متعددة للكشف عن مضان ايمونوهيستوشيمي

　　متعددة للكشف عن مضان ايمونوهيستوشيميمبدأ التقنية الرئيسية من tyrosamide إشارة التضخيم ( TSA ) التكنولوجيا . الاتفاق هو نوع من طريقة الكشف عن كثافة عالية في الموقع enzymological المسمى البروتين المستهدف أو الحمض النووي باستخدام هورس راديش پراكسيداز ( HRP ) . هذا الأسلوب يستخدم تفاعل البيروكسيديز من tyramide التيروزين لإنتاج كمية كبيرة من المنتجات الأنزيمية في مستضد الضد ملزمة الموقع . هذه المنتجات هي ملزمة مع بقايا البروتين المحيطة بها ، ثم ربط مع مجموعات الفلورسنت ، مما يجعل الكشف عن إشارة تضخيم هندسيا . هذه التكنولوجيا يمكن أن تكون متوافقة مع الأصباغ عالية الأداء مثل اليكسا فلوري ، والأصباغ الفلورية التقليدية ، وما إلى ذلك ، لتحقيق متعددة العلامات الفلورية .

وقد استخدمت على نطاق واسع في العديد من المجالات :

　　تحليل خلية واحدةيمكن الكشف عن العديد من البروتينات في وقت واحد على مستوى الخلية .

　　رقاقة تحليلالكشف عن البروتينات في biochip متعددة مع تدفق عالية .

　　الشكل التنظيمي والتحليل الوظيفيدراسة التوزيع المكاني والعلاقات بين البروتينات المختلفة في الأنسجة .

　　المكروية تحليل الورمتحليل العلاقة المكانية بين الورم المناعي تسلل ، نقطة تفتيش ، الخلايا السرطانية والخلايا المناعية .

　　تحليل أمراض المناعة الذاتيةالتحقيق في التسبب في أمراض المناعة الذاتية .

　　تقييم رد فعل الرفض: رصد وتقييم الاستجابة المناعية بعد الرفض .

الخطوات العامة للكشف عن مضان المناعية متعددة هي كما يلي :

　　أخذ العيناتالحصول على عينات من الأنسجة التي سيتم الكشف عنها ، وعادة ما تستخدم طريقة التقطيع .

　　علاج ثابت: الفورمالديهايد أو الإيثانول وغيرها من المواد المستخدمة في تحديد عينات الأنسجة للحفاظ على التشكل .

　　شريحة العلاجقطع الأنسجة الثابتة إلى شرائح رقيقة ، عادة 4-5 ميكرون سميكة .

　　علامة الضداختيار الأجسام المضادة التي تربط البروتينات المستهدفة عادة مع المواد مثل فلوريسئين أو الإنزيمات .

　　الاتفاق التضخيمإشارة التضخيم من اتفاق التعاون بشأن التجارة في الخدمات التقنية المستخدمة لجعل فلوريسئين تترسب على نطاق واسع في مستضد الضد ملزمة الموقع .

　　علاج الصباغةالأجسام المضادة التي تم تحديدها من قبل تلطيخ الفلورسنت ملزمة محددة مع خلايا الأنسجة .

　　جمع وتحليل الصورالصور التي تم التقاطها بواسطة المجهر مضان أو متحد البؤر المسح المجهر ، ثم تحليلها كميا ونوعيا .

طرق تحليل الصور المناعية متعددة تشمل :

　　التحليل النوعيمن خلال مراقبة توزيع كثافة إشارة الفلورسنت ، يمكننا تحديد التعبير و التعريب من البروتين الهدف في الأنسجة .

　　التحليل الكميباستخدام برامج معالجة الصور ، مضان إشارات كميا ، مقارنة الاختلافات في التعبير البروتين في عينات مختلفة أو تحت ظروف مختلفة .

　　تحليل الموقع المشتركتحليل العلاقة المكانية بين مختلف إشارات الفلورسنت ، واستكشاف التفاعل و colocalization بين البروتينات .

من خلال هذه الأساليب التحليلية ،متعددة للكشف عن مضان ايمونوهيستوشيميالتكنولوجيا يمكن أن توفر ثروة من المعلومات البيولوجية ، مما يساعد على فهم العمليات الفسيولوجية والمرضية من الخلايا .