مراقبة إيجابية اختبار السمية في المختبر

جسممراقبة إيجابية اختبار السمية الخارجيةمن .معهد أبحاث هاتانو (HRI)إنتاج البحوث，وقد استخدم على نطاق واسع في اختبار السمية في المختبر .-طرق اختبار السميةالايزو 10993و .YBB 00012003اختبار السمية .

مراقبة إيجابية اختبار السمية في المختبرتم استخراج الثقافة التقليدية المتوسطة . طرق استخراج هي كما يلي : عملية معقمة1 غراممراقبة إيجابية اختبار السمية في المختبروضع15 ملالعقيم أنابيب الطرد المركزي ، وفقا3 مل / غنض نض نسبة متوسطة الثقافة ، وضع أفقي التذبذب ،120 دورة في الدقيقة，37استخراج في درجة مئوية24 ساعةتخلط جيدا رأسا على عقب بعد استخراج .10استخراج السائل المستخدمة في الاختبار . الثقافة المتوسطة المستخدمة في استخراج فارغة السيطرة . الانتباه إلى إعداد وسائل الإعلام في4في ℃ لا يمكن تخزينها لأكثر من أسبوعين . اختبار السمية في المختبرMTTطريقة الاختبار : في حالة جيدةL929الخلية ، الهضم الطرد المركزي ، إعداد تعليق خلية96ثقب لوحة الثقافة . كل مجموعة يتم توفيرها مع عدد وافر من مجمع الثقوب .100µLتعليق خلية37℃、5%ثاني أكسيد الكربونثاني أكسيد الكربونحاضنة الثقافة24 ساعةالتخلي عن الثقافة المتوسطة ، إضافة100µLاستخراج السائل ، السائل التحكم فارغةثاني أكسيد الكربونحاضنة مستمرة .24 ساعةمورفولوجيا الخلايا لوحظ تحت المجهر . التخلص من السائل في حفرة ، إضافة إلى كل حفرة50μL1mg / ملعقيمMTTالحل )MTTمستعملميمالثقافة المتوسطة التكوين ، التكوين الحالي ، لا يمكن أن تكون مختلطة مع الثقافة المتوسطةساعتينبعد التخلص من السائل في حفرة ، إضافة100µLالآيزوبروبيل الكحول ، تتأرجح الاختلاط570 نانومترو .650 نانومترالامتصاصية في الطول الموجي و معدل البقاء على قيد الحياة من الخلايا تم حسابها .

اختبار السمية هي واحدة من أهم المؤشرات في نظام تقييم المواد البيولوجية ، والتي يمكن استخدامها لتقييم السمية المحتملة من المواد البيولوجية والأجهزة الطبية أو مقتطفات من ثقافة الخلية في المختبر . اختبار السمية يمكن اختبار تأثير المواد البيولوجية على وظيفة التمثيل الغذائي للخلايا في وقت قصير ، ويمكن بسرعة فحص ما إذا كانت المواد السمية المحتملة .

cytotoxicity الاختبار هو وسيلة للكشف عن سمية المواد البيولوجية ، التي لديها مزايا البساطة ، حساسية عالية ، منخفضة التكلفة ، قصيرة فترة الاختبار ، وما إلى ذلك ، وتستخدم على نطاق واسع في المواد البيولوجية والأجهزة الطبية والمنتجات مع الحياة اختبار وتقييم الأسلوب . طرق تقييم المواد البيولوجية السمسة وضعت من مراقبة التغيرات المورفولوجية والكمية من الخلايا إلى تقييم التصاق الخلايا ، انتشار ، والتمثيل الغذائي ، وما إلى ذلك ، مع عدد من الخلايا النشطة وتكاثر الخلايا القدرة على تقييم المواد البيولوجية مع الحياة من الخلايا . اختبارات محددة تشمل محايدة امتصاص الأحمر اختبار ، اختبار تشكيل مستعمرةMTTاختبار السميةXTTاختبار السمية ، الخ .MTTو .XTTطريقة اختبار السمية هو أكثر قبولا على نطاق واسع ، ويستخدم على نطاق واسع ، لأنه يمكن تحديد كمي السمسة من المواد .

MTTو .XTTمبدأ اختبار السمية هو أن سكسينات ديهيدروجيناز في الميتوكوندريا من الخلايا الحيةMTTالحد من المياه غير قابلة للذوبان الأزرق البنفسجي كريستاليزاتور(فورمازان)وترسب في الخلايا ، الخلايا الميتة لا تملك هذه الوظيفة . دي متيل سولفوكسيد(DMSO)البروبانول أو phenazine كبريتات الميثيل(PMS)بلورة الخلايا القابلة للذوبان في الميثيلين .570 نانومترقيمة امتصاص الضوء في الطول الموجي هو قياس كمية بلورة تتناسب طرديا مع عدد الخلايا في مجموعة معينة من الخلايا . على أساس قياس قيمة الامتصاصية(OD)القيمةو، لتحديد عدد الخلايا الحية ،ODأعلى قيمة ، أقوى نشاط الخلية ، وأقل سمية . من خلال حساب معدل انتشار الخلايا ، السمية من المواد الطبية ومنتجاتها يمكن تقييمها كميا . بقاء الخلية يمكن حسابها من خلال تخفيف تركيز مختلفة من مقتطفات .IC50(تثبيط نشاط الخلايا50تركيزوتقييم السمية من المواد البيولوجية ومنتجاتها .

مراقبة إيجابية اختبار السمية في المختبرفائدة نموذج يحتوي على مزايا جيدة دفعة التكرار ، والأداء مستقرة ، مواصفات غنية الحجم ، ويمكن استخدامها بوصفها أداة التقييم البيولوجي للأجهزة الطبية .-مادة مثالية لتحديد السمية .