الفم سرطان الخلايا الحرشفية الخلية البشرية

معلومات المنتج

اسم الخليةسالفم سرطان الخلايا الحرشفية الخلية البشرية

العلامة التجارية : شنغهاي yanzun الأحياء
عدد الخلايا : 1x10 ^ 6 خلايا
حيوية الخلية : 95 ٪ ( حيوية من قبل استبعاد الأزرق تريبان )
الخلية : 1 : 4-1 : 6 ؛ تغيير السوائل 2-3 مرات في الأسبوع
ظروف النمو : بخار المرحلة : الهواء ، 95 ٪ ؛ ثاني أكسيد الكربون درجة الحرارة : 37 درجة مئوية
الكشف عن الخلايا : الخلايا لا تحتوي على فيروس نقص المناعة البشرية - 1 ، الالتهاب الكبدي الوبائي ، سي ، المفطورة ، البكتيريا والخميرة والفطريات
الثقافة : dmem ( نسبة عالية من السكر ) + 10 ٪ سلاح + 1 ٪ ع / ث ؛ 37 ℃ ، 5 ٪ ثاني أكسيد الكربون
طريقة نقل : 1 : 2-1 : 3 اقترح تغيير السوائل مرة واحدة في يومين
حالة الحفظ بالتبريد : المصل خالية من الخلايا
تجميد حالة التخزين : 90 ٪ FBS + 10 ٪ DMSO
تجميد الخلايا : النيتروجين السائل

عملية زراعة الخلايا

نقل الثلج الجافسبعد استلام الخلايا ، يجب نقلها فورا إلى النيتروجين السائل التخزين ، أو-80سCالتجميد على المدى القصير أو الانتعاش المباشر من الثلاجة

درجة الحرارة العادية النقلسبعد استلام الخلية ، خلية ثقافة زجاجة مأخوذة من مربع التعبئة والتغليف على الفور .

مرور الخليةسكثافة الخلية تصل إلى 80 ٪ - 90 ٪ ، ويمكن أن تكون ثقافة فرعية

خطوات تشغيل الخلية في الثقافة زجاجة

قبل التسليم ، ونحن ملء زجاجة كاملة مع الثقافة المتوسطة ، وذلك للحد من فقدان الخلايا أثناء النقل .

1. بعد تلقي الخلايا ، يرجى ملاحظة ما إذا كان هناك أي تلوث . وضع الثقافة زجاجة تحت المجهر المقلوب بعناية لمعرفة ما إذا كان أو لم يكن هو عكر أو ملوثة بالبكتيريا . لأن هناك المطبات في عملية النقل ، وبعض الخلايا حساسة للتغيرات في درجة الحرارة ، قد يكون هناك بعض الخلايا تسقط تطفو ، هذه الخلايا لا تزال الخلايا الحية ، لا رمي بعيدا ، يمكن تخصيب centrifugalized بعد مرور الاستخدام .

2. بالنسبة adhesivecells ، في بيئة آمنة بيولوجيا مجلس الوزراء ، مضخة فراغ يستخدم لإزالة الفائض من الثقافة المتوسطة في قارورة الثقافة إلى حوالي 5-8ml المتبقية .℃في درجة حرارة ثابتة حاضنة ، فك غطاء زجاجة . إذا كانت الخلية قد تم شغلها مع الثقافة زجاجة ، يرجى تمرير على الفور .

3. في حالة تعليق خلية ، خلية في الثقافة زجاجة نقل إلى أنبوب الطرد المركزي ، الطرد المركزي 150 جرام لمدة 5 دقائق ، طاف هو إزالتها ، ثم خلية في مهب بعيدا مع 5 مل من الثقافة المتوسطة ، ثم نقل إلى ثقافة جديدة زجاجة .℃درجة حرارة ثابتة حاضنة .

إجراءات تشغيل الخلايا المجمدة

ملاحظة : لضمان ارتفاع معدل البقاء على قيد الحياة من الخلايا ، يرجى الحصول على المنتج مباشرة بعد ذوبان الثقافة .

1. وضع أنبوب المجمدة في 37℃يهز ذهابا وإيابا في حمام الماء و يذوب بسرعة . من أجل تجنب التلوث ، تأكد من تجميد تخزين الأنابيب الفم يوضع على سطح الماء . يذوب بسرعة ، حوالي 1 دقيقة .

2. عندما يذوب السائل في تجميد تخزين الأنابيب ، يؤخذ بها على الفور ، الكحول رذاذ يستخدم لمسح سطح تجميد تخزين الأنابيب . من الآن فصاعدا ، يجب أن يتم الانتهاء من عملية المتابعة في مجلس الوزراء السلامة البيولوجية .

3. السائل في تجميد أنبوب نقل إلى أنبوب الطرد المركزي تحتوي على 5 مل من الثقافة المتوسطة ، 150 جرام الطرد المركزي لمدة 5 دقائق ، مع مضخة فراغ إزالة طاف . . . . . . .

4. بعد استخدام وسائل الإعلام ، تعليق الخلايا ونقلها إلى ثقافة جديدة زجاجة . من أجل ضمان بقاء الخلية الانتعاش ، متوسطة℃استخدام حمام الماء بعد التسخين .

5. الخلايا التي تحتوي على ثاني أكسيد الكربون المناسبة℃درجة حرارة ثابتة حاضنة .

خلية ثقافة ملتصقة

1. امتصاص والتخلص من الثقافة المتوسطة في الثقافة زجاجة ، إضافة عBSيغسل مرة واحدة .

2. إضافةمل 0.25 (w / v) تريبسين-EDTAالحل ، وضعت في7حاضنة حتى الخلايا تسقط من الجدار . هذه العملية تستغرق حوالي 3-5دقيقة .

3. انضمملتحييد التربسين بعد الانتهاء من متوسطة الثقافة ، تهب بلطف الخلايا من سطح قارورة الثقافة وتفريق الخلايا .

4. جمع تعليق خلية15 ملداخل أنبوب الطرد المركزي ،150 جرام طرد مركزي لمدة 5 دقائقإزالة طاف مع مضخة فراغ . الثقافة المتوسطة كانت تستخدم لتعليق الخلايا ونقلها إلى ثقافة جديدة زجاجة .

تعليق خلية ثقافة يمكن الرجوع إلى الطرق التالية :

طريقة نقل مباشر

1. بعد تعليق خلية تنمو إلى 80 ٪ ~ 90 ٪ ( تعليق خلية يصبح أصفر ) ، يمكن أن تمر .

2. استخدامقشة1 / 2 ~ 1 / 3 من تعليق خلية ماصة ؛

3. إضافة كمية مناسبة من وسائل الإعلام الجديدة لمواصلة الثقافة .

   الطرد المركزي ( في حالة وجود شظايا الخلية )

4. نقل تعليق خليةأنبوب الطرد المركزيداخل

5. 150 غ الطرد المركزي لمدة 5 دقائق ، والتخلص من طاف .

6. إعادة تعليق الخلايا باستخدام وسائل الإعلام الطازجة ؛

7. أنبوب الشفط يمتص كمية مناسبة من تعليق خليةزراعة زجاجةإضافة كمية مناسبة من وسائل الإعلام الجديدة ، ومواصلة الثقافة .

عملية تجميد الخلية

1. 1000rpm الطرد المركزي لمدة 5 دقائق لإزالة طاف . إضافة 1 مل من المصل تعليق الخلايا ، إضافة المصل دمسو حسب عدد الخلايا ، بلطف مزيج，كثافة الخلية لا تقل عن 1 × 10 ٪ في نهاية المطاف تركيز DMSO⁶/mL， 1 مل من تعليق خلية في كل تجميد أنبوب ، لاحظ أن تجميد أنبوب ينبغي تحديدها .ن

2. وضع أنبوب التبريد في الثلاجة - 80 درجة مئوية ، ونقل إلى النيتروجين السائل لمدة 2 ساعة على الأقل .