hek-293 ( 293 ) الخلايا الكلوية الجنينية البشرية

اسم المنتج :hek-293 ( 293 ) الخلايا الكلوية الجنينية البشرية

عدد الخلايا : 1x10 ^ 6 خلايا
حيوية الخلية : 95 ٪ ( حيوية من قبل استبعاد الأزرق تريبان )
الخلية : 1 : 4-1 : 6 ؛ تغيير السوائل 2-3 مرات في الأسبوع
ظروف النمو : بخار المرحلة : الهواء ، 95 ٪ ؛ ثاني أكسيد الكربون درجة الحرارة : 37 درجة مئوية
الكشف عن الخلايا : الخلايا لا تحتوي على فيروس نقص المناعة البشرية - 1 ، الالتهاب الكبدي الوبائي ، سي ، المفطورة ، البكتيريا والخميرة والفطريات
الثقافة : dmem ( نسبة عالية من السكر ) + 10 ٪ سلاح + 1 ٪ ع / ث ؛ 37 ℃ ، 5 ٪ ثاني أكسيد الكربون
طريقة نقل : 1 : 2-1 : 3 اقترح تغيير السوائل مرة واحدة في يومين
حالة الحفظ بالتبريد : المصل خالية من الخلايا
تجميد حالة التخزين : 90 ٪ FBS + 10 ٪ DMSO
تجميد الخلايا : النيتروجين السائل

بعد العلاج

الخلايا المستزرعة في الثقافة زجاجة في حالة جيدة ، ثم ملء مع الثقافة المتوسطة وختم زجاجة الفم هو وسيلة لنقل الخلايا . بعد الحصول على الخلايا مرة أخرى إلى المختبر الخاص بك ، فتح التغليف الخارجي ، واستخدام75 ٪ من الكحول رذاذ زجاجة كاملة بعد التطهير في الترا نظيفة الجدول ، عملية معقمة بدقة，حاضنة ثابتةساعاتملاحظة تحت المجهر : لا أكثرعند 80 ٪ درجة التقارب ، زجاجة متوسطة الثقافةجمع أنبوب الطرد المركزيالانضمام إلى6ml متوسطة الثقافة37الثقافة في ℃ 5 ٪ ثاني أكسيد الكربون حاضنة . إذا كان أكثر من 80 ٪ من درجة انصهار ، ثقافة الخلية خطوة يمكن العثور عليها في عملية محددة .（دفع الانتباه إلى الشحن مختومة زجاجة الثقافة ، ثم وضع في حاضنة الثقافة تذكر أن الثقافة زجاجة غطاء المسمار فضفاضة ، بعد مرور اقترح استخدام زجاجة الأصلي داخل الثقافة المتوسطة ، زجاجة أخرى مع الثقافة الخاصة بها متوسطةو

خطوات التدريب

واحدإحياء الخلاياسوف تحتوي على1 مل خلية تعليق أنبوب المجمدة مذاب بسرعة في 37 ℃ حمام مائي ، إضافة 5 مل متوسطة الثقافة مختلطة بالتساوي . الطرد المركزي في 1000 دورة في الدقيقة لمدة 5 دقائق ، وإزالة طاف ، إضافة4-6ملمتوسطة الثقافة ثم تهب بالتساوي . ثم كل تعليق خلية تضاف إلى الثقافة زجاجة بين عشية وضحاها ( أو تعليق خلية تضاف إلى الثقافة زجاجة بين عشية وضحاها ) .طبق متوسطو، زراعة بين عشية وضحاها . تغيير السوائل في اليوم التالي و فحص كثافة الخلية .

ثانيامرور الخلية: إذا كانت كثافة الخلية تصل إلى80 ٪ - 90 ٪ ، يمكن أن تحمل على ثقافة فرعية .

)أ(وفيما يتعلق adhesivecells مرور يمكن الرجوع إلى الطرق التالية :

1 - إزالة طاف ، وغسل الخلايا مع برنامج تلفزيوني بدون أيونات الكالسيوم والمغنيسيوم 1-2 مرات .

2 - إضافةواحد2 مل من عصير الجهاز الهضمي25 ٪ trypsin-0.53mm EDTA ) تم هضمها في 37 ℃ حاضنة .1-2 دقيقةإذا كان الجزء الأكبر من الخلايا تصبح مستديرة و تسقط ، ثم العودة إلى طاولة العمليات بسرعة ، اضغط على زجاجة الثقافة عدة مرات ثم إضافةفوقيحتويالمصلوسائل الإعلام إنهاء الهضم .

3 . ضربة بلطف على الخلايا ، ثم امتص ، الطرد المركزي في 1000 دورة في الدقيقة لمدة 8-10 دقائق ، تجاهل طاف ، إضافة 1-2ml متوسطة الثقافة ثم تهب بالتساوي .

4 - الصحافة5-6تعليق خلية تم تقسيمها إلى 2 مل / زجاجة من الثقافة المتوسطة .5-6في صحن جديد أو زجاجة من السائل .

bوبالنسبة لتعليقيمكن الرجوع إلى الخلايا التي تمر عبر الطرق التالية :

الطريقة الأولى : جمع الخلايا ،في 1000 دورة في الدقيقة ، الطرد المركزي لمدة 8-10 دقائق ، تخلى عن طاف ، إضافة 1-2ml متوسطة الثقافة ، ثم تهب بشكل موحد ، تقسيم تعليق خلية جديدة في طبق أو زجاجة تحتوي على 8 مل متوسطة الثقافة حسب نسبة 1 : 2 إلى 1 : 5 .

الطريقة الثانية : اختيار نصف طريقة تغيير السائل ، بعد التخلي عن نصف المتوسط ، تعليق الخلايا المتبقيةنسبة 1 : 2 إلى 1 : 3 في طبق جديد أو زجاجة تحتوي على 8 مل من الثقافة المتوسطة .

PS:إذا كان العميل يتلقى2 مل من الخلايا الصغيرة ، بعد تلقي الخلايا ، مع 75 ٪ من الكحول رذاذ أنبوب كامل بعد التطهير ، وضعت في الترا نظيفة أو صندوق مجلس الوزراء ، عملية معقمة بدقة . نقل الخلايا أنبوبي في T25 قارورة أو6طبق بتري5كثافة الخلية يمكن أن ينظر إليه بعد أن وضعت في حاضنة بين عشية وضحاها .80 ٪ في المتوسط ، والحفاظ على الثقافة ، حسب الاقتضاء ، أو بالتبريد . إذا كانت كثافة تتجاوز80 ٪ ، يمكن أن تنتقل مباشرة ( الأسلوب نفسه ) .

ثالثاتجميد الخلايا（ملاحظة : يرجى الرجوع إلى شركتنا للحصول على طريقة تجميد الخلايا خالية من المصل cryopreserved الحل .و

1、الخلايا التي تنمو في قارورة مغطاةفي 80 ٪ من المساحة ، الثقافة المتوسطة في 25cm2 الثقافة زجاجة هو التخلي عن برنامج تلفزيوني يستخدم لغسل الخلايا مرة واحدة .

2、إضافة .0.25 في المائة من الجهاز الهضمي في قارورة الثقافة حوالي 1 مل ، لاحظ تحت المجهر المقلوب ، بعد تراجع الخلايا تتحول الجولة ، إضافة إلى الثقافة المتوسطة لوقف الهضم ، بلطف ضربة الخلايا بحيث تسقط ، ثم نقل إلى تعليق 15 مل أنبوب الطرد المركزي ، الطرد المركزي 1000 دورة في الدقيقة لمدة 5 دقائق .

3、تعليق الخلايا مع كمية مناسبة من تجميد السائل ووضعها في تجميد أنبوب .

4、أولا ، وضع الخلايا المجمدة في- 20 ℃ 1.5h ثم نقلها إلى - 80 ℃ . . . . . . .

hek-293 ( 293 ) الخلايا الكلوية الجنينية البشريةوفيما يلي بعض الخلايا ذات الصلة :