مرحبا بكم العميل!

العضوية

مساعدة

Thermo Fisher Scientific consumables for chromatography
مصنع مخصص

المنتجات الرئيسية:

instrumentb2bصمقالة

Thermo Fisher Scientific consumables for chromatography

  • البريد الإلكتروني

    zoe.wang2@thermofisher.com

  • الهاتف

    18516780105

  • العنوان

    طريق شينجينكياو، رقم 27، المبنى 6

اتصل الآن
تحديد α - lactoglobulin و β - lactoglobulin في الحليب ومنتجاته
التاريخ:2025-05-27اقرأ:0

مقدمة



الحليب الخام غنية في مجموعة متنوعة من البروتينات الطبيعية النشطة ، مثل α - lactoglobulin ( α - lactoglobulin ) ، β - lactoglobulin ( لو ) ، الغلوبولين المناعي ز ( IgG ) و lactoperoxidase ( ليرة لبنانية ) ، وهلم جرا . هذه البروتينات الطبيعية النشطة في مقاومة البكتيريا والفيروسات الغزو ، وتعزيز مناعة الأنسجة تلعب دورا هاما في تعزيز النمو والتنمية . من بينها ، α - لاكتوباسيلوز المضادة للسرطان ، المضادة للبكتيريا ، ومكافحة الفيروسات ، وتنظيم وظيفة المناعة ، وتعزيز إنتاج اللاكتوز و إفراز الحليب . لاكتوغلوبين بيتا قد خفض الكوليسترول في الدم ، المضادة للأكسدة ، الأنشطة المضادة للفيروسات ، وتعزيز الهضم وامتصاص الدهون للذوبان الفيتامينات . مختلف أساليب المعالجة الحرارية ( البسترة ، درجة حرارة عالية جدا ( المعقم ) التعقيم ، التبخر والتركيز ، التجفيف بالرش ، وما إلى ذلك ) يمكن أن يؤدي إلى درجة مختلفة من التشويه والتحريف وتعطيل ألفا وبيتا لاكتوغلوبين في منتجات الألبان ، مما يؤثر على القيمة الغذائية و سعر السوق .



سيميرفيلد خط جديد العطاء بقعة مشرقة


1.محتوى α - lactoglobulin و β - lactoglobulin في الحليب المبستر ، الحليب المعقم و حليب الرضع مصممة على أساس ني / تي 4630-2025 والمعايير ذات الصلة .نيويورك / تي 4630-2025 سيتم تنفيذها في 1 أيار / مايو 2025منتدى

2. م حجم الجسيمات الصلبة الأساسية accucore 150 C4 العمود الكروماتوجرافى ، جنبا إلى جنب مع انخفاض معدل التدفق )0.8 مل / دقيقةحجم حقن أصغر )10 ميكرولترتردد أخذ العينات العالي )10 هرتزذروة الشكل والعزلة α - lactoglobulin و β - lactoglobulin كلها بسبب المعايير .

3. من أجل الحصول على شكل ذروة جيدة و درجة الانفصال ، والمعالجة المسبقة ، اللوني السائل تم تحسين ظروف مناسبة ، في درجة حرارة 60 ℃ و سرعة التدفق 0.8 مل / دقيقة ، 0.1 في المائة trifluoroacetic حمض المياه - 0.1 في المائة trifluoroacetic الأسيتونيتريل استخدمت المرحلة المحمول عملية الاستخراج الانحدار .110 بارمنتدى

4. النتائج التجريبية تبين أن α - lactoglobulin و β - lactoglobulin الكروماتوغرافي شكل ذروة جيدة ، العمود عالية الكفاءة ، والعزلة ممتازة .فصل الرئيسية بالقرب من ذروة ذروة التدخلα - lactoglobulin و β - lactoglobulin مختلطة حل القياسية ( 100 ميكروغرام / مل ) ، α - lactoglobulin الاحتفاظ الوقت 21.900 دقيقة ، غير المتماثلة عامل 0.98 ، نظرية صينية عدد 321137 ; الوقت الاحتفاظ β - lactoglobulin ب 24.747 دقيقة ، غير المتماثلة عامل 1.01 ونظرية صينية عدد 352451 ; الوقت الاحتفاظ β - لاكتوغلوبين كان 25.467 دقيقة ، غير المتماثلة عامل 1.00 ونظرية صينية عدد 373359 ; عزل α - lactoglobulin ب و β - lactoglobulin ب 17.77 ، وفصل β - lactoglobulin ب و β - lactoglobulin أ 4-33 . RSD الاحتفاظ الوقت و منطقة الذروة كانت أقل من 0.3 في المائة بعد أربع مرات متتالية من الحقن . مجموعة خطية من 0.00-200 ميكروغرام / مل ، معامل الارتباط الخطي ص2مجموعة خطية من β - لاكتوغلوبين حل القياسية 0.00-200 ميكروغرام / مل ، معامل الارتباط الخطي ص2أكثر من 0.9991 ، الخطي جيدة .

5. في هذه الورقة ، طريقة HPLC لتحديد α - lactoglobulin و β - lactoglobulin في منتجات الألبان .أكوكور 150 C4كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء جنبا إلى جنب مع نظام vanquish الأساسية أظهرت استنساخ جيدة وممتازة الاستقرار .

6.في هذه الورقة ، اثنين من الأساليب المستخدمة في تركيبة مع هلام تخلل كروماتوجرافيا لتحديدMAbPac SEC-1 (300 أ، 5 ميكروم، 7.8 × 300 مم)α - lactoglobulin و β - lactoglobulin يمكن فصلها بشكل فعال في 280 نانومتر .



تنزلق إلى أسفل لعرض جميع المحتويات



نيويورك / تي 4630-2025

سيميرفيلد تطبيق الحل الكامل


01

عينة المعالجة

1-1 عينة السائل : انخفاض درجة حرارة الحليب ( الحليب الخام ، الحليب المبستر ) / درجة حرارة الغرفة الحليب ( درجة حرارة عالية جدا الحليب المعقم )

وزن العينة 5 ز ( 0.1 مغ ) في 50 مل من أنبوب الطرد المركزي مع مقياس تغطية دوامة ، إضافة كمية مناسبة من الماء إلى دوامة خلط 30 ثانية ، مع كمية مناسبة من حمض الخليك لضبط درجة الحموضة 4.60 ± 0.05 ، حجم المياه إلى 25 مل ، دوامة خلط 1 دقيقة ، لا يزال أكثر من 30 دقيقة ، 12000 دورة في الدقيقة 4 ℃ الطرد المركزي لمدة 15 دقيقة . supernatants ( يمكن أن تضعف مع المياه النقية جدا ، حسب الاقتضاء ) ، 0.2 ميكرون ماء السليكوون الأغشية microporous ( ع / ن : 42213-npl ) تم اختبارها .

1-2 العينات الصلبة : مسحوق الحليب ( حليب الرضع )

عينة 2 ز ( دقيقة 0.1 ملغ ) في 50 مل من أنبوب الطرد المركزي مع مقياس دوامة غطاء ، إضافة كمية مناسبة من المياه دوامة خلط لمدة 1 دقيقة إلى حل كامل ( حمام دافئ إذا لزم الأمر ) ، مع كمية مناسبة من حمض الخليك تعديل الرقم الهيدروجيني من 4.60 ± 0.05 ، حجم ثابت من الماء إلى 25 مل ، دوامة خلط 1 دقيقة ، لا يزال أكثر من 30 دقيقة ، 12 ، 000 دورة في الدقيقة 4 ℃ الطرد المركزي لمدة 15 دقيقة . supernatants ( يمكن أن تضعف مع المياه النقية جدا ، حسب الاقتضاء ) ، 0.2 ميكرون ماء السليكوون الأغشية microporous ( ع / ن : 42213-npl ) تم اختبارها .



تنزلق إلى أسفل لعرض جميع المحتويات

02

أداة التكوين اللوني

Thermo Scientific ™ Vanquish Core ™ كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء نظام التكوين : مضخة quaternary pump c ( vc-p20-a ) ، التلقائي حاقن عينة سبليت CT ( vc-a12-a ) ، column compartment c ( vc-c10-a ) ، كاشف مجموعة ديود م ( vc-d11-a ) ، ومعالجة البيانات ™ 7-3

العمود : accucore 150 C4 ، 2.6 ميكرومتر ، 4.6 × 150 ملم ( ع / ن : 16526-154630 ) .

المرحلة المحمول : 0.1 في المائة trifluoroacetic حمض المياه ب : 0.1 في المائة trifluoroacetic حمض الأسيتونيتريل

سرعة التدفق0.8مل / دقيقة

عملية الاستخراج الانحدار

图片

كمية العينة :10ميكرولتر

درجة حرارة العمود : 60 درجة مئوية

الكاشف : مديرية إدارة السجون ، الطول الموجي اقتناء : 210 نانومتر ؛ اقتناء التردد :10هرتز ، الطيف جمع : 190-400 نانومتر



تنزلق إلى أسفل لعرض جميع المحتويات

03

الأطياف والبيانات

الجدول 3-1 فصل أطياف والبيانات من حل القياسية المختلطة

图片

الشكل 1 فصل أطياف والبيانات من خليط من α - lactoglobulin و β - lactoglobulin ( 100 ميكروغرام / مل )( انقر على عرض الصورة الكبيرة )

كما هو مبين في الشكل 1 ، α - lactoglobulin و β - lactoglobulin الكروماتوغرافي شكل ذروة جيدة ، العمود كفاءة ممتازة ، وفصل أفضل من المعيار . وقت الاحتفاظ α - بروتين الحليب كان 21.900 دقيقة ، غير المتماثلة عامل 0.98 ونظرية صينية عدد 321137 ; الوقت الاحتفاظ β - lactoglobulin ب 24.747 دقيقة ، غير المتماثلة عامل 1.01 ونظرية صينية عدد 352451 ; الوقت الاحتفاظ β - لاكتوغلوبين كان 25.467 دقيقة ، غير المتماثلة عامل 1.00 ونظرية صينية عدد 373359 . . . . . . . عزل α - lactoglobulin ب و β - lactoglobulin ب 17.77 و β - lactoglobulin ب 4-33 .


الشكل 3-2 تراكب أطياف ألفا وبيتا lactoglobulin واحد حل القياسية

图片

الشكل 2 تراكب أطياف ألفا وبيتا lactoglobulin واحد حل القياسية

كما هو مبين في الشكل 2 ، α - lactoglobulin ، β - lactoglobulin ب و β - lactoglobulin أ تتميز امتصاص في 200 نانومتر و 279 نانومتر .


الشكل 3-3 عينة المستمر تراكب أطياف مختلطة حل القياسية

图片

الشكل 3 تراكب أطياف α - lactoglobulin و β - lactoglobulin مختلطة حل القياسية ( 100 ميكروغرام / مل ، ن = 4 ) ( انقر على الصورة الكبيرة )

إن تحديد وضع اللاجئ من α - lactoglobulin و β - lactoglobulin مختلطة حل القياسية ( 100 ميكروغرام / مل ) تم حقنها أربع مرات متتالية مع الاحتفاظ الوقت و منطقة الذروة أقل من 0.3 في المائة .


الشكل 3-4 تراكب منحنيات المعايرة من حل القياسية

图片

الشكل 4 تراكب منحنى المعايرة α - lactoglobulin و β - lactoglobulin ( 0.00 / 40 / 80 / 120 / 160 / 200 ميكروغرام / مل ) ( انقر على الصورة الكبيرة ) .

الحليب الخام ، الحليب المبستر ، α - lactoglobulin و β - lactoglobulin المحتوى عادة ما تكون عالية ، وبالتالي اختيار تي / tdia 002-2021 و تي / tdia 007-2019 أوصت مجموعة خطية . كما هو مبين في الشكل 4 ، مجموعة خطية من 0.00-200 ميكروغرام / مل ، معامل الارتباط الخطي ص2مجموعة خطية من β - لاكتوغلوبين حل القياسية 0.00-200 ميكروغرام / مل ، معامل الارتباط الخطي ص2أكثر من 0.9991 ، الخطي جيدة . β - lactoglobulin ب و β - lactoglobulin أ كميا في مجمع المجموعة .


الشكل 3-5 تراكب أطياف α - lactoglobulin و β - lactoglobulin الحلول القياسية ( 40 ميكروغرام / مل ) مع حلول فارغة

图片

الشكل 5 تراكب أطياف α - lactoglobulin و β - lactoglobulin الحلول القياسية ( 40 ميكروغرام / مل ) مع حلول فارغة

عندما حقن حجم 10 ش ل ، ذروة ارتفاع α - lactoglobulin و β - lactoglobulin ( 40 ميكروغرام / مل ) ق ، متوسط الضوضاء مصفوفة 22.5-24.0 دقيقة ن ، نسبة الإشارة إلى الضوضاء من α - lactoglobulin ، β - lactoglobulin ب و β - lactoglobulin أ 523.3 139.9 , و 133.6 ، على التوالي ، كما هو مبين في الشكل 5 . حساسية α - lactoglobulin و β - lactoglobulin يمكن أن تلبي متطلبات 1.00 ميكروغرام / مل في ني / تي 4630-2025 . . . . . . .


الشكل 3-6 تراكب أطياف ألفا وبيتا lactoglobulin مختلطة مع الحليب المبستر حل القياسية

图片

الشكل 6 تراكب أطياف α - lactoglobulin و β - lactoglobulin مختلطة مع الحليب المبستر

وبالإضافة إلى بروتين مصل اللبن ، الحليب يحتوي أيضا على كمية كبيرة من الكازين وغيرها من البروتينات التي قد تتداخل مع تحديد بعد المعالجة من الحليب المبستر ، مثل تعديل درجة الحموضة ، سرعة عالية الطرد المركزي ، وما إلى ذلك ، غير متحولة ألفا وبيتا لاكتوگلوبولين تم الاحتفاظ بها في supernatants . وقد فصل أفضل نمط الذروة ، خط الأساس مستقرة ، لا تدخل في ذروة الخروج ، كما هو مبين في الشكل 6 . محتوى α - lactoglobulin 1033.6 مغ / كغ و β - lactoglobulin 2949.0 مغ / كغ في الحليب المبستر عينات تحددها المعايير الخارجية .


الجدول 3-7 فصل أطياف والبيانات من الحليب المبستر ( درجة حرارة منخفضة ) ، الحليب المعقم ( درجة حرارة عالية جدا الحليب الدافئ ) و حليب الرضع

图片

الشكل 7 فصل أطياف والبيانات من الحليب المبستر

( انقر على عرض الصورة الكبيرة )

图片

الشكل 8 فصل أطياف والبيانات من الحليب المعقم

( انقر على عرض الصورة الكبيرة )

图片

الشكل 9 فصل الطيف والبيانات من مسحوق حليب الرضع

( انقر على عرض الصورة الكبيرة )

انزلاق عرض المزيد

lactoglobulin ألفا وبيتا lactoglobulin حساسة للحرارة ، وارتفاع درجة الحرارة يمكن أن تدمر البنية الكيميائية والبيولوجية النشاط . كما هو مبين في الشكل 7-9 ، ليس هناك اضطراب واضح قمم α - lactoglobulin و β - lactoglobulin في الحليب المبستر ( انخفاض درجة حرارة الحليب ) . ومع ذلك ، هناك اضطراب واضح الذروة بالقرب من الهدف ذروة β - لاكتوغلوبين في درجة حرارة عالية جدا الحليب المعقم ( الحليب الدافئ ) و حليب الأطفال ، والتي سوف تؤثر بشكل خطير على النتائج النوعية والكمية ، α - لاكتوغلوبين تتأثر قليلا نسبيا .


الشكل 3-8 هلام تخلل كروماتوجرافيا ألفا وبيتا lactoglobulin حل القياسية ( الطريقة الثانية )

图片

الشكل 10 هلام تخلل كروماتوجرافيا ألفا وبيتا لاكتوغلوبين حل القياسية ( 500 ملغ / لتر )

في إشارة إلى المادة التي نشرت في مجلة صناعة الألبان الصينية من قبل المعلم دو ruruyun ، حجم الاستبعاد اللوني ( 2022 ) لتحديد α - الحليب بروتين الحليب في الحليب ، ومسحوق الحليب ، ومسحوق مصل الحليب ( 2022 ) ، واثنين من mabppacsec-1 ( 300 درجة ، 5 μ m ، 5.8 × 300 ملم ، 7.8 × 300 ملم ) حجم الاستبالاستبعاد اللوني العمود في سلسلة متصلة ، 6-m الجوانيدين هيدروكلوريد تستخدم مرحلة الجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجوانيدين 6 ، 6-m حمض الهيدروكلوريك المرحلة المحمول ، 6-6-m الجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجواالجوالا , لا , لا

مواصفات mabpac sec-1 العمود الكروماتوجرافى7-8 × 300mm, معدل التدفق الموصى به هو 0.5 مل / دقيقة ، وتوفير المذيبات مع ضمان فصل درجة .4.0 × 300واقترح أن يكون معدل تدفق 0.2 مل / دقيقة ( يمكن تعديلها حسب الاقتضاء ) .

04

ني / تي 4630-2025 الكروماتوغرافي الاستهلاكية ذات الصلة الموصى بها

4-1 أول طريقة عكس المرحلة اللوني السائل العمود و العمود الواقية

Accucore 150 C4 ، 2.6 ميكروم ، 4.6 × 150 مم

(رقم البريد: 16526-154630)

Accucore 150 C4 حماية العمود الأساسية ، 2.6 ميكرومتر ، 4 × 10 ملم ، 4 PK

(رقم البريد: 16526-014005)

uniguard مباشرة نوع العمود كم واقية

(P/N: 850-00)

هلام تخلل كروماتوجرافيا العمود الثاني وحماية العمود

سرعة التدفق0.5مل / دقيقة

保护柱: MAbPac SEC-1، 5 ميكروم، 300 أ، 4.0 × 50 مم

(رقم البريد: 074697)

分析柱: MAbPac SEC-1، 5 ميكروم، 300 أ، 7.8 × 300 مم

(رقم البريد: 088460)

分析柱: MAbPac SEC-1، 5 ميكروم، 300 أ، 7.8 × 300 مم

(رقم البريد: 088460)

سرعة التدفق0.2مل / دقيقة

保护柱: MAbPac SEC-1، 5 ميكروم، 300 أ، 4.0 × 50 مم

(رقم البريد: 074697)

分析柱: MAbPac SEC-1، 5 ميكروم، 300 أ، 4.0 × 300 مم

(رقم البريد: 074696)

分析柱: MAbPac SEC-1، 5 ميكروم، 300 أ، 4.0 × 300 مم

(رقم البريد: 074696)

4-3 عينة المعالجة

تيتان 3 ماء السليكوون إبرة فلتر ، 17 ملم ، 0.2 ميكرون ، 200 / PK

(النص: 42213-NPL)



تنزلق إلى أسفل لعرض جميع المحتويات

05

المراجع

[ 1 ] ني / تي 4630-2025 الحليب ومنتجاته -- تحديد α - lactoglobulin و β - lactoglobulin عالية الأداء اللوني السائل

[ 2 ] تي / tdstia 026-2022 حليب الرضع مسحوق الحليب في تحديد ألفا وبيتا لاكتوغلوبين - هلام اللوني تخلل

[ 3 ] تي / tdstia 002-2021 الحليب ومنتجات الألبان في تحديد بروتين الحليب عالية الأداء اللوني السائل

[ 4 ] تي / csiq 77001-2020 منتجات الألبان في تحديد محتوى بروتين الحليب عالية الأداء اللوني السائل

تحديد β - lactoglobulin في الحليب ومنتجات الألبان من هبلك

[ 6 ] ر / shnx 001-2025 الحليب الخام في تحديد اللاكتوفرين ، α - lactoglobulin ، β - lactoglobulin السائل اللوني وبالترادف مطياف الكتلة

دو رو يون ، وانغ ليانغ ، لين يي كان . تحديد alpha-lactoprotein في الحليب ، ومسحوق الحليب ومسحوق مصل اللبن من حجم الاستبعاد اللوني [ ي ] . صناعة الألبان في الصين ، 2022 , 50 ( 04 ) : 46-51 .