nci-h522 ( الإنسان غير زنزانة صغيرة سرطان الرئة الخلية )

nci-h522 ( الإنسان غير زنزانة صغيرة سرطان الرئة الخلية )

العلامة التجارية : شنغهاي yanzun الأحياء
عدد الخلايا : 1x10 ^ 6 خلايا
حيوية الخلية : 95 ٪ ( حيوية من قبل استبعاد الأزرق تريبان )
اسم الخلية :nci-h522 ( الإنسان غير زنزانة صغيرة سرطان الرئة الخلية )

المصدر : الإنسان
العمر حسب الجنس : ذكر , 58
مصدر الأنسجة : الرئة
خصائص النمو : نمو ملتصقة
مورفولوجيا الخلايا : epithelioid
مواصفات الخلية : 1 × 106cells / T25 أو 1 مل
الثقافة شرط : rpmi-1640 + 10 ٪ fetalbovine serum ( FBS )
37 ℃ ، 5٪ من ثاني أكسيد الكربون
تجميد حالة التخزين : 90 ٪ FBS + 10 ٪ DMSO
طرق : 1 : 3 إلى 1 : 6 ، 1-2 أيام

عملية زراعة الخلايا
نقل الثلج الجاف : نقل إلى النيتروجين السائل مباشرة بعد استلام الخلايا ، أو على المدى القصير - 80 درجة مئوية الثلاجة المجمدة ، أو الانتعاش المباشر
النقل في درجة الحرارة العادية : بعد استلام الخلية ، خلية ثقافة زجاجة مأخوذة من مربع التعبئة والتغليف على الفور ، ثقافة فرعية تتم وفق الخطوات التالية
مرور الخلية : كثافة الخلية تصل إلى 80 ٪ - 90 ٪ ، يمكن أن تحمل على مرور الثقافة
خطوات تشغيل الخلية في الثقافة زجاجة
قبل التسليم ، ونحن ملء زجاجة كاملة مع الثقافة المتوسطة ، وذلك للحد من فقدان الخلايا أثناء النقل .
1 . بعد تلقي الخلايا ، يرجى ملاحظة ما إذا كان هناك أي تلوث . وضع الثقافة زجاجة تحت المجهر المقلوب بعناية لمعرفة ما إذا كان أو لم يكن هو عكر أو ملوثة بالبكتيريا . لأن هناك المطبات في عملية النقل ، وبعض الخلايا حساسة للتغيرات في درجة الحرارة ، قد يكون هناك بعض الخلايا تسقط تطفو ، هذه الخلايا لا تزال الخلايا الحية ، لا رمي بعيدا ، يمكن تخصيب centrifugalized بعد مرور الاستخدام .
2 - خلية التصاق ، في بيئة آمنة بيولوجيا مجلس الوزراء ، مضخة فراغ يستخدم لإزالة فائض متوسطة الثقافة في الثقافة زجاجة ، ثم 5-8ml المتبقية أو نحو ذلك . إذا كانت الخلية قد تم شغلها مع الثقافة زجاجة ، يرجى تمرير على الفور .
3 - تعليق خلية ، خلية في الثقافة زجاجة نقل إلى أنبوب الطرد المركزي ، الطرد المركزي 150 جرام لمدة 5 دقائق ، بعد إزالة طاف ، تهب الخلايا مع 5 مل من الثقافة المتوسطة ، ثم نقلها إلى ثقافة جديدة زجاجة ، ثم وضعها في مناسبة محتوى ثاني أكسيد الكربون في 37 ℃ درجة حرارة ثابتة حاضنة الثقافة .
إجراءات تشغيل الخلايا المجمدة
ملاحظة : لضمان ارتفاع معدل البقاء على قيد الحياة من الخلايا ، يرجى الحصول على المنتج مباشرة بعد ذوبان الثقافة .
1 - وضع أنبوب التخزين المجمد في 37 ℃ حمام الماء ذهابا وإيابا يهز بسرعة ذوبان الجليد . من أجل تجنب التلوث ، تأكد من تجميد تخزين الأنابيب الفم يوضع على سطح الماء . يذوب بسرعة ، حوالي 1 دقيقة .
2 . بمجرد ذوبان السائل في أنبوب ، تأخذ بها على الفور ، واستخدام الكحول رذاذ لمسح سطح أنبوب . من الآن فصاعدا ، يجب أن يتم الانتهاء من عملية المتابعة في مجلس الوزراء السلامة البيولوجية .
3 . نقل السائل في تجميد أنبوب الطرد المركزي أنبوب يحتوي على 5 مل من الثقافة المتوسطة ، الطرد المركزي 150 جرام لمدة 5 دقائق ، مع مضخة فراغ إزالة طاف . . . . . . .
4 - إعادة تعليق الخلايا ونقلها إلى ثقافة جديدة زجاجة . من أجل الحفاظ على معدل البقاء على قيد الحياة من خلية الإنعاش ، سخن متوسطة في 37 ℃ حمام مائي .
5 - الخلايا المستزرعة في 37 ℃ حاضنة تحتوي على ثاني أكسيد الكربون .
خلية ثقافة ملتصقة
1 - استيعاب والتخلص من الثقافة المتوسطة في زجاجة ، إضافة برنامج تلفزيوني تغسل مرة واحدة .
2 - إضافة 1 مل من 0.25 ( ث / ت ) trypsin يدتا الحل ، ثم احتضان في 37 ℃ حاضنة حتى الخلايا من الجدار . هذه العملية تستغرق حوالي 3-5 دقائق .
3 - تحييد التربسين في 2 مل متوسطة الثقافة ، ضربة بلطف إلى أسفل الخلية من سطح الثقافة زجاجة ، وجعل الخلية تفريق .
4 - تعليق خلية جمعت في 15 مل أنبوب الطرد المركزي ، الطرد المركزي 150 جرام لمدة 5 دقائق ، مع مضخة فراغ إزالة طاف . . . . . . . الثقافة المتوسطة كانت تستخدم لتعليق الخلايا ونقلها إلى ثقافة جديدة زجاجة .
تعليق خلية ثقافة يمكن الرجوع إلى الطرق التالية :
طريقة نقل مباشر
1 - تعليق خلية تنمو إلى 80 ٪ ~ 90 ٪ ( تعليق خلية يصبح أصفر ) ، يمكن أن تمر .
2 - امتصاص 1 / 2 ~ 1 / 3 من تعليق خلية من القش ؛
3 . إضافة كمية مناسبة من وسائل الإعلام الجديدة ، ومواصلة الثقافة .
الطرد المركزي ( في حالة وجود شظايا الخلية )
1 - نقل تعليق خلية في أنبوب الطرد المركزي .
2.150 ز الطرد المركزي لمدة 5 دقائق ، والتخلص من طاف .
3 - تعليق الخلايا الطازجة باستخدام وسائل الإعلام ؛
4 . أنبوب الشفط يمتص كمية مناسبة من تعليق خلية ثقافة جديدة في زجاجة ، ثم إضافة كمية مناسبة من وسائل الإعلام الجديدة ، ومواصلة الثقافة .
عملية تجميد الخلية
1.1000rpm الطرد المركزي لمدة 5 دقائق لإزالة طاف . إضافة 1 مل من المصل تعليق الخلايا ، إضافة المصل و دمسو حسب عدد الخلايا ، بلطف ، دمسو التركيز النهائي هو 10 ٪ ، كثافة الخلية لا تقل عن 1 × 106 / مل ، كل تجميد أنبوب تخزين 1 مل من تعليق الخلايا ، وإيلاء الاهتمام إلى تجميد أنبوب لجعل العلامات .
مكان التخزين المجمد في عملية التبريد مربع ، في الثلاجة - 80 درجة مئوية ، على الأقل 2 ساعة في وقت لاحق في النيتروجين السائل ملء التخزين

وفيما يلي بعض الخلايا ذات الصلة :