الببتيد التوليف وتعديل الخدمات التقنية

نبذة مختصرة : ببتيد التوليف هو تسلسل المرحلة الصلبة التوليف من ج ( الكربوكسيل ) ن ( الأمونيا ) . في الماضي تم تركيب ببتيد في الحل يسمى الطور السائل التوليف . منذ merrifield وضعت بنجاح المرحلة الصلبة الببتيد التوليف في عام 1963 ، بعد التحسين المستمر و * ، المرحلة الصلبة الببتيد التوليف أصبحت التكنولوجيا المستخدمة عادة في تخليق البروتين الببتيد ، مما يدل على مزايا المرحلة السائلة التقليدية طريقة التوليف ، مما يقلل كثيرا من صعوبة تنقية كل خطوة . ببتيد التوليف عموما تنقسم إلى نوعين : المرحلة الصلبة والسائلة ببتيد التوليف التوليف .

مبدأ التقنية التجريبية :

ببتيد synthetizer يضيف باستمرار ، يتفاعل ، وتوليف الأحماض الأمينية في تسلسل معروف ( تسلسل ، عادة من محطة إلى محطة n-carboxyl c-terminal-amino ) في إغلاق انفجار الزجاج المفاعل للحصول على ببتيد الناقل . الصلبة مرحلة التوليف ، مما يقلل كثيرا من صعوبة تنقية المنتج في كل خطوة . من أجل منع ردود الفعل السلبية ، سلسلة جانبية من الأحماض الأمينية المشاركة في رد الفعل هو حماية . الكربوكسيل نهاية خالية ويجب تفعيلها قبل رد الفعل .

تدفق العملية التجريبية :

1 ، إزالة الحماية : FMOC حماية العمود مونومر يجب أن تستخدم - نوع من المذيبات القلوية ( piperidine ) إزالة المجموعات الأمينية واقية .

2 ، وتفعيل يشابك : الكربوكسيل من الأحماض الأمينية التالية يتم تفعيلها من قبل المنشط . تنشيط مونومرات تتفاعل مع مواقف المجموعات الأمينية عبر ربط لتشكيل الببتيدات

مفاتيح في هذه الخطوة ، الكثير من تركيز الكواشف المستخدمة لدفع رد الفعل . الدورة الدموية : هذه الخطوة اثنين من ردود الفعل تتكرر حتى يتم الانتهاء من التوليف .

3 ، عملية الاستخراج و الحماية : ببتيد مزال من العمود ، حماية المجموعة من قبل وكيل الحماية ( TFA ) عملية الاستخراج و الحماية .

ببتيد تعديل نوع :

1 . [ ك ] نهاية وسم تكنولوجيا :

ج محطة amidation ( c-termainal ) .

aldehydes alcohols , و ( p-nitroanilide PNA )

AMC、AFC、 ثيول إيثيلامين ( سيستاميد ) ، استر ، n-alkyi أميدس ، الخ .

2 . [ ن - ترم ] تكنولوجيا :

acetylated ( أستلة ) ، palmytolyl hynic , البيوتين العلامات ( biotinylated ) ، برومو acetylated ( br-acetylated ) .

شيلاتينغ فعل ( دوتا ، dtpa ) الفورمالديهايد ( الفورمالديهايد ) ، tetradecyl ، octadecylated succinylation ، النخلة ، التفاح ، الدهون ، الخ .

3 . نيون علامة تعديل :

c-terminal تعديل : الاتحاد الآسيوي ، AMC ، شرطة أبوظبي ، ليس ، PNA ، rh110

N端修饰: Bodipy-FL ، Cy3 ، Cy5 ، Texas Red ، 5-Tamra ، 5-odoacetamido fluoresceinRhodamine 110 و Rhodamine B Luciferin ، EDANS

FAM ، FITC ، MCA ، Rox ، Sulforhodamine 101 ، 5-TAMRA

4 . cyclization فعل :

حلقة خاصة ( ن - > ج أو الرأس إلى الذيل )

دوري الببتيدات النشطة بيولوجيا ( دوري الببتيدات النشطة بيولوجيا ) من المنتجات الطبيعية ( 2-bisulfide 3-bisulfide شكل السندات ) .

5 . مثيلة تعديل :

سلسلة جانبية مثيلة Lys(For),LysS(Me), Lys(Me)2, Lys(Me)3, Arg(Me)2 symmetrical, D-Tyr(Me),D-Tyr(Et)N محطة مثيلة ( n-me الأرجنتين ، n-me-asp n-me-glu , n-me-leu , n-me-nle , n-me-nva , n-me-phe , n-me-s n-s , )

Me-Ser، N-Me-Trp، N-Me-Thr، N-Me-Val)

6 . عدة تعديلات خاصة :

مختلف اقتران ( جيش صرب البوسنة ، كل h-conjugated peptides antibody الإنتاج ) ، الفسفرة ( Phosphoserine ، Phosphothreonine ) ، Sulfonation ( Tyrosine أو سيرين ) ، خريطة ( متعدد الببتيد ) ، glycopeptides شماعة تعديل ( شماعة )

الاحتياطات التجريبية :

عروض العملاء :

ببتيد متواليات ، الكمية ، النقاء ، والمتطلبات الخاصة

2 ، وتجميد المجفف ببتيد يمكن الحفاظ عليها في - 20 درجة أو في درجة حرارة الغرفة

3 ، الببتيد الحل هو أكثر استقرارا من تجميد المجفف ، الحل يجب أن تكون محايدة الرقم الهيدروجيني ( 5-7 ) - ( 20 درجة ) .

4 . لتجنب تكرار تجميد ذوبان العينة ،هاوتخزين في عينات صغيرة .

تسليم معيار :

ببتيد ، والبيانات .

أخرى

معظم البروتينيةشوانالمذيب هو استخراج المياه النقية جدا ، تمييع حمض ض أو الأمونيا على التوالي يساعد على حل القلوية أو الحمضية البروتينية . إذا كانت هذه الأساليب لا تزال غير قابلة للذوبان البروتينية ، DMF ، واليوريا ، guanidianiam ، chloride ، acetonitnle ينصح بحل

إليسا كيت مجانا اختبار الجيل