tu686-luc لوسیفراز العلامات البشرية خلايا سرطان الحنجرة

سمات :

السلامة : جميع الخلايا transfected الورم والفيروسات تعتبر يحتمل أن تكون ضارة بيولوجيا ، يجب أن تعمل في المرحلة الثانية من السلامة البيولوجية منصة . يرجى ملاحظة أن جميع النفايات السائلة والأواني التي تأتي في اتصال مع هذه الخلايا يمكن التخلص منها بعد ارتفاع ضغط التعقيم . بعد تلقي الخلايا تحت المجهر المقلوب*جيد4Xعدسة الهدفومراقبة نمو الخلايا .

( أ ) إذا لم تكن الخلية كاملة ، استخدم5%بعد رش زجاجة كاملة من الكحول معقمة ، يتم وضعها في superbacterium الجدول ، عملية معقمة بدقة .10 ملثقافة جديدة متوسطة .(اثنانوإذا كانت الخلية كاملة ، يمكن أن تكون ثقافة فرعية . وفيما يلي الخطوات المحددة :

1. التخلي عن الثقافة المتوسطةPBSلا تحتوي على الكالسيوم,أيون المغنيسيوم1-2مرة .

2. زائد1 ملعصارة هضمية )0.25٪ تريبسين-0.53 ملم EDTAفي زجاجة الثقافة37درجة مئوية حاضنة1-3سخني لمدة دقيقة ، ثم انقلب قارورة الثقافة10-30الثانية في وقت لاحق ، تحت المجهر المقلوب لمراقبة حالة الهضم ، إذا كان معظم الخلايا تصبح الجولة ، بسرعة العودة إلى طاولة العمليات ، اضغط على عدة زجاجات الثقافة ، إضافة كمية صغيرة من * متوسطة لإنهاء عملية الهضم .

3. اضغط6-8 مل/ملء زجاجة مع * متوسطة ، خفقت برفق و امتص نصف ، ثم تقسم إلى ثقافة جديدة زجاجة . إذا لم يكن هناك تعليمات محددة ، بعد تلقي الخلايا*الجيل الثاني هو عادة واحدة من اثنين .

ملاحظة :

1لاحظ الخلايا في التكبير المنخفض )4أو5Xعدسة الهدفوخلاف ذلك ، لا يمكن أن نحكم على كثافة الخلية بدقة . انظر شكل الخلية10Xأو20Xتحت العدسة الشيئية .

2نقل متوسطة في زجاجة لا يمكن إعادة استخدامها,يرجى تغيير الثقافة المتوسطة مع ضعف المقاومة بعد تجميد الخلايا,أي المضادات الحيوية يمكن أن تضاف إلى الثقافة المتوسطة .

3بعض الخلايا لا تعلق على الجدار ، مثل العثور على الخلايا الملتصقة قد تسقط ، يمكن أن يكون الطرد المركزي ضربة بعد تلقيح في زجاجة جديدة .

4بعد تلقي الخلية ، إذا كان اكتشاف ثقافة زجاجة مكسورة ، هناك تسرب السائل والخلايا الملوثة ، يرجى الاتصال بنا في الوقت المناسب .