انتشار وسمية zeta-life خلية فحص كيت

انتشار وسمية zeta-life خلية فحص كيت

سعر615-2800

نوعحياة زيتا.

رقم الشحن :K009

الأصل :الولايات المتحدة الأمريكية

الموردسشنغهايلايتونالتكنولوجيا الحيوية المحدودة

كمية: 1000

اسم اللغة الإنجليزية:cck8

فترة الصلاحية:24 شهور

حفظ الشرطحفظ : 4 ° C تجنب الضوء

مواصفات:500T-3000T

انتشار وسمية zeta-life خلية فحص كيت

خلية العد كيت ( كك ) هو سريع وحساس كيت على أساس WST ( للذوبان في الماء tetrazole الملح ، الاسم الكيميائي : 2 - ( 2-methoxy-4-nitrophenyl ) - ( 3-4-nitrophenyl ) - 5 - ( 2 , 4-disulfonylbenzene ) - 2H tetrazole monosodium الملح ) المستخدمة على نطاق واسع في انتشار الخلايا و cytotoxicity . . . . . . .

CCK هو ترقية المنتج البديل MTT ، بالمقارنة مع MTT أو غيرها من المنتجات المماثلة مثل XTT MTS ، لديها مزايا واضحة :

إن formazan التي خفضت من نازعة في الميتوكوندريا هو للذوبان في الماء و لا تحتاج إلى حل محدد ، في حين أن أيا من wst و xtt و النظام التجاري المتعدد الأطراف يمكن أن تنتج formazan للذوبان في الماء ، وبالتالي فإن الخطوة التالية يمكن حذفها .

إن cck هو أكثر استقرارا من xtt والنظام التجاري المتعدد الأطراف ، مما يجعل النتائج التجريبية أكثر استقرارا .

مقارنة مع MTT ، XTT ، CCK لديها مجموعة خطية أوسع وأعلى حساسية .

مقارنة بين طريقة CCK وطرق الاختبار الأخرى :

تعليمات التشغيل :

جعل منحنى القياسية ( عند قياس كمية محددة من الخلايا )

1 ، عدد الخلايا في تعليق خلية أعدت عد لوحة ، ثم تلقيح الخلايا .

2 ، وفقا للنسبة ( على سبيل المثال : 1 / 2 نسبة ) مع وسائل الإعلام على التوالي تمييع - تركيز الخلية التدرج ، عموما 3-5 تركيز الخلية التدرج ، كل مجموعة من 3-6 المسام .

3 - بعد تلقيح الخلايا المزروعة لمدة 2-4 ساعات ، ثم إضافة كك كاشف الثقافة - تحديد الوقت لتحديد قيمة التطوير التنظيمي ، مما يجعل عدد الخلايا الإحداثي السيني ( المحور السيني ) ،

التطوير التنظيمي قيمة المنحنى القياسي في الإحداثيات الطولية ( المحور ص ) . عدد الخلايا في عينة غير معروفة يمكن قياسها باستخدام هذا المنحنى القياسي .

من أجل تحديد عدد الخلايا المزروعة و الثقافة مرة بعد إضافة كك .

الكشف عن نشاط الخلايا

1 - تعليق خلية ( 100ul المسام ) تم تلقيح في 96 المسام لوحة . الثقافة كانت لوحات قبل مثقف في حاضنة ( 379c ، 5 ٪ من ثاني أكسيد الكربون ) .

2 ، إضافة 110ul كك الحل في كل حفرة ( الحرص على عدم تشكيل فقاعة في حفرة ، وسوف تؤثر على قراءة التطوير التنظيمي ) .

3 - احتضان الثقافة لوحة في حاضنة لمدة 14 ساعة .

4 - الامتصاصية في 450nm يحدده enzymogram . . . . . . .

5 ، إذا لم يتم تحديد قيمة التطوير التنظيمي في الوقت الحاضر ، بعد تحديد الخطة ، يمكن أن تضاف إلى كل مسام 10ul 0.1m حمض الهيدروكلوريك الحل أو 1 ٪ WIV الحزب الديمقراطي الصربي الحل ، وتغطي الثقافة

الحفاظ على لوحة من الضوء في درجة حرارة الغرفة . الامتصاصية لن تتغير في غضون 24 ساعة .

انتشار الخلايا ~ اختبار السمية

1 ، 100 ش تعليق خلية في 96 المسام لوحة . لوحة الثقافة كانت تزرع في حاضنة لمدة 24 ساعة ( في 379c ، 5 ٪ من ثاني أكسيد الكربون ) .

2 - إضافة 10ul تركيزات مختلفة من المواد في الثقافة لوحة .

3 - احتضان الثقافة لوحة في حاضنة لفترة مناسبة من الوقت ( على سبيل المثال : 6 ، 12 ، 24 أو 48 ساعة ) .

4 ، أود أن أضيف 10 ul كك الحل في كل حفرة ( الحرص على عدم تشكيل فقاعة في حفرة ، وسوف تؤثر على قراءة التطوير التنظيمي ) .

5 - احتضان الثقافة لوحة في حاضنة لمدة 1-4 ساعات .

6 ، الامتصاصية في 450nm يحدده enzymogram . . . . . . .

7 ، إذا لم يتم تحديد قيمة التطوير التنظيمي ، في وقت لاحق ، يمكن أن تضاف إلى كل مسام 10ul 0.1m حمض الهيدروكلوريك الحل أو 1 ٪ WIV الحزب الديمقراطي الصربي الحل ، وتغطي لوحة الثقافة لتجنب الضوء للحفاظ على درجة حرارة الغرفة . الامتصاصية لن تتغير في غضون 24 ساعة .

ملاحظة : إذا كان اختبار المواد المؤكسدة أو مختزلة ، متوسطة جديدة يمكن استبدالها قبل إضافة كك ( إزالة متوسطة ، وغسل الخلايا مرتين مع متوسطة ، ثم إضافة جديدة متوسطة ) لإزالة آثار المخدرات . بطبيعة الحال ، في ظل حالة من تأثير المخدرات الصغيرة نسبيا ، لا يمكن أن تحل محل الثقافة المتوسطة مباشرة بعد خصم فارغة امتصاص المخدرات المضافة في الثقافة المتوسطة .

جاهز

سيكلوفوسفاميدويقترح أن عدد الخلايا المزروعة و وقت الثقافة بعد إضافة كك الكاشف ينبغي تحسس من خلال عدة ثقوب .

الثانيفي ظل ظروف معينة ، متعدد القنوات الماصة هو الموصى به ، والتي يمكن أن تقلل من الفرق بين الثقوب الموازية . انضمام

عندما CCK كاشف ، فمن المستحسن أن تضاف بشكل غير مباشر ضد الثقافة لوحة الجدار ، لا تضاف إلى صفحة وسائل الإعلام ، من السهل أن تنتج فقاعات الهواء ، وسوف تتداخل مع التطوير التنظيمي قيمة القراءة .

ثالثاقد يستغرق زراعة خلايا الدم البيضاء وقتاً أطول .

أربعةعند استخدام معيار 96-pore لوحة ، تلقيح كمية صغيرة من الخلايا الملتصقة على الأقل 1 ، 000 / المسام ل ( 100 ش متوسطة ) . حساسية الكشف عن خلايا الدم البيضاء منخفضة نسبيا .

الجرعة الموصى بها من التطعيم لا تقل عن 2500 / و المسام ( 100ul متوسطة ) . إذا كنت ترغب في استخدام 24 أو 6-porous لوحة لوحة التجربة ، أولا حساب كمية التطعيم في كل مسام ، إضافة كك الحل حسب 10 ٪ من مجموع حجم المسام متوسطة .

تإذا لم يكن هناك 450nm مرشح ، مرشح مع الامتصاصية بين 430 و 490 نانومتر يمكن استخدامها ، ولكن حساسية الكشف عن 450nm مرشح أعلى .منتدى

ستامتصاص الفينول الأحمر في الثقافة المتوسطة يمكن القضاء عليها عن طريق خصم امتصاص الخلفية في حفرة فارغة ، وبالتالي لا تؤثر على الكشف .

حساب متحرك

نشاط الخلايا * ( % ) = [ أ ( إضافة ) - ( فارغة ) / [ 0 إضافة ) - ( فارغة ) × 100

( الجرعات ) : الامتصاصية من المسام مع الخلايا ، كك الحلول و الحلول الصيدلانية

أ ( فارغة ) : الامتصاصية من مسام الخلية مع متوسطة و كك الحل دون

أ ( 0 ) : الامتصاصية من المسام مع الخلايا ، كك الحل دون حل المخدرات

* النشاط الخلوي : نشاط تكاثر الخلايا أو نشاط السمسة

شروط الحفظ :

49C تجنب الضوء ، صالحة لمدة سنة واحدة .

الحارة الصوت : لا يمكن استخدامها في العلاج السريري .