3aav جوفاء قذيفة قيم فصل العمود سيدولس بيا

اليوم ، ونحن ننظر في لماذا اختيار متجانسة العمود هو أفضل من التقليدية مسامية الجسيمات ملء العمود عند الحمض النووي الأمثل .وضع واحد أولا .العديد من النقاط الرئيسية في هذه المقالة هي التي صورت في الرسوم المتحركة . إذا كنت لا ترغب في مشاهدة الرسوم المتحركة ، ثم لا تحتاج إلى قراءة النص التالي ، لأن المادة طويلة جدا ، تستغرق وقتا طويلا وشاقة

= أعمدة مليئة بالحبيبات المسامية وأعمدة متجانسة

المفاهيم الأساسية ونشرها الحراري

نشر ونقل الجماعي في الأوساط المسامية

في الكروماتوغرافي ، والمسافة بين مرحلة ثابتة و المرحلة المحمولة هي صغيرة جدا ، من نانومتر إلى ميكرون ، ولكن هذه المسافة كبيرة جدا في الأوساط المسامية التي تعتمد على نشر طريقة لتحقيق عملية نقل جماعي من الجزيئات البيولوجية . في العمود الكروماتوجرافى مليئة حبيبات مسامية ،نشر هو طريقة المذاب الجزيئات الدخول والخروج من مسام قطرها الجسيمات .（لأن سرعة التدفق داخل الفتحة 0وأكبر جزيء المذاب ، وبطء انتشار ، وانخفاض القدرة على ربط المرحلة ثابتة المسامي .

علاوة على ذلكالتفاعل بين الحمل الحراري ونقل الجماعي ونشر نقل جماعي يمكن أن يؤدي أيضا إلى انخفاض قدرة ملزمةقبل الحمل الحراري يغسل الجزيئات البيولوجية بعيدا ، فإنه يأخذ وقت قصير جدا للانتشار في جزيئات مسامية . أسرع سرعة التدفق ، وأقصر نافذة الوقت ، المذاب قد جرفت من خلال الحمل الحراري قبل أن تنتشر في مسام قطرها الجسيمات ، وبالتالي فإن قدرة ملزمة من الجسيمات سوف تنخفض . انخفاض قدرة ملزمة الكروماتوغرافي الصلبة وسائل الإعلام بسبب انخفاض معامل انتشار الجزيئات الحيوية يمكن أن يعوض عن انخفاض معدل التدفق . في الختام ،في وسط مسامي الحبيبية ، ملزمة قدرة مرحلة ثابتة تتناسب عكسيا مع سرعة التدفق و حجم المذاب .منتدى

إذا كان معدل التدفق هو سريع جدا ، وبطء عملية الانتشار لا يمكن تحقيق التوازن بين تركيز المذاب الجزيئات في مسام القطر و الفراغات بين الجزيئات .

تأثير معدل التدفق على دينامية ملزمة قدرة ثابتة المرحلة المتوسطة . الشكل الأيسر : نشر كفاءة نقل جماعي يتناقص مع زيادة سرعة التدفق ، والقدرة على ربط المسامي يتناقص مع زيادة سرعة التدفق . صحيح الشكل : الحمل الحراري نقل جماعي في عمود واحد ، و قدرة ملزمة الصلبة وسائل الإعلام لا تتأثر سرعة التدفق . ملاحظة : المنحنى هنا يسمى breakthrough المنحنى ، الإحداثي الطولي يشير إلى فقدان البروتين من البروتين الكلي بسبب الحمل الزائد ، الإحداثي السيني يشير إلى تحميل البروتين لكل مل من المصفوفة ( ملغ / مل )

الفرق بين حجم المسام و المساحة الملزمة الصلبة وسائل الإعلام

الجزيئات الكبيرة ، مثل الأحماض النووية ، لديها أعلى قدرة ملزمة في عمود واحد ، وهو نفسمتجانسة العمود يوفر مساحة أكبر ملزمة الجزيئات الحيوية .بالنسبة متجانسة الأعمدة ، كامل مساحة السطح من الأنابيب الداخلية يمكن أن تكون ملزمة من قبل جزيئات المذاب .

في وسط مسامي العمود الكروماتوجرافى ، جزيئات المذاب يمكن الوصول إلى جميع الأسطح الخارجية من الجسيمات دون عائق ، ولكن المساحة الخارجية تمثل فقط 2 ٪ من المساحة الداخلية من حجم المسام من الجسيمات . فقط أكبر حجم المسام يمكن أن تعقد جزيئات المذاب أكبر ، ولكنمن أجل ربط جزيئات المذاب إلى السطح الداخلي من مسام القطر دون قيود ، متوسط حجم المسام من جزيئات المذابأكثر . مسام قطرها أكثر من 100 نانومتر هي نادرة جدا ، لأن مسام قطرها أكثر من العامة يقلل من استقرار الجسيمات .

حجم المذاب و حجم المسام من الجسيمات تؤثر تأثيرا خطيرا على قدرة وسائل الإعلام ملزمة

بلازميد الحمض النووي كثف على سطح المتوسط

لذامن حيث حجم المسام من الجسيمات و الكتلة الملزمة في وحدة المساحة من وسائل الإعلام ،متجانسة العمود هو أكثر ملاءمة macromolecular المذابلأنه يمكن أن توفر أعلى قدرة وسائل الإعلام ملزمة . في حينالجزيئات الصغيرة（بروتيناتومسامي لديه القدرة على ربط أكثر كفاءة .منتدى

الاختلافات في قدرة ملزمة المذاب الجزيئات مع أحجام مختلفة في عمود واحد و مسامي

رقائقي تدفق المضطرب في عمود واحد و في الأوساط المساميةبسبب وجود قوة الاحتكاك ، سرعة تدفق الصفحي هو 0 ، وأسرع سرعة تدفق الصفحي هو بعيدا عن السطح ، مما يؤدي إلى تشتت الصفحي .

التشتت هو عدو القرار الكروماتوغرافيمنتدىهناك فقط ضعف تدفق الصفحي تشتت، مما يجعل من جزيئات المذاب من جميع الأحجام ، في مختلف السرعات ،القرار اللوني جيدةعلى العكستشتت في الأوساط المسامية أكثر وأكثر خطورة .الرئيسيةبما في ذلك انخفاض كفاءة نشر دوامة التشتتمنتدىكما يزيد من سرعة التدفق ، المذاب يزيد ببطء ، و مجموع التشتت يصبح أكثر خطورة .انخفاض القرارمنتدى

وسائل الإعلام المختلفة ، سرعات مختلفة ، مما تسبب في أنواع مختلفة من التشتت ، مما يؤثر على القرار الكروماتوغرافي .القرار لا تتأثر جزيئات المذاب و سرعة التدفق .

الدوامة الحالية قوة القص الناتجة عن إزالة الجسيمات المسامية

ملخص

بالمقارنة مع التقليدية المسامي ، متجانسة العمود هو مرحلة ثابتة من الجيل الرابع اللوني ، والتي لديها مزايا خاصة في سرعة فصل وتنقية الجزيئات الحيوية . ارتفاع القرار بغض النظر عن حجم المذاب و سرعة السائل . لا فتحة بئر يحدّ , واسعة يستطيع كنت ضمّنت مع سطح ; ضعف قوة القص . الحصول على جودة عالية ، عالية النقاء بلازميد الحمض النووي الريبي جزيئات الحمض النووي أو لقاح الحمض النووي الريبي هو مصدر مهم من مصادر التكنولوجيا . نظراً لكثرة الكتلة والقطر ، تطوير عملية تنقية الحمض النووي البلازميد أو الحمض النووي الريبي هو خيار جيد جداً عندما يتعلق الأمر إلى أعمدة متجانسة مع أداء أفضل .