أليسبوت برو : الإنسان il-4 ( ألب ) كشف الإنسان il-4

أليسبوت برو : الإنسان il-4 ( ألب ) كشف الإنسان il-4

مبادئ mabtech elispot التجربة

elispot اختبار يستخدم غشاء PVDF قاعدة 96 لوحة المسام ( القط : msips 4510 ، millipore ) المغلفة مع الأجسام المضادة وحيدة النسيلة محددة ( يتطلب غير سامة ، خالية من الذيفان الداخلي ، تقارب عالية الأجسام المضادة ) للقبض على السيتوكينات التي تفرزها الخلايا .

ثم الخلايا التي سيتم الكشف عنها مستضد المحفزات تضاف إلى حفرة من الثقافة لوحة الثقافة . تحت التحفيز ، الخلايا التائية تفرز السيتوكينات المقابلة في نفس الفترة الزمنية . السيتوكينات ثم يتم التقاطها بواسطة الأجسام المضادة المغلفة على الغشاء .

بعد غسل الخلايا ، القبض على السيتوكينات يمكن أن تكون مرتبطة مع biotin المسمى الأجسام المضادة الثانية ، ثم biotin ملزمة مع انزيم مرتبط اللونية ، مما يجعل من الممكن تشكيل بقع دائرية في جزء من الغشاء ( وبطبيعة الحال ، يمكن أيضا استخدام الأجسام المضادة الفلورسنت المسمى الثاني ، وبالتالي القضاء على المواد الكيميائية اللاحقة طريقة التلوين ، ويمكن الكشف عن العديد من السيتوكينات في وقت واحد ) ، كل بقعة يقابل الخلية التي تفرز السيتوكينات .

نسبة الخلايا الإيجابية يمكن حسابها عن طريق حساب عدد البقع على الغشاء ، ثم مقسوما على عدد الخلايا التي أضيفت إلى المسام .

مابتيكهذه التكنولوجيا لديها ثلاث مزايا رئيسية على النحو التالي :

حساسية عالية . واحد فقط من مليون خلية يفرز السيتوكينات التي يمكن الكشف عنها ، 2-3 أوامر من حجم أعلى من التقليدية إليسا .

ثانيا : مستوى خلية واحدة ، واختبار وظيفة الخلية الحية . elispot مباشرة يحفز الخلايا الحية مع المستضدات ، واختبار وظيفة الخلايا الحية .

ثالثا : عملية بسيطة واقتصادية ، يمكن أن تحمل على تدفق عالية الفرز . elispot ليس لديها عملية معقدة من التوسع في الخلايا في المختبر ، لا تستخدم النظائر المشعة ، وفقا لتوحيد العمليات التجريبية ، مجرب واحد يمكن التعامل مع مئات من العينات في وقت واحد ، وكفاءة أعلى بكثير من غيرها من أساليب الكشف .

أليسبوت برو : الإنسان il-4 ( ألب ) كشف الإنسان il-4

Mabtech : 3420-2apw-2 تشمل :

لوحات مغلفة مسبقا، mAb IL4-I (2 لوحات بيضاء) الكشف mAb: IL4-II، ALP (150 ميكرولتر)

BCIP / NBT-زائد الركيزة (25 مل)

التحكم الإيجابي: مكافحة CD3mAb (CD3-2) (100 ميكرولتر)

الطير