لب الأسنان الخلايا الجذعية البشرية

حقوق نسخة تشيموكيني مستقبلات 5 ccr5 إليسا كيت مجانا حقوق نسخة تشيموكيني مستقبلات 2 ccr2 إليسا كيت

مصدر الأنسجة : لب الأسنان

مواصفات المنتج : 5 * 105cells / T25 خلية ثقافة زجاجة

خلية مقدمة :

　　لب الأسنان الخلايا الجذعية البشريةفصل من الأنسجة الزليلي . لب الأسنان الأنسجة الموجودة في تجويف اللب داخل الأسنان . شكل تجويف اللب و شكل الأسنان هي مماثلة تقريبا ، ولي العهد اللب تجويف أكبر ، وقال اللب تجويف ، تجويف اللب من جذور الأسنان هي أصغر ، وقال قناة الجذر ، جذر نصائح لها ثقوب صغيرة ، وقال قمي الثقبة . لب الأسنان الأنسجة تتكون أساسا من الأعصاب ، الأوعية الدموية ، الغدد الليمفاوية ، والأنسجة الضامة ، فضلا عن odontoblasts مرتبة حول لب الأسنان . لب الأسنان يمكن أن تظهر مجموعة متنوعة من الأعراض والعلامات في العيادة بسبب اختلاف تأثير منشط و مقاومة الجسم . احتقان اللب يمكن أن تتحول إلى التهاب اللب الحاد بعد فترة طويلة من الزمن . الخلايا الجذعية الوسيطة ( MSCS ) المستمدة من الأديم المتوسط الأنسجة الجنينية ، لديها قدرة قوية على تكرار الذات و multidirection تمايز الخلايا الشحمية ، بانيات ، غضروفية و myocytes.mscs يمكن استخدامها لإصلاح تلف الغضروف ، ويمكن أن تكون معزولة من نخاع العظام ، الدهون ، الغشاء الزليلي ، والعظام والعضلات ، السائل الذي يحيط بالجنين ، الحبل السري ، دم الحبل السري والخلايا الجذعية الوسيطة .

طريقة العرض :

كولاجيناز الهضم ، وانخفاض الكثافة تمييع الاستنساخ المستخدمة في عزل الخلايا في المختبر . خلايا / زجاجات .

اختبار الجودة :

نقاء أكثر من 90 ٪ و لا تحتوي على فيروس نقص المناعة البشرية - 1 ، الالتهاب الكبدي الوبائي ، سي ، المفطورة ، البكتيريا والخميرة والفطريات .

معلومات التدريب :

الثقافة المتوسطة : تحتوي على سلاح ، إضافات النمو ، penicillin ، streptomycin ، الخ .

تغيير التردد : تغيير كل 2-3 أيام

خصائص النمو : لصق

مورفولوجيا الخلايا الليفية مثل

الخصائص : يمكن أن تنتقل عن 3-5 أجيال

عصارة هضمية : 0.25%

الثقافة شرط : بخار المرحلة : الهواء ، 95 ٪ ؛ CO2，5%

طريقة تجميد الخلايا ؟

طريقة الحفظ بالتبريد : تجميد أنبوب يوضع في 4 ℃ 30 ~ 60 دقيقة ( - 20 ℃ 30 دقيقة * ) - 80 ℃ 16 ~ 18 ساعة ( أو بين عشية وضحاها ) → النيتروجين السائل خزان vaporphase التخزين على المدى الطويل .

طريقة الحفظ بالتبريد 2 : تجميد أنبوب يوضع في برمجة آلة التبريد مع مجموعة من الإجراءات التي يمكن أن تقلل من 1-3 درجة مئوية إلى أقل من 80 درجة مئوية في الدقيقة ، ثم يوضع في خزان النيتروجين السائل vapor المرحلة للتخزين على المدى الطويل . - 20 ℃ لا أكثر من 1 ساعة لمنع بلورات الجليد كبيرة جدا ، مما تسبب في موت الخلايا ، يمكنك تخطي هذه الخطوة مباشرة في الثلاجة - 80 ℃ ، ولكن معدل البقاء على قيد الحياة أقل قليلا .

عمليات التدريب :

1 ) استعادة الخلايا : تجميد أنبوب يحتوي على 1 مل من تعليق الخلية بسرعة يهز و يذوب في حمام مائي في 37 درجة مئوية ، إضافة 4 مل متوسطة الثقافة إلى مزيج متجانس . بعد الطرد المركزي لمدة 4 دقائق في 1000 دورة في الدقيقة ، supernatants تم التخلص منها ، و 1-2ml متوسطة الثقافة أضيفت إلى الخليط ثم تهب بالتساوي . ثم كل تعليق خلية أضيفت إلى قارورة الثقافة بين عشية وضحاها ( أو تعليق خلية أضيفت إلى 10 سم طبق ، حوالي 8 مل متوسطة الثقافة أضيفت إلى الثقافة بين عشية وضحاها ) . تغيير السوائل في اليوم التالي و فحص كثافة الخلية .

2 ) مرور الخلية : إذا كانت كثافة الخلية تصل إلى 80 ٪ - 90 ٪ ، يمكن أن تحمل على مرور الثقافة .

1 - إزالة طاف ، وغسل الخلايا مع برنامج تلفزيوني بدون أيونات الكالسيوم والمغنيسيوم 1-2 مرات .

2 - إضافة 1 مل من السائل الهضمي ( 0.25 في المائة trypsin-0.53mm EDTA ) في الثقافة قارورة ، ووضعها في حاضنة في 37 ℃ لمدة 1-2 دقيقة ، ثم لاحظ تحت المجهر الهضم ، إذا كان معظم الخلايا تصبح مستديرة و تسقط ، بسرعة العودة إلى طاولة العمليات ، اضغط على عدة زجاجات الثقافة ، إضافة كمية صغيرة من وسائل الإعلام لإنهاء عملية الهضم .

3 - الضغط على 6-8ml / زجاجة متوسطة ، برفق فاز وامتصاص ، الطرد المركزي في 1000 دورة في الدقيقة لمدة 4 دقائق ، تجاهل طاف ، إضافة 1-2ml متوسطة ، ثم تهب بالتساوي .

4 - تقسيم تعليق خلية جديدة في طبق أو زجاجة تحتوي على 8 مل متوسطة الثقافة في نسبة 1 : 2 .

3 ) الحفاظ على الخلايا : عندما تكون الخلايا في حالة جيدة من النمو ، يمكن الحفاظ على الخلايا بالتبريد . تحت T25 زجاجة لأنّ صنف ;

1 . عندما الخلايا المجمدة ، بعد التخلص من الثقافة المتوسطة ، برنامج تلفزيوني هو غسلها مرة أخرى ، إضافة 1 مل ، بعد أن تصبح الخلايا مستدير و تقشر ، إضافة 1 مل من المصل تحتوي على الثقافة المتوسطة لإنهاء عملية الهضم ، يمكن استخدام خلايا الدم العد لوحة العد العد .

2.4min 1000rpm الطرد المركزي إزالة طاف . . . . . . . إضافة 1 مل من المصل تعليق الخلايا ، إضافة المصل و دمسو حسب عدد الخلايا ، بلطف ، دمسو التركيز النهائي هو 10 ٪ ، كثافة الخلية لا تقل عن 1 × 106 / مل ، كل تجميد أنبوب تخزين 1 مل من تعليق الخلايا ، وإيلاء الاهتمام إلى تجميد أنبوب جعل علامة .

3 - تجميد تخزين الأنابيب في برنامج التبريد مربع ، في - 80 درجة الثلاجة ، 2 ساعة في وقت لاحق في النيتروجين السائل ملء التخزين . سجل موقع التخزين البارد في المرة القادمة .

تقرير تجريبي

المنتجات المستخدمة في البحث العلمي فقط :

الفصل و الثقافة :

1 - في ظل ظروف معقمة ، الأذين الأنسجة من 1-3d-old الفئران SD تم استخراجها ، ثم تم غسلها مع برنامج تلفزيوني 2 مرات .

2 - إضافة 4 مل من انزيم الهضم ( 0.1 في المائة و 0.1 في المائة كولاجيناز أنا ) إلى الأنسجة كتلة ، تعليق لمدة 10 ثوان ، والهضم في 37 ℃ لمدة 10 دقائق ، ثم ضربة بالقطارة لجعل تعليق خلية واحدة ، هطول الأمطار الطبيعية وجمع طاف ، مع 10 ′ ق وسائل الإعلام إنهاء الهضم بعد 4 ℃ . . . . . . .

3 - إضافة 3-4ml انزيم الهضم حل بقية الأنسجة ، تعليق لمدة 10 ثوان ، هضم في 37 ℃ لمدة 10 دقائق ، ثم جمع supernatants ووضع في 4 ℃ بعد إنهاء عملية الهضم .

4 ، 200 شبكة الفولاذ المقاوم للصدأ الشاشة المستخدمة لتصفية الخلية الهضم السائل ، 1200r / دقيقة الطرد المركزي لمدة 10 دقائق ، تجاهل طاف ، يعجل الخلايا مع 10 £ dmem / F12 متوسطة الثقافة ، تلقيح في 25 سم 2 زجاجة ، وضعت في 37 ℃ ، 5 ٪ من ثاني أكسيد الكربون حاضنة الثقافة .

5 - بعد 1 ساعة من الخلاف ، متوسطة الثقافة امتص و تلقيح في 6-hole لوحة .

ثانيا - تحديد مناعي :

1 . عندما الخلايا العضلية الأذينية تنمو إلى 80 ٪ فيوجن ، الخلايا التي تم غسلها مرتين مع برنامج تلفزيوني في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق ، ثم الخلايا كانت ثابتة لمدة 15 دقيقة مع 4 ٪ polyformaldehyde في درجة حرارة الغرفة .

2 - برنامج تلفزيوني شطف الخلايا مرتين في كل مرة لمدة 10 دقائق ، ثم في 4 ℃ 0.1 ٪ تريتون x-100 غشاء نفاذية لمدة 15 دقيقة .

3 - برنامج تلفزيوني شطف الخلايا مرتين ، كل 10 دقائق ، ثم في درجة حرارة الغرفة مع 4 ٪ جيش صرب البوسنة لمدة 30 دقيقة .

4 ، وفقا لنسبة 1 : 100 تمييع α - أكتين ، ثم وضعها في الثلاجة لمدة 4 ℃ احتضان الخلايا بين عشية وضحاها .

5 - برنامج تلفزيوني شطف الخلايا ثلاث مرات ، كل 10 دقائق ، وفقا لنسبة 1 : 150 تمييع المضادة α - أكتين ، في 37 ℃ لمدة 1 ساعة .

6 - برنامج تلفزيوني شطف 3 مرات في كل مرة لمدة 10 دقائق ، ثم لاحظ الصورة تحت المجهر مضان مقلوب وأخذ الصور .

أنجيوتنسين الثاني الضد

الأجسام المضادة مستقبلات أنجيوتنسين الثاني 1

angiopoietin-1 الضد

angiopoietin مثل البروتين 2 الأجسام المضادة

الإنسان مستقبلات تشيموكيني 5 ccr5 إليسا كيت

الإنسان مستقبلات تشيموكيني 2 ccr2 إليسا كيت

حقوق نسخة تشيموكيني مستقبلات 1 ccr1 إليسا كيت

إليسا عدة حقوق CC Chemokine 7 ( ccl7 / mcp3 / scya6 / scya7 ) .

إليسا عدة حقوق نسخة تشيموكيني 5 ( ccl5 / d17s136e / scya5 ) .

طقم إليسا الماوس انترلوكين 17A ، il-17a إليسا كيت

طقم إليسا الماوس انترلوكين 17B il17b , إليسا كيت

الماوس انترلوكين 17 ج il17c إليسا كيت

طقم إليسا الماوس انترلوكين 17F il17f , إليسا كيت