rnaclean الحمض النووي الريبي تنظيف عدة

الـ PCRما هي الكواشف والمعدات اللازمة للرد ؟

الكواشفس
قالب .الحمض النوويسالـ PCRرد الفعل يتطلب قالبالحمض النوويمن الخلايا والأنسجة والدم .الحمض النوويالخ . التمهيديالـ PCRرد فعل اثنين من التمهيدي ، على التوالي ، مع قالبالحمض النوويالتمهيدي يمكن أيضا أن تكون متكاملة في المنطقة المحددة المطلوبة من قبل اثنين من أزواج من التضخيم .TAاستنساخ الاشعال المستخدمة في هذه العملية ؛dNTPsسالـ PCRأربعة أنواع من ردود الفعل المطلوبةdNTPsdeoxyadenyl حمض )دATPdeoxythymidine حمض )dCTPdeoxyguanoic حمض )dGTPdeoxycytidine حمض )dTTP، المستخدمة في انقسام الخلايا ،الحمض النوويالعمليات البيولوجية مثل التوليف ، الخ .الـ PCRتضخيم قالبالحمض النوويتمديد وتوسيع سلسلة ؛تاك DNAبوليميريزالـ PCRتفاعل البوليميراز المطلوبة للاستخدام العامتاكبوليميريز ، وهناك أنواع أخرى من بوليميريز مثلPFUوفوسيونالتضخيمالحمض النوويسلسلة ;مخزن PCRحلالـ PCRرد فعل العازلة ، وتنظيم رد فعلالـ pHثيوسلفات الهيدروجينSDSجزيء صغير من المركبات العضوية مثل الفورمالديهايد ، يمكن أن تعززالـ PCRرد فعل محدد ، وبالتالي تحسين كفاءة التفاعل . نظام الهضم :الـ PCRالتضخيم ينطوي في كثير من الأحيان على الخطوات التجريبية مثل إعادة التركيب ، والبناء ، وتسلسل ، وهلم جرا .مارك:معيار الوزن الجزيئي لتحديدالحمض النوويجزء حجم الأداة .الحمض النوويتنقية عدة : لتنقيةالـ PCRرد فعل المنتج ؛
معدات
الـ PCRالصك : يستخدم للتحكم في درجة حرارة التفاعل ، وضمانالـ PCRرقابة صارمة على مختلف درجات الحرارة في وقت رد الفعل . خزان الكهربي : لفصلالـ PCRتضخيم المنتج ؛ أداة استخراج الحمض النووي : تلقائيا استخراج الحمض النووي من عينات الأنسجة . هذه الكواشف والمعدات فيالـ PCRفي علم الأحياء الجزيئي ، إلا على أساس من أجل استكمالالـ PCRو الحصول على نتائج دقيقة .

منتجات الشركة لأغراض البحث العلمي فقط ، لا تستخدم في التشخيص السريري !

الـ PCRالتجارب الأساسية ذات الصلة :

الـ PCRتفاعل البوليميراز المتسلسل PCR ،20إلى35كل حلقة تتكون من3خطوات

انحطاط

استخدام درجات الحرارة العالية )93-98℃) جعل سلاسل مزدوجةالحمض النوويفصل . ارتفاع درجة الحرارة سوف ربط اثنينالحمض النوويكسر الروابط الهيدروجينية من السلسلة . قبل الدورة الأولى ، وعادة ما تكون ساخنة لفترة طويلة للتأكد من أن القالب التمهيدي منفصلة ، موجودة فقط في سلسلة واحدة . وقت الخطوة1-2بعد دقائقالـ PCRجهاز التحكم في درجة الحرارة يدخل دورة المرحلة .

الصلب أو الربط,تكرار

فيالحمض النوويبعد فصل مزدوج تقطعت بهم السبل ، وانخفاض درجة الحرارة يمكن أن تربط التمهيدي في سلسلة واحدةالحمض النوويأعلى . درجة الحرارة في هذه المرحلة عادة ما تكون أقل من نقطة انصهار التمهيدي5℃خطأ في درجة حرارة التلدين يمكن أن يؤدي إلى عدم ربط التمهيدي مع القالب أو خطأ ملزمة . وقت الخطوة1-2دقيقة .

ثالثاً - التمديد :

الحمض النوويبوليميريز تبدأ على طول الطريق من التمهيدي ملزمة عندما تبرد .الحمض النوويسلسلة متكاملة . درجة الحرارة في هذه المرحلة يعتمد علىالحمض النوويبوليميريز هذه الخطوة تعتمد على الوقت بوليميريزالحمض النوويطول شظية . تقليديتاكتقدير مركب1000bp / دقيقةجديد نسبياتي بي آرمن بكتيريا thermophilicالحمى المتموجةتقريبا40فيوجن بوليميريز تنتجها شركة تجارية10-15ثانية .

منتجات الشركة للبيع :بطة فيروس التهاب الكبد العالمي مسبار الفلورسنت الكمية PCR كيتفيروس التهاب الكبد البط (DHV)

فيروس طاعون البط مسبار الفلورسنت الكمية PCR كيتفيروس طاعون البط (DPV)

مضان الكمية PCR كيت ( بما في ذلك الإمراضية وغير الإمراضية ) من القولونيةإيكولي

مضان الكمية PCR كيت المشوكة التحقيقEchinococcus granulosus

المشوكة العالمي مسبار الفلورسنت الكمية PCR كيتEchinococcus سبب.

مضان الكمية PCR عدة فهرنهايت التحقيقإدواردسيلا إيكتالوري

إدواردسيلا تَردَ العالمي مسبار الفلورسنت الكمية PCR كيتإدواردسييلا سبب.

إدواردسيلا تَردَدِيّ مسبار الفلورسنت الكمية PCR كيتإدواردسيلا تاردا

مضان الكمية PCR كيت ( RT-1976 RT-76 ) إسقاط البيض متلازمة فيروسفيروس متلازمة قطرة البيض-1976 (EDSV-76) -1976

فلوري في الوقت الحقيقي الاسترداد عدة للكشف عن ( أليسيا أليسيا الكلاب )إرليشيا كانيس

مضان الكمية PCR كيت ( chafeelic chafeelic الجسم )إرليشيا شافينسيس

( فيرغسون إريك ) مسبار الفلورسنت الكمية PCR كيتإرليشيا فيرغوزوني

مضان الكمية PCR كيتإرليشيا ريستيسي

fluorimetric الكمية PCR عدة ( elicity اجترار elicity يدقق )إرليشيا ريمينانتيوم

فلوري الكمية PCR كيت ( إيريك ) العام يدقق في طريقةآئرولیا

مضان الكمية PCR كيت ایکنیوم erodium يدقق في طريقةإيكينيلا corrodens

الايميريا العام مسبار الفلورسنت الكمية PCR كيتإيميريا سبب.

مضان الكمية PCR عدة للكشف عن الديدان الخيطيةElaeophora شنايدري

ايمون microbacteria مسبار الفلورسنت الكمية PCR كيتإيمونسيا بارفا

مسبار الفلورسنت الكمية PCR كيتEncephalitozoon سبب.

مسبار الفلورسنت الكمية PCR كيتإنتامويبا هيستوليتيكا

الانتاميبا العالمي مسبار الفلورسنت الكمية PCR كيتإنتامويبا سبب.

مضان الكمية PCR عدة اتش 41 يدقق في طريقةفيروس أدينوفيروس41

القولون الغازية مسبار الفلورسنت الكمية PCR كيتE.coli الغازية (EIEC)

مضان الكمية PCR عدة للكشف عن التصاق الأمعاء القولونيةEnteroadhesive E.Coli (EAEC)

انتروباكتر ائروژنز مسبار الفلورسنت الكمية PCR كيتالبكتيريا الهوائية

انتروباكتر كولوآسه مسبار الفلورسنت الكمية PCR كيتEnterobacter cloacae

انتروباكتر ساكازاكي مسبار الفلورسنت الكمية PCR كيتEnterobacter ساكازاكي

مضان الكمية PCR كيت انتروباكتر التحقيق العالميEnterobacter سبب.

انتروكوكوس الرصاص مسبار الفلورسنت الكمية PCR كيتإنتروكوكوس كاسيليفلاوس

مضان الكمية PCR كيت انتروكوكوس يدقق في طريقة دائمةإنتروكوكوس دورانس

انتروكوكوس فيكاليس مسبار الفلورسنت الكمية PCR كيتإنتروكوكوس فاكاليس

انتروكوكوس البرازية مسبار الفلورسنت الكمية PCR كيتإنتروكوكوس فاسيوم

انتروكوكوس العالمي مسبار الفلورسنت الكمية PCR كيتإنتروكوكوس سبب.

مضان الكمية PCR عدة للكشف عن microspora المعويةEnterocytozoon bieneusi

الروبيان hepatointestinal ميكروسيستيس يدقق في الوقت الحقيقي الاسترداد كيتEnterocytozoon hepatopenaei (EHP) (إنتروسيتوزون هيباتوبيناي)

مضان الكمية PCR كيت enterohemorrhagic الإشريكية القولونية o104 : H4 المصلي يدقق في طريقةE. coli النزيف القومي (EHEC)

الـ PCRرد الفعل الأمثل :

1درجة الحرارة والوقت لمسخ

ضمان قالبالحمض النوويالحل هو ضمان سلسلة كاملةالـ PCRمفتاح النجاح في التضخيم . تدفئة90~95°C, 30~60sأكثر تعقيداالحمض النوويالجزيء هو أيضا متغير في سلسلة واحدة . درجة حرارة عالية جدا أو طويلة جداتاكنشاط انزيمdNTPالجزيئات تسبب الضرر .

2درجة الحرارة والوقت والإعادة الى الوضع السابقس

الـ PCRالتضخيم خصوصية يعتمد على الربط بين التمهيدي و قالب خلال والإعادة الى الوضع السابق . أعلى درجة حرارة والإعادة الى الوضع السابق ، وارتفاع خصوصية المنتج . انخفاض درجة الحرارة والإعادة الى الوضع السابق ، وانخفاض خصوصية المنتج . حسب الاشعالتي امقيمة محددة .

3تمديد درجة الحرارة والوقتس

عموما يقعتاكدرجة الحرارة المثلى من انزيم70~75°Cبين . التمهيدي أقل من16عندما يكون هناك اثنين من النيوكليوتيدات ، وارتفاع درجة الحرارة لا تساعد على تمديد ملزمة التمهيدي و القالب .70~75°Cتمديد وقت رد الفعل يمكن أن تعتمد على طول الجزء المراد تضخيمه .1 كيلوبايت، 1 دقيقةكفاية أكبر من1كيلوبايتيستغرق وقتا أطول .تاكانزيم يمكن أن1kb / دقيقةزيادة الوقت . تجدر الإشارة إلى أن تمديد فترة طويلة جدا قد يؤدي إلى غير محددة التضخيم . ولذلك ، من الضروري تحديد الوقت المناسب للتمديد .

4عدد الدوراتس

بعد اختيار المعلمات الأخرى ،الـ PCRعدد الحلقات يعتمد أساسا على القالبالحمض النوويالتركيز . من الناحية النظرية20ا25بعد الدورة الثانية ،الـ PCRفي الممارسة العملية ، العائد من كل رد فعل لا يمكن أن تصل إلى الحد الأقصى .100%، لذلك بغض النظر عن تركيز القالب ،20-30الوقت هو أكثر عقلانية من عدد من الدورات . أكثر من دورة ، غير محددة التضخيم زيادة .