتجات هي لأغراض البحث العلمي فقط ، ولا يجوز استخدامها لأي غرض آخر مثل علاج الإنسان أو الحيوان ، ولا تقدم أي منتجات أو خدمات لأي فرد . دليل المنتج الفعلي على أساس استلام الموقع دليل للرجوع اليها فقط .