- البريد الإلكتروني
- الهاتف
-
العنوان
لين 6725 Beiqing السريع ، شنغهاي
شنغهاي yanjin التكنولوجيا الحيوية المحدودة
لين 6725 Beiqing السريع ، شنغهاي
العلامات النظائر الكمية :
iTRAQ (isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation) &TMT (Tandem Mass Tags) في المختبر وضع العلامات وتحديد أساليب البروتينية وضعت من قبل شركة AB Sciex و شركة ثيرمو ، على التوالي ، تم استخدام العديد من الكواشف النظائر المسمى ن المحطة الطرفية أو ليسين الجانب سلسلة مجموعات من البروتين البروتينية ، الكواشف مع مختلف الأوزان الجزيئية المسمى عينات من مصادر مختلفة ، وبالتالي تحقيق المقارنة بين عينات مختلفة من البروتين الخلالي .
خطوات تجربة iTraq :
1 - إعداد العينة : تركيز البروتين في العينة التي سيتم قياسها كميا .
2 - الحد من البروتين امين والتحلل الأنزيمي : 100 ميكروغرام من كل مجموعة من العينات التي تم تجهيزها وفقا لمتطلبات itraq عدة ، ثم حل بالإنزيم من التربسين حل متسلسل تم جمعها بواسطة الطرد المركزي الفائق .
3 . itraq العلامات : تحقيق التوازن بين itraq الكاشف في درجة حرارة الغرفة ، حل مع 150 ميكرولتر كحولالأيسوبروبيل ، إضافة إلى حل بالإنزيم الببتيد itraq الكاشف ، رد فعل في درجة حرارة الغرفة لمدة 2 ساعة ، إضافة الماء إلى إنهاء رد الفعل ، خلط مجموعات مختلفة من العينات في نفس المبلغ ، فراغ تجميد تجفيف العينات .
4 . lc-ms-ms التحليل : استخدام الحرارية q-exactive أربطة لتحديد وبالترادف مطياف الكتلة .
5 - معالجة البيانات وتحليل المعلومات
عرض النتائج :
كاملمكتبالتحليل العنقودي
التحليل الإحصائي للبروتين رقم * 0
دورة تجريبية ومعايير التسليم
1 - الفترة التجريبية : 4-6 أسابيع
2 - معايير التسليم : البروتين الكمي ، وتحديد النتائج ، البيانات الأصلية من مطياف الكتلة ، تحليل الإشارات الحيوية ( G0 التحليل . KEGG التحليل وهكذا دواليك (
المعلومات التي تحتاج إلى تأكيد
1 - نوع العينة
2 . نوع العينة ( الأنسجة أو الخلايا أو الدم )
3 - عدد العينات وتصنيفها
4 - المتطلبات التحليلية
المراجع
[1] XuX ، Zhu Q ، Zhang R ، وآخرون تحليل البروتيوميك القائم على ITRAQ لإصابة الرئة الحادة الناجمة عن حمض الأوليك في
الفئران [J]. فيزيولوجيا الخلايا والكيمياء الحيوية، 2017: 1949-1964.
[2] QuZ ، GaoF ، LiL ، وآخرون. تحليل بروتيوم رباعي خالي من العلامات لبروتينات الغشاء المعبر عنها بشكل تفاضلي
من العوامل الكبيرة الرئوية المصابة بمتلازمة التناسل والتنفس للخنزير عالية المسببة للأمراض
الفيروس وسلالته المخففة [J]. بروتيوميكس، 2017: 1700101.