rnasafe كفاءة عالية ريبونوكلياز المعطل

منتجات الشركة لأغراض البحث العلمي فقط ، لا تستخدم في التشخيص السريري !

الحفاظ على الظروف : - 20 ℃ لأكثر من نصف سنة .

منتوج عرض :

rnasafe يحتوي على العديد من المركبات الخاصة التي يمكن تعطيل ريبونوكلياز ، وإزالة ريبونوكلياز في مختلف الحلول أو رد فعل العازلة بكفاءة ، وبالتالي منع تدهور الحمض النووي الريبي . rnasafe يمكن استخدامها لإعداد تعليق الحمض النووي الريبي ، ويمكن أن تضاف إلى رد فعل مختلف السوائل من الحمض النووي الريبي ( مثل النسخ في المختبر ، النسخ العكسي ، RT-PCR ، يدقق في إعداد التهجين الجزيئي ، نواة حماية assay ) . تعطيل RNASE ، والحفاظ على الاستقرار في الحمض النووي الريبي ، والحصول على أفضل النتائج التجريبية .

ميزات المنتج :

1 . مناسبة لأنّ أنواع مختلفة من مخازن ، بما في ذلك tris و mops العازلة التي لا يمكن معالجتها من قبل النظام .

2 . آمنة ومريحة إزالة أثر ريبونوكلياز في الحل .

3 . الحل يمكن معالجتها في أي وقت ( 60 ℃ 10-20 دقيقة ) لإزالة أي تلوث ممكن بعد ريبونوكلياز .

4 - لا تؤثر على نشاط المنتسخة العكسية ، بوليميريز الحمض النووي الريبي ، ومقاومة للحرارة بوليميريز الحمض النووي .

5 . لا تحتاج إلى تعقيم عالية الضغط بعد العلاج .

طريقة الاستخدام :

1 . هذا المنتج هو 20 × تركيز السائل ، تمييع 20 × rnasafe في الحل العام أو رد فعل العازلة إلى التركيز النهائي 1 × تركيز العمل . على سبيل المثال ، 5 ميكرولتر rnasafe يمكن إضافتها إلى 95 ميكرولتر الحل .

2 - تعطيل ريبونوكلياز في 60 ℃ لمدة 20 دقيقة . الحل تعامل rnasafe يبرد إلى درجة حرارة الغرفة للاستخدام . الحل يمكن معالجتها مرة أخرى ( 60 درجة مئوية لمدة 10-20 دقيقة ) لإزالة التلوث المحتمل ريبونوكلياز أثناء التخزين . الحل هو تبريده إلى درجة حرارة الغرفة ثم تضاف مع المنتسخة العكسية وغيرها من الانزيمات التي هي حساسة للحرارة .

الـ PCRما هي الكواشف والمعدات اللازمة للرد ؟

الكواشفس
قالب .الحمض النوويسالـ PCRرد الفعل يتطلب قالبالحمض النوويمن الخلايا والأنسجة والدم .الحمض النوويالخ . التمهيديالـ PCRرد فعل اثنين من التمهيدي ، على التوالي ، مع قالبالحمض النوويالتمهيدي يمكن أيضا أن تكون متكاملة في المنطقة المحددة المطلوبة من قبل اثنين من أزواج من التضخيم .TAاستنساخ الاشعال المستخدمة في هذه العملية ؛dNTPsسالـ PCRأربعة أنواع من ردود الفعل المطلوبةdNTPsdeoxyadenyl حمض )دATPdeoxythymidine حمض )dCTPdeoxyguanoic حمض )dGTPdeoxycytidine حمض )dTTP، المستخدمة في انقسام الخلايا ،الحمض النوويالعمليات البيولوجية مثل التوليف ، الخ .الـ PCRتضخيم قالبالحمض النوويتمديد وتوسيع سلسلة ؛تاك DNAبوليميريزالـ PCRتفاعل البوليميراز المطلوبة للاستخدام العامتاكبوليميريز ، وهناك أنواع أخرى من بوليميريز مثلPFUوفوسيونالتضخيمالحمض النوويسلسلة ;مخزن PCRحلالـ PCRرد فعل العازلة ، وتنظيم رد فعلالـ pHثيوسلفات الهيدروجينSDSجزيء صغير من المركبات العضوية مثل الفورمالديهايد ، يمكن أن تعززالـ PCRرد فعل محدد ، وبالتالي تحسين كفاءة التفاعل . نظام الهضم :الـ PCRالتضخيم ينطوي في كثير من الأحيان على الخطوات التجريبية مثل إعادة التركيب ، والبناء ، وتسلسل ، وهلم جرا .مارك:معيار الوزن الجزيئي لتحديدالحمض النوويجزء حجم الأداة .الحمض النوويتنقية عدة : لتنقيةالـ PCRرد فعل المنتج ؛
معدات
الـ PCRالصك : يستخدم للتحكم في درجة حرارة التفاعل ، وضمانالـ PCRرقابة صارمة على مختلف درجات الحرارة في وقت رد الفعل . خزان الكهربي : لفصلالـ PCRتضخيم المنتج ؛ أداة استخراج الحمض النووي : تلقائيا استخراج الحمض النووي من عينات الأنسجة . هذه الكواشف والمعدات فيالـ PCRفي علم الأحياء الجزيئي ، إلا على أساس من أجل استكمالالـ PCRو الحصول على نتائج دقيقة .

الـ PCRالتجارب الأساسية ذات الصلة :

الـ PCRتفاعل البوليميراز المتسلسل PCR ،20إلى35كل حلقة تتكون من3خطوات

انحطاط

استخدام درجات الحرارة العالية )93-98℃) جعل سلاسل مزدوجةالحمض النوويفصل . ارتفاع درجة الحرارة سوف ربط اثنينالحمض النوويكسر الروابط الهيدروجينية من السلسلة . قبل الدورة الأولى ، وعادة ما تكون ساخنة لفترة طويلة للتأكد من أن القالب التمهيدي منفصلة ، موجودة فقط في سلسلة واحدة . وقت الخطوة1-2بعد دقائقالـ PCRجهاز التحكم في درجة الحرارة يدخل دورة المرحلة .

الصلب أو الربط,تكرار

فيالحمض النوويبعد فصل مزدوج تقطعت بهم السبل ، وانخفاض درجة الحرارة يمكن أن تربط التمهيدي في سلسلة واحدةالحمض النوويأعلى . درجة الحرارة في هذه المرحلة عادة ما تكون أقل من نقطة انصهار التمهيدي5℃خطأ في درجة حرارة التلدين يمكن أن يؤدي إلى عدم ربط التمهيدي مع القالب أو خطأ ملزمة . وقت الخطوة1-2دقيقة .

ثالثاً - التمديد :

الحمض النوويبوليميريز تبدأ على طول الطريق من التمهيدي ملزمة عندما تبرد .الحمض النوويسلسلة متكاملة . درجة الحرارة في هذه المرحلة يعتمد علىالحمض النوويبوليميريز هذه الخطوة تعتمد على الوقت بوليميريزالحمض النوويطول شظية . تقليديتاكتقدير مركب1000bp / دقيقةجديد نسبياتي بي آرمن بكتيريا thermophilicالحمى المتموجةتقريبا40فيوجن بوليميريز تنتجها شركة تجارية10-15ثانية .

الـ PCRرد الفعل الأمثل :

1درجة الحرارة والوقت لمسخ

ضمان قالبالحمض النوويالحل هو ضمان سلسلة كاملةالـ PCRمفتاح النجاح في التضخيم . تدفئة90~95°C, 30~60sأكثر تعقيداالحمض النوويالجزيء هو أيضا متغير في سلسلة واحدة . درجة حرارة عالية جدا أو طويلة جداتاكنشاط انزيمdNTPالجزيئات تسبب الضرر .

2درجة الحرارة والوقت والإعادة الى الوضع السابقس

الـ PCRالتضخيم خصوصية يعتمد على الربط بين التمهيدي و قالب خلال والإعادة الى الوضع السابق . أعلى درجة حرارة والإعادة الى الوضع السابق ، وارتفاع خصوصية المنتج . انخفاض درجة الحرارة والإعادة الى الوضع السابق ، وانخفاض خصوصية المنتج . حسب الاشعالتي امقيمة محددة .

3تمديد درجة الحرارة والوقتس

عموما يقعتاكدرجة الحرارة المثلى من انزيم70~75°Cبين . التمهيدي أقل من16عندما يكون هناك اثنين من النيوكليوتيدات ، وارتفاع درجة الحرارة لا تساعد على تمديد ملزمة التمهيدي و القالب .70~75°Cتمديد وقت رد الفعل يمكن أن تعتمد على طول الجزء المراد تضخيمه .1 كيلوبايت، 1 دقيقةكفاية أكبر من1كيلوبايتيستغرق وقتا أطول .تاكانزيم يمكن أن1kb / دقيقةزيادة الوقت . تجدر الإشارة إلى أن تمديد فترة طويلة جدا قد يؤدي إلى غير محددة التضخيم . ولذلك ، من الضروري تحديد الوقت المناسب للتمديد .

4عدد الدوراتس

بعد اختيار المعلمات الأخرى ،الـ PCRعدد الحلقات يعتمد أساسا على القالبالحمض النوويالتركيز . من الناحية النظرية20ا25بعد الدورة الثانية ،الـ PCRفي الممارسة العملية ، العائد من كل رد فعل لا يمكن أن تصل إلى الحد الأقصى .100%، لذلك بغض النظر عن تركيز القالب ،20-30الوقت هو أكثر عقلانية من عدد من الدورات . أكثر من دورة ، غير محددة التضخيم زيادة .

منتجات الشركة للبيع :