مرحبا بكم العميل!

العضوية

مساعدة

Ruixin Intelligent Manufacturing (Shenzhen) Technology Co., Ltd
مصنع مخصص

المنتجات الرئيسية:

instrumentb2bصمقالة

Ruixin Intelligent Manufacturing (Shenzhen) Technology Co., Ltd

  • البريد الإلكتروني

    taozhi@resunbio.com

  • الهاتف

    13631529675

  • العنوان

    الطابق الثالث ، بناء ، حديقة العلوم والتكنولوجيا ، ييلي ، 596 دايوا قرية المجتمع ، قوانلان شارع لونغهوا ، وشنتشن

اتصل الآن
تحسين والأمثل إف الجسيمات واحدة مضان العلامات والكشف على أساس NTA
التاريخ:2024-09-26اقرأ:1
حويصلة خارج الخلية ( إف ) قد أحرزت تقدما سريعا في العقد الماضي ، مع العديد من الاكتشافات والتقارير عن أصله ، ارتباط المرض والتشخيص والعلاج . في هذه المجالات البحثية ، توصيف شامل إف أمر بالغ الأهمية ، بما في ذلك تحليل حجم الجسيمات الفردية والعالمية ، مثل حجم الجسيمات ، المحتملة ، والتركيز ، توزيع حجم الجسيمات ، والكشف عن خصائص البروتينات المرتبطة إف ، مثل cd9 cd63 , cd81 , أليكس , و tsg1012-5 . . . . . . . إذا كنت ترغب في إجراء تحليل أكثر تعمقا من النمط الظاهري من إف ، يجب عليك استخدام لطخة غربية ، إليسا ، أو حويصلة واحدة / العالمية immunolabeling لتحليل النمط الظاهري من إف .


في الوقت الحاضر ، لا توجد طريقة للكشف عن البروتين في حويصلة واحدةتوزيع حجم الجسيماتو قياس تركيز . نانو الجسيمات تتبع التحليل ( NTA ) هي تقنية تستخدم لوصف توزيع حجم الجسيمات من إف . على أساس معادلة ستوكس - اينشتاينالحركة البراونيةتحديد حجم واحد إف إف السكان . إن nta-fl يمكن نظريا تحقيق الإثارة محددة من الأصباغ الفلورية و الكشف عن مضان المسمى إف ( nta-fl ) .ومع ذلك ، هناك عدد قليل من الدراسات التي تقيم بدقة nta-fl ، وهذه الدراسات تعتمد على علامات مناعية شاذة EV البروتين المستهدفة أو غير محددة العلامات .منتدى


图片

جامعة تافتس الأمريكية )جامعة تافتسفي هذه الورقة ، فإننا التقرير الأمثل خوارزمية واحدة إف الفلورسنت العلامات المناعية عن nta-fl ، مما يجعل من أكثر دقة على أساس واحد حويصلة العلامات المناعية والكشف عن توزيع حجم الجسيمات وتركيز التحليل . هذه الخوارزمية يمكن أن تحسن بشكل فعال في مصداقية نتائج الكشف عن NTA ، ويوفر أداة قوية لمزيد من البحث في وظيفة وآلية إف . . . . . . .منتدى


图片
في الدراسات السابقة ، وجد الباحثون أن利用وكالة الضرائب الوطنيةحملEVمضان تحليل السلالةوانحراف البيانات سوف تحدث في ضوء نثر طريقة المقارنةعادة ، فإن نسبة المنطقة المحيطة مضان ( FM ) منحنى إلى المنطقة المحيطة تشتت الضوء ( LSM ) منحنى يمكن أن تمثل نقاء إف . ومع ذلك ، وجد الباحثون أن نسبة وزير الخارجية ( الخط الأزرق ) إلى LSM ( الخط الأحمر ) في اختبار 1 ، 2 ، 4 ( الجدول 1 ، الشكل 1 ) أكثر من 100 ٪ ، مما يدل على نقاء EV أكثر من 100 ٪ ، والتي من الواضح أنها غير معقولة ، وأظهرت النتائج أن :

1 . عدد كبير من الإشارات الكاذبة قد تظهر في عملية الكشف عن مضان .

2 - القيود التقنية على نظام NTA تسبب LSM لا يمكن الكشف عن إف صغيرة جدا أو غيرها من الجسيمات مع انخفاض معامل الانكسار .في ضوء نثر واسطة ، إف الكشف غير مكتملة ، وبعض البيانات لم يتم الكشف عن إف ، مما يجعل LSM منطقة صغيرة ، مما يؤدي إلى نسبة أكبر من 100 ٪ .

3 - ووجد الباحثون أيضا أن هناك إشارة واضحة الذروة في وضع وزير الخارجية أقل من 50 نانومتر ، ولكن بالمقارنة مع LSM واسطة ، إشارة تخفيف أقل من 50 نانومتر هو أساسا 0 ، والتي قد تكون واحدة من الأسباب التي تسبب نسبة أكبر من 100 ٪ .على وجه الخصوص ، قد يكون هذا بسبب عدم كفاية إزالة الجزيئات الفلورية الحرة ، فضلا عن البروتينات الحرة في النظام المسمى مع الجزيئات الفلورية ، مما أدى إلى تعزيز إشارة الفلورسنت في مناطق صغيرة الحجم .

图片
الجدول 1 - نسبة مضان المنطقة ( FM ) ونثر ضوء المنطقة ( LSM ) من عينات مختلفة
图片
الشكل 1 NTA نتائج اختبار عينات مختلفة في اف ام و LSM


ولمعالجة هذه الحالة ، اقترح الباحثون نهجين للتقييم :

الطريقة الأولىهو الطريقة التقليدية في حساب عدد الجسيمات أكبر من 50 نانومتر في العينة ، ومقارنة عدد الجسيمات في وزير الخارجية و LSM ، والحصول على نسبة بين وزير الخارجية و LSM . ( الشكل 2 ب ، ج )

الطريقة الثانيةهو الأسلوب الأمثل لحساب المنطقة المتداخلة بين توزيع حجم الجسيمات المنحنيات التي تم الحصول عليها من هاتين الطريقتين ، ومقارنة هذه المنطقة مع مجموع عدد الجسيمات أكبر من 50 نانومتر في LSM ، والحصول على نسبة التداخل في المنطقة . ( الشكل 2 دال )

في هذه الدراسة ، والباحثين التركيز على اختيار حجم الجسيمات . من أجل تحليل إف أكثر دقة ، والباحثين تضييق نطاق التحليلنانواختيار هذا النطاق لأنمعظم إف الأحجام في هذا النطاقوعلاوة على ذلك ،LSM لديها قدرة محدودة على الكشف عن الجسيمات أقل من 50 نانومترالجسيمات أكبر من 200 نانومتر قد لا تكون إف .50-200نانومتر يمكن أن تستبعد أنواع أخرى من الجسيمات على نحو فعال ، وتحسين دقة النتائج التحليليةمنتدى

图片

الشكل 2 تخطيطي خوارزمية على أساس العلامات المناعية NTA



استنادا إلى خوارزمية التحسين ، قام الباحثون بتحليل البيانات من ست مجموعات من العينات ، وأظهرت النتائج أن نقاء إف انخفض إلى أقل من 100 ٪ .


图片

الجدول 2 نسبة مضان ( FM ) و ( LSM ) من عينات مختلفة



من خلال مقارنة نتائج مضان نمط ( FM ) ونثر ضوء نمط ( LSM ) باستخدام نقاط الكم ووضع العلامات nta-fl تقنية ، هذه الخوارزمية يمكن تحديد وتحليل أنواع فرعية مختلفة من إف في حويصلة واحدة على نحو فعال ، وتوفير أكثر دقة توزيع حجم الجسيمات من المعلومات . ومع ذلك ، على الرغم من أن تقنية nta-fl خوارزمية التحسين يمكن أن تحسن بشكل فعال في دقة تحليل إف السلالة ، يجب أن ندرك أيضا أن هناك بعض القيود على المبدأ الأساسي من تقنية nta-fl . . . . . . .NTA في الكشف عن إف صغيرة جدا أوعرض توزيع حجم الجسيماتالعينات ( وخاصة إف عينات )هناك بعضصعوبةولذلك ، على الرغم من أن nta-fl التكنولوجيا الأمثل خوارزمية يمكن تحسين دقة تحليل توزيع حجم الجسيمات وتركيزالاختناقات التقنية NTA لم يتم التغلب عليهاثم خوارزمية التحسين ، وما إذا كانت طريقة وضع العلامات مضانالحصول على النتائج الصحيحة على أساس خاطئولا تزال هناك حاجة إلى توخي الحذر لتفادي الاعتماد المفرط على البيانات المستمدة من هذه التكنولوجيا .

图片
نانو متر حجم الجسيمات نانومتركورت المبدأفائدة نموذج يكسر الحد من مبدأ البصرية ، يمكن تحليل دقيق كل الجسيمات من خلال ثقب ، يدرك الكشف عن الجسيمات واحدة بالمعنى الحقيقي .تفريق النظامعينة أفضل قياس النتائج . وعلاوة على ذلك ، فإنه لا يتأثر معامل الانكسار ، الامتصاصية وغيرها من الخصائص البصرية من العينة .

图片