شنغهاي معهد الصيدلة ، الأكاديمية الصينية للعلومالمجلة الدولية للأدويةالمعايير الرئيسية لحجم وتركيز المواد النانوية من أجل توحيد تتبع وتحليل الجسيمات النانوية في هذه الدراسة ، والكتاب منهجية تقييم آثار تكوين العينة ، عينة التركيز ، أداة إعداد المعلمات ، إعدادات الكاميرا ، سرعة السائل على دقة القياس من NTA ( نانو sight ns300 ) . وفي الوقت نفسه ، تم اختيار معيار الذهب لوصف حجم الجسيمات ، المجهر الإلكتروني النافذاستشعارمبدأ ( RPS )نانوكولتراختبار متعامد مع نانو كورت محلل حجم الجسيمات ، عبر التحقق من دقة قياس حجم الجسيمات وتركيز NTA .

مقارنة دقة قياس النتائج في تركيزات مختلفة من الجسيمات

الشكل 1 تأثير تركيز العينة على نتائج قياس NTA .

في هذه الورقة ، البوليسترين ( س ) و السيليكا ( سيو )₂الجسيمات القياسية في تركيزات مختلفة تم قياسها ، ومتوسط حجم وتركيز الانحراف في تركيزات مختلفة تم مقارنتها . عرض النتائجعندما يكون تركيز الجسيمات10⁸-10⁹ بين particles / مل ، نتائج القياس هي الأكثر دقة و الاتجاه الخطي هو أفضل .عدد الجسيمات في مجال الرؤية المقابلة 10-100 و 400-6500 . . . . . . .

مقارنة تأثير التعرض المختلفة على قياس النتائج

الرسم البياني2. تأثير التعرض على نتائج قياس NTA

على عكس دلس ، NTA المسارات في الوقت الحقيقي الحركة البراونية من الجسيمات من خلال الكاميرا لحساب حجم الجسيمات . وهكذاتحسين إعدادات الكاميرا يمكن أن تحسن بشكل ملحوظدقة قياس حجم الجسيمات وتركيز NTA .ملاحظة : تم استخدام جزيئات مختلطة مع أحجام مختلفة ، وتتميز في مختلف مستويات التعرض . التعرض هو المعلمة التي تشير إلى حساسية الكاميرا حركة الجسيمات . عن طريق ضبط التعرض ، نتائج التصوير NTA يمكن أن تتأثر . وتظهر النتائج أن ملاحظة : الجسيمات في 100 نانومتر ليست جيدة في التعرض 6-9 ، في حين أن ملاحظة : الجسيمات في 200 نانومتر هو واضح في التعرض 10-14 ، ملاحظة : الجسيمات في 100 نانومتر يمكن ملاحظتها بوضوح ، في حين أن ملاحظة : الجسيمات في 200 نانومتر يمكن أن تكون مفرطة في التعرض ، مما يؤثر على النتيجة . وعلاوة على ذلك ، فإن حجم الجسيمات ذروة توزيع ملاحظة : الجسيمات في 100 نانومتر ، 120 نانومتر ، 150 نانومتر ، 170 نانومتر و 200 نانومتر كما تم تقييمها . وتظهر النتائج أن التعرض التغييرات لا تؤثر بشكل كبير على حجم الجسيمات ذروة بس الجسيمات ، ولكن مع زيادة التعرض ، متوسط حجم الجسيمات من كل مجموعة بس الجسيمات يزيد . ولذلك ، يرى صاحب البلاغ أنحجم الجسيمات المختلفة سوف تؤثر على قياس حجم الجسيمات جنبا إلى جنب مع التعرض .منتدىعندما عينة كبيرة من التشتت ،NTA الكاميرات تجد صعوبة في العثور على التعرض الصحيح للتأكد من أن جميع الجزيئات يمكن تصويرها . عند كتابة التقارير ذات الصلة ، ونحن بحاجة إلى تقديم مجموعة من المعايير ، مثل التعرض NTA ، لضمان شفافية البيانات .

مقارنة تأثير مختلف سرعة الضخ على قياس النتائج

وقد أظهرت الدراسات السابقة ،اللزوجة من الحل سوف تؤثر علىدقة نتائج القياس NTAومع ذلك ، فإن تأثير سرعة الضخ على قياس النتائج لا تزال غير معروفة ، حتى الكتاب استخدام أحجام مختلفة من ملاحظة : الجسيمات في مختلف سرعات الضخ لقياس ومقارنة متوسط حجم وتركيز الانحراف في سرعات مختلفة . عرض النتائجأقل من200 نانومتر الجسيمات ، ضخ السرعة في 50 أو )وحدة تعسفية)أكبر الجسيمات ، وانخفاض سرعة الضخ المطلوبة لضمان دقة .

الرسم البياني4. قياس عينات متعددة التشتت مع NTA ، DLS و RPSأثر

وبناء على هذه النتائج ، فإن أصحاب البلاغ ، وفقا لمعيار عملية التشغيل ، وتقييم القدرة على وصف NTA polydispersed العينات . في هذه الورقة ، 1 : 1 و 10 : 1 ( نسبة التركيز ) من 100 نانومتر و 150 نانومتر ملاحظة : خليط من الجسيمات تم إعدادها . في وقت لاحق ، ثلاثة وأربعة عينات مختلطة من 100 نانومتر ، 150 نانومتر و 200 نانومتر و 1 : 1 : 1 : 1 و 100 نانومتر ، 150 نانومتر ، 170 نانومتر و 200 نانومتر ، على التوالي ، تم إعدادها . في وقت لاحق ، ونحن استخدام دلس و RPS لتحليل العينات الأربعة المذكورة أعلاه .DLS لا يمكن الحصول على دقة موقف الذروة في أي من العينات الأربعة المذكورة أعلاه ، ولكن يمكن الحصول على واحد فقط الذروة .حجم الجسيمات من الخليط تم قياسها بنجاح من خلال طريقة واحدة للكشف عن الجسيمات .في وقت لاحق ، ونحن التحقق من تأثير قياس حجم الجسيمات من RPS ، وإعداد خليط من 80 نانومتر ، 120 نانومتر ، 160 نانومتر و 200 نانومتر مع تركيز نسبة 1 : 1 : 1 : 1 . قياس النتائجتأكيد مرة أخرىRPS يمكن الكشف عن خليط من القمم المقابلة بنجاح . وعلاوة على ذلك ، فإن التمييز بين عينات مختلفة من القمم واضحة و القرار هو جيد .هذه أربعة توزيع العينات يمكن أن تمثل أكثر واقعية من العينات الفعلية .

في الماضي ، ونحن اختيار اثنين من exosomes ( من hek293 الخلايا و الزنجبيل المجفف ) لتحليل حجم الجسيمات باستخدام NTA ، DLS ، RPS التقنيات . وأظهرت النتائج أن البيانات التي تم الحصول عليها من خلال تحليل حجم الجسيمات NTA مماثلة لتلك التي تم الحصول عليها من تيم ، في حين أن حجم الجسيمات DLS كان أكبر و حجم الجسيمات RPS كان أصغر . في جانب من جوانب التركيز ، RPS أظهرت قدرة أكثر دقة التحليل الكمي ، الذي يستفيد من تقنية الكشف عن الجسيمات واحدة RPS ، ويمكن تحقيق دقة توصيف كل الجسيمات .

من خلال قياس العينات الفعلية ، لخص المؤلف خصائص أربع طرق مختلفة لوصف الجسيمات ( الجدول 1 ) .يعتقد الكاتبومع ذلك ، في exosomes ، لا يمكن أن تميز exosomes ، الحويصلات ، البروتينات الدهنية ، في حين لا يمكن أن تميز exosomes من مصادر مختلفة . دلس ، يعتقد الكاتب أن هذا الأسلوب هو بسيط جدا ، ويمكن الانتهاء من قياس عينة صغيرة ، ولكن قياس حجم الجسيمات من هذا الأسلوب هو أكبر من الانحراف عن الحالة الفعلية ، وهذا الأسلوب لا يمكن قياس تركيز الجسيمات من العينة . عنصر الأسلوب يمكن أن ندرك مباشرة التصور قياس عينة من الجسيمات ، ولكن هذا الأسلوب هو مكلفة وتستغرق وقتا طويلا وشاقة . في حالة RPS ، ونحن نعتقد أن هذا الأسلوب يمكن أن تستخدم لقياس حجم الجسيمات الحقيقية مباشرة ( لا سيما في حالة عدم معرفة خصائص الجسيمات من العينات ) ، وحسن القرار في وضع مختلط العينات .

الجدول 1خصائص أربعة أساليب تحليل حجم الجسيمات

من خلال هذا العمل ، والكتاب بانتظام تقييم تأثير العوامل بما في ذلك التركيز ، أداة العتبة ، والتعرض ، ومضخة معدل التدفق على NTA الأداء .في تركيز10⁸10⁹عندما يكون معدل تدفق المضخة هو 50au ، يمكن الحصول على نتائج أكثر دقة عن الجسيمات عينات .، وفي الوقت نفسه ، كما اقترحاثنين من المعلمات ، أداة قيمة العتبة والتعرض ، تحتاج إلى تحليل ملموسوفي الوقت نفسه ، كما وجدتومع ذلك ، فإن القدرة على تحليل العينات NTA polydispersed ليست جيدة ، في حين أن RPS يمكن بنجاح تميز ثلاثة أو أربعة قمم ، مما يدل على أن RPS لديه أفضل القدرة على التمييز polydispersed العينات .وفي الوقت نفسه ، فإن صاحب البلاغ قد حلل نوعين من exosomes باستخدام العديد من أساليب توصيف ، وحجم الجسيمات وتركيز كل طريقة توصيف مختلفة .في دراسة الجزيئات البيولوجية ، من الضروري استخدام أسلوب متعامد لوصف جزيئات متعددةمنتدى

المراجع