الكشف عن طول التيلومير

طول التيلومير الكشف ( telomere ) هو نوع من هيكل خاص من الحمض النووي الجينوم الخطي محطة في حقيقيات النوى ، وهو مجمع يتكون من جزء من تسلسل الحمض النووي والبروتين ، والتي يمكن أن تضمن سلامة كل كروموسوم ، والسيطرة على دورة نمو الخلايا والانقسام ، ويرتبط ارتباطا وثيقا مع موت الخلايا المبرمج ، تحويل الخلية والخلود .

　　الكشف عن طول التيلوميرtelomere هو نوع خاص من هيكل في نهاية المطاف من الحمض النووي الجينوم الخطي في حقيقيات النوى ، وهو مجمع يتكون من تسلسل الحمض النووي والبروتين ، والتي يمكن أن تضمن سلامة كل كروموسوم ، والسيطرة على نمو الخلايا وتقسيم دورة . تكرار التيلومير الحمض النووي البشري يتكون من تكرار ترتيب ttaggg ( انظر الصورة على اليمين ) .

في عملية انقسام الخلايا البشرية العادية ، تكرار الحمض النووي لا يمكن أن تتكرر في نهاية المطاف جزء صغير من تسلسل ، مما أدى إلى انقسام الخلايا في كل مرة ، الحمض النووي سوف تكون أقصر قليلا ، وهذا هو ، " نهاية الكروموسومات يتقلص " . عندما تتكرر الخلايا عدة مرات ، التيلومير هو تقصير إلى حد ما ، تسلسل الحمض النووي العادي يصبح غير مستقر ، ثم الخلايا تبدأ في الشيخوخة والموت . وتشير البحوث إلى أن في ظل الظروف العادية ، فإن متوسط انقسام الخلايا البشرية وتكرارها بعد حوالي 50 مرة بسبب السموم المنتجة ذاتيا نخر ، وهذا هو " هايفليك الحد " .

هذا المنتج يستخدم كاشف عدة مزدوجة اللون مضان qpcr ( syrbgreen + فيك ) للكشف عن الطول النسبي التيلومير ، الكشف عن الأجسام هي الدم ، مسحات الفم أو خلية الحمض النووي . هذه المجموعة لديها الخصائص التالية .

1 . الاستقرار : العملية برمتها من إغلاق الأنابيب ، لا عبر التلوث .

2 . موثوق بها : الكشف عن التيلومير مع أنبوب واحد ، والحد من التدخل بين الثقوب .

وقد تم العثور على نسخ متعددة من الجينات المرجعية الداخلية ، مع انخفاض الفرق في كمية التيلومير .

3 . راحة : عملية بسيطة ، لا حاجة الكهربائي خطوة .

4 - الكمية : ] CT القيمة ، يمكن الكشف عن الكمية النسبية طول التيلومير .

　　الكشف عن طول التيلوميرهو اختبار بسيط نسبيا ، لا تتطلب الكثير من الحمض النووي الأولي ( حوالي 50 نانوغرام ) . من خلال قياس إشارة التيلومير ( ر ) مع الإشارة إلى نسخة واحدة إشارة الجينات ( ق ) ، تي / ث نسبة محسوبة ، والتي تتناسب مع متوسط طول التيلومير ( TL ) ، وبالتالي يمكن استخدامها لتحديد نسبة TL . ومع ذلك ، منذ q-pcr يوفر سوى كمية نسبية ، البيانات عادة لا تظهر في شكل كيلوبايت طول التيلومير المطلق إلا بالمقارنة مع خط الخلية المرجعية مع متوسط TL يحددها طريقة أخرى . وقد أظهرت الدراسات أن معامل الاختلاف من هذه الطريقة قد تكون أعلى من 10 ٪ . وعلاوة على ذلك ، قد تكون هناك اختلافات كبيرة في النتائج بين مختلف المختبرات بسبب استخدام مختلف نسخة واحدة من الجينات . وبالإضافة إلى ذلك ، q-pcr لا توفر معلومات عن أقصر التيلومير . وأخيرا ، q-pcr TL القياسات قد لا تكون مناسبة لأبحاث السرطان ، حيث نسخة واحدة من الجينات قد تكون مستنسخة أو فقدت بسبب اختلال الصيغة الصبغية . ولذلك ، فإن تطبيق q-pcr يقتصر على عينات من الطبيعي مضاعفا karyotype مستقرة .

التيلوميرات هي noncoding بالترادف تكرار ( ttaggg ) ن متواليات في نهايات الكروموسومات الخطية في جميع الفقاريات . 3 ' نهاية واحدة حبلا التيلومير الستارة يغزو الحمض النووي المزدوج تقطعت بهم السبل ، وتشكيل تي حلقة ، مما يؤدي أيضا إلى سلسلة من التشرد ، مما أدى إلى واحد حبلا التيلومير د - حلقة . t-ring هو هيكل خاص من التيلومير ، الذي يرتبط بشكل مباشر أو غير مباشر مع شيلتيرين معقدة من التيلومير حماية البروتين .

التيلومير هو هيكل خاص يتكون من تكرار تسلسل الحمض النووي و التيلومير محددة ملزمة البروتين في نهاية الكروموسومات من الخلايا حقيقية النواة ، حيث تتألف من الفقاريات التيلوميرات قصيرة مزدوجة حبلا تكرار تسلسل ( ttaggg ) التي هي غنية في ز . التيلومير يمنع التدهور والانصهار وإعادة ترتيب نهايات الكروموسومات ، وبالتالي الحفاظ على الاستقلال والنزاهة والاستقرار الكروموسومات . على الرغم من أن التيلوميرات لا ترميز ، ودعا العلماء " الحياة على مدار الساعة " ، لأن طول التيلومير والاستقرار السيطرة على حياة الخلية ، الخلايا السرطانية والشيخوخة ترتبط ارتباطا وثيقا .

طول التيلومير هو تقصير تدريجيا مع انقسام الخلايا في الإنسان الطبيعي في الخلايا الجسدية ، وطول التيلومير هو تقصير مرة واحدة في انقسام الخلايا ، وفقدان 20 ~ 30 النيوكليوتيدات . عندما التيلومير هو تقصير إلى حد ما ، فإنه يمكن أن يؤدي إلى فقدان بنية البروتين النووي ، مما يؤدي إلى تكرار الشيخوخة ، مما يؤدي إلى بطء انتشار الخلايا ، ركود النمو ، وانخفاض الجافة ، وفقدان القدرة على التمايز ، وهلم جرا . وفي الوقت نفسه ، فقدان بعض التيلومير محددة ملزمة البروتينات في تقصير التيلومير يمكن أن يؤدي أيضا إلى خطأ في تحديد موقع الكسر التيلومير الحمض النووي ، مما يؤدي إلى إصلاح الحمض النووي وظيفة ، مما يؤدي إلى الانصهار بين الكروموسومات التيلومير قصيرة ، مما يؤدي إلى انقسام الخلايا الشاذة ، دورة الخلية الركود ، مما يؤدي إلى موت الخلايا المبرمج الناجم عن البروتين p53 .

وبالإضافة إلى ذلك ، تحور الجين p53 وغيرها من النتائج في دورة الخلية للكشف عن نقطة خلل في الخلايا يمكن أن تقفز من خلال تكرار الشيخوخة ، استمرار الانقسام في نهاية المطاف إلى مرحلة الأزمة ، في هذه الفترة عدد قليل جدا من الخلايا عن تيلوميراز ، تفعيل نشاط التيلوميراز ، وإصلاح وصيانة طول التيلومير ، مما يجعل الخلايا إلى الأبد في الخلايا السرطانية . تم العثور على تقصير التيلومير و نشاط التيلوميراز في 90 ٪ من الخلايا السرطانية مثل سرطان المستقيم ، سرطان الثدي ، سرطان الرئة ، سرطان البروستاتا . وتشمل الأمراض الناجمة عن شذوذ التيلومير اللوكيميا ، فقر الدم اللاتنسجي ، myelodysplasty الخلقية keratosis . . . . . . . التيلومير يلعب دورا هاما جدا في عملية الشيخوخة والمرض ، وطول التيلومير يكرر يحدد مصير الخلايا .الكشف عن طول التيلوميرهو طريقة تجريبية هامة في دراسة علم الأحياء التيلومير . . . . . . .

علاوة على ذلكالكشف عن طول التيلوميركما أن لديها قيمة تشخيصية هامة في أمراض الشيخوخة والأورام . بسبب اختلاف الجنس ، طول التيلومير من كروموسوم الإنسان ( طول حبلا مزدوجة المنطقة عادة 0.5-20kb ) هو أقل بكثير من معظم الكائنات الحية في المختبر النموذجي . وعلاوة على ذلك ، فإن درجة تقصير التيلومير في مختلف الخلايا تختلف من فرد إلى فرد . التيلومير مع طول أقل من أو يساوي 3 كيلوبايت بأنها قصيرة التيلومير . أقصر التيلومير ، بدلا من متوسط طول التيلومير ، تلعب دورا هاما في فقدان وظيفة التيلومير ، الحمض النووي من التلف الناجم عن تقييد بقاء الخلية . ولذلك ، هناك حاجة ماسة إلى طريقة دقيقة وبسيطة وسريعة وعالية الإنتاجية للكشف عن طول التيلومير التيلومير نسبة الإنسان على مستوى كروموسوم واحد . . . . . . .

في تطور الأمراض الوراثية المرتبطة التيلومير ، التيلومير أقصر يؤدي إلى بداية مبكرة من المرض . جنبا إلى جنب مع مزيد من البحوث ، المزيد والمزيد من الناس يدركون أن عوامل نمط الحياة مثل السمنة والتدخين وعدم ممارسة الضغط المزمن يمكن أن تؤثر على طول التيلومير في تعميم خلايا الدم البيضاء . وبالإضافة إلى ذلك ، تقصير التيلومير ، مما يؤدي إلى ضعف التيلومير ، ويرتبط مع العديد من الأمراض المرتبطة بالعمر ، مثل العقم ، والتهاب المفاصل ، والسكري ، والسرطان ، وأمراض القلب والأوعية الدموية والأمراض العصبية . ولذلك ، من المهم تحديد طول التيلومير مستقرة وقابلة للتكرار ، والتي يمكن التنبؤ بحدوث هذه الأمراض .

ومع ذلك ، ما يقرب من جميع الدراسات المنشورة على نطاق واسع من السكان من الأمراض ذات الصلة التيلومير هي أساسا ذات الصلة ، وتوفير معلومات عن متوسط أو نسبي طول التيلومير التيلومير . هناك الكثير من الأدلة على أن أقصر التيلوميرات تؤدي إلى تلف الحمض النووي ، مما يؤدي إلى تكرار الشيخوخة في الثدييات . أقصر طول التيلومير هو مفتاح العلامات البيولوجية التي تحدد مصير الخلية و بداية الشيخوخة . ولذلك ، فإن الأساليب الحالية لتحديد طول التيلومير ، بغض النظر عن المزايا والعيوب ، كل له مستقبل مشرق .

التغيرات الشاذة في طول التيلومير قد تحدث في وقت مبكر من المرض ، وطول التيلومير قد تصبح علامة على الفحص المبكر لبعض الأمراض ، أو حتى مساعدة التشخيص أو النذير مؤشر التقييم بعد عدة عقود . بسيطة وسهلة طريقة الكشف عن تدفق عالية يمكن استخدامها في الدراسات الوبائية على نطاق واسع من السكان للعثور على الأمراض ذات الصلة التيلومير ، وتوفير أكثر دقة طريقة الكشف عن مختلف طول التيلومير التوزيعات يمكن استخدامها للعثور على الآليات الممكنة بين طول التيلومير والأمراض ذات الصلة . وبطبيعة الحال ، فإن الهدف من هذه الدراسة هو الكشف عن التيلومير مع تدفق عالية ، دقة عالية ، ويمكن أن توفر العديد من المعلومات .