-
البريد الإلكتروني
zoe.wang2@thermofisher.com
-
الهاتف
18516780105
-
العنوان
طريق شينجينكياو، رقم 27، المبنى 6
Thermo Fisher Scientific consumables for chromatography
تحديد المنتج في الغذاء جيجابايت 5009.299-2024
التاريخ:2025-05-27اقرأ:0
الحليب الخام غنية في مجموعة متنوعة من البروتينات الطبيعية النشطة ، مثل α - lactoglobulin ( α - lactoglobulin ) ، β - lactoglobulin ( لو ) ، الغلوبولين المناعي ز ( IgG ) و lactoperoxidase ( ليرة لبنانية ) ، وهلم جرا . هذه البروتينات الطبيعية النشطة في مقاومة البكتيريا والفيروسات الغزو ، وتعزيز مناعة الأنسجة تلعب دورا هاما في تعزيز النمو والتنمية . المنتج يمكن أن تشارك في استقلاب الحديد في الجسم الحي ، وتعزيز امتصاص ونقل الحديد في الجسم الحي ، ولها وظائف مضادة للجراثيم ، المضادة للالتهابات ، المضادة للأكسدة ، انتيتومور ، وتعزيز الحصانة . مختلف أساليب المعالجة الحرارية ( البسترة ، وارتفاع درجة حرارة التعقيم ، التبخر والتركيز ، التجفيف بالرش ، وما إلى ذلك ) يمكن أن يؤدي إلى درجة مختلفة من التشويه والتحريف وتعطيل المنتج في منتجات الألبان ، مما يؤثر على القيمة الغذائية و سعر السوق .
saimerfei المعيار الوطني الجديد خطة الاستجابة بقعة مشرقة
1. مع الإشارة إلى جيجابايت 5009.299-2024 ، نيويورك / تي 4439-2023 والمعايير ذات الصلة ، فإن هذه الورقة تحدد محتوى اللاكتوفيرين في الحليب المبستر ، الحليب المعقم و حليب الرضع .
2. من أجل الحصول على شكل ذروة جيدة و درجة الانفصال ، ظروف المعالجة و اللوني السائل الأمثل .0.1 في المائة trifluoroacetic حامض المياه - 0.1 في المائة trifluoroacetic حامض الأسيتونيتريلأقصى قدر من الضغط لا يتجاوز 106 بار في عملية الاستخراج الانحدار .
3. النتائج التجريبية تبين أن المنتج حل القياسية ( 50 ميكروغرام / مل ) مع عدم تناسق عامل 1.00 ، شكل ذروة جيدة ، لوحة رقم 30549 ، العمود ممتازة الكفاءة . RSD الاحتفاظ الوقت و منطقة الذروة كانت أقل من 1 ٪ بعد ثلاث مرات متتالية من الحقن . خطي منخفض ( 1.00 ميكروغرام / مل ) إشارة إلى نسبة الضوضاء ( الأب ) هو 8-2 ، طريقة حساسية عالية ؛ مجموعة خطية 1.00-200 ميكروغرام / مل ، معامل الارتباط الخطي ص2أكثر من 0.9998 ، الخطي جيدة .
4. في اختبار تحديد محتوى اللاكتوفيرين في منتجات الألبان من قبل عكس المرحلة اللوني السائل ، biobasic 4 العمود الكروماتوجرافى ( حجم المسام 300 Å ) جنبا إلى جنب مع نظام vanquish الأساسية عالية الأداء اللوني السائل أظهرت استنساخ جيدة وممتازة الاستقرار .
تنزلق إلى أسفل لعرض جميع المحتويات
جيجا بايت 5009.299-2024
سيميرفيلد تطبيق الحل الكامل
عينة المعالجة
1-1 استخراج العينات
1-1-1عينة السائل : انخفاض درجة حرارة الحليب ( الحليب الخام ، الحليب المبستر ) / درجة حرارة الغرفة الحليب ( المعقم )
عينة من 5 ز ( 0.1 مغ ) كان وزنه في 50 مل الطرد المركزي أنبوب حلزوني مع غطاء ، حجم ثابت من الفوسفات العازلة Ⅱ 25 مل ، دوامة التذبذب استخراج 3 دقائق ، الطرد المركزي في 12000 دورة في الدقيقة 4 ℃ لمدة 15 دقيقة . يقف في درجة حرارة الغرفة ، وإزالة الطبقة العليا من الدهون العائمة ، تأخذ طاف لتنقية .
1-1-2عينة صلبة : مسحوق الحليب ( حليب الرضع )
2 ز ( 0.1 مغ ) من العينة التي تم الحصول عليها في 50 مل الطرد المركزي أنبوب حلزوني مع غطاء ، إضافة كمية مناسبة من الفوسفات عازلة Ⅱ حل في درجة حرارة عالية الاهتزاز ، حل العازلة Ⅱ الفوسفات في حجم ثابت إلى 50 مل ، دوامة الاهتزاز استخراج 3 دقائق ، لا يزال أكثر من 30 دقيقة ، الطرد المركزي 12000 دورة في الدقيقة 4 ℃ لمدة 15 دقيقة . يقف في درجة حرارة الغرفة ، وإزالة الطبقة العليا من الدهون العائمة ، تأخذ طاف لتنقية .
تنزلق إلى أسفل لعرض جميع المحتويات
1-2 تنقية العينة
1-2-1تفعيل : انخفاض نهاية الهيبارين تقارب العمود ( ع / ن : 60105-110-b ) متصلا الصلبة مرحلة الاستخراج ( SPE ) ، في نهاية العلوي من الهيبارين تقارب العمود ( ع / ن : 60104-259 ) في سلسلة متصلة بواسطة محول ( ع / ن : 60104-259 ) 10 مل حقنة اسطوانة فارغة ، إضافة 2 × 5 مل الفوسفات العازلة Ⅱ تفعيل الهيبارين تقارب ، والسيطرة على معدل نازف 2D / 3S .
1-2-2العينة : عندما يكون مستوى السائل في تفعيل خطوة تقترب من عمود صغير لوحة غربال ، 10 مل من العينة المذكورة أعلاه يتم نقلها إلى حقنة فارغة اسطوانة ( ع / ن : s7510-10 ) و سرعة قطرات تسيطر عليها 2D / 3S .
1-2-3نض : عندما يكون مستوى السائل من العينة تقترب من لوحة غربال ، إضافة 2 × 5 مل الفوسفات العازلة Ⅱ ليش العمود ، والتخلص من تدفق السائل ، إزالة محول حقنة اسطوانة فارغة ، وتجفيف العمود تحت ضغط سلبي لمدة 2 دقيقة .
1-2-4eluent : 2 × 2.5 مل الفوسفات العازلة Ⅰ أضيفت إلى eluent . جميع eluent تم جمعها ، و حجم ثابت من الفوسفات العازلة Ⅰ كان 5 مل و 0.2 μ م ماء السليكوون إبرة فلتر ( ع / ن : 42213-npl ) . الترشيح كان اختبار على الجهاز .
تنزلق إلى أسفل لعرض جميع المحتويات
أداة التكوين اللوني
Thermo Scientific ™ Vanquish Core ™ كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء نظام التكوين : مضخة quaternary pump c ( vc-p20-a ) ، التلقائي حاقن عينة سبليت CT ( vc-a12-a ) ، column compartment c ( vc-c10-a ) ، كاشف مجموعة ديود م ( vc-d11-a ) ، ومعالجة البيانات ™ 7-3
العمود : biobasic 4 ، 5 ميكرومتر ، 4.6 × 250 ملم ( ع / ن : 72305-254630 ) .
المرحلة المحمول : 0.1 في المائة trifluoroacetic حمض المياه ب : 0.1 في المائة trifluoroacetic حمض الأسيتونيتريل
سرعة التدفق : 1 مل / دقيقة
عملية الاستخراج الانحدار
كمية العينة : 50 ميكروغرام لتر
درجة حرارة العمود : 30 درجة مئوية
كاشف : مديرية إدارة السجون ، الطول الموجي : 280 نانومتر ، الحصول على التردد : 5 هرتز ، الطيف : 190-400 نانومتر
تنزلق إلى أسفل لعرض جميع المحتويات
الأطياف والبيانات
الشكل 3-1 فصل أطياف وبيانات المنتج حل القياسية
الشكل 1 عزل الطيف والبيانات ( 50 ميكروغرام / مل )( انقر على عرض الصورة الكبيرة )
كما هو مبين في الشكل 1 ، الاحتفاظ وقت المنتج القياسية الحل ( 50 ميكروغرام / مل ) 12-137 دقيقة ، ذروة شكل جيد ، غير المتماثلة عامل 1.00 ، العمود ممتازة الكفاءة ، نظرية صينية رقم 30549 . . . . . . . هناك خاصية امتصاص الذروة في 280 نانومتر .
الشكل 3-2 تراكب الطيف المستمر حقن المنتج القياسية الحل
الشكل 2 تراكب أطياف المنتج القياسية الحل ( 50 ميكروغرام / مل ، ن = 3 ) ( انقر على الصورة الكبيرة )
المنتج القياسية الحل ( 50 ميكروغرام / مل ) تم أخذ عينات من ثلاث مرات متتالية مع الاحتفاظ الوقت و منطقة الذروة RSD أقل من 1 ٪ .
الشكل 3-3 تراكب الطيف منحنى المعايرة المنتج القياسية
الشكل 3 تراكب منحنى المعايرة ( 1.00 / 5.00 / 10 / 50 / 100 / 200 ميكروغرام / مل ) ( انقر على الصورة الكبيرة )
كما هو مبين في الشكل 3 ، مجموعة خطية من 1.00-200 ميكروغرام / مل ، معامل الارتباط الخطي ص2أكثر من 0.9998 ، الخطي جيدة .
الشكل 3-4 تراكب الطيف الخطي أدنى نقطة فارغة حل المنتج القياسية
الشكل 4 تراكب الأطياف الخطية أدنى نقطة ( 1.00 ميكروغرام / مل ) و حل فارغة من المنتج القياسية
عندما كان حجم العينة 50 ش ل ، ذروة الارتفاع من اللاكتوفرين ( 1.00 ميكروغرام / مل ) هو ق ، متوسط قيمة المصفوفة الضوضاء 10.5-11.5 دقيقة هو ن ، خطي منخفض نسبة الإشارة إلى الضوضاء ( الأب ) ق / ن = 8-2 ، كما هو مبين في الشكل 4 ، حساسية عالية نسبيا .
الشكل 3-5 ذروة الشكل والرد على مستوى المنتج الحل في 0.1 ٪ trifluoroacetic حامض الأسيتونيتريل نظام المرحلة المحمول
الشكل 5 تراكب أطياف المنتج القياسية الحل في 0.1 ٪ trifluoroacetic حمض الأسيتونيتريل نظام المرحلة المحمول
كما هو مبين في الشكل 5 ، عندما المرحلة المحمول ب هو محض الأسيتونيتريل ، ذروة اللاكتوفرين شكل ذيل خطيرة ، مما يؤدي إلى انخفاض خطي ( 1.00 ميكروغرام / مل ) استجابة الفقراء ، لا يمكن أن تكون متكاملة تلقائيا ، طريقة الكشف عن الحد لا يمكن تلبية الاحتياجات القياسية . في هذه التجربة ، 0.1 في المائة trifluoroacetic حمض المياه - 0.1 في المائة trifluoroacetic حمض الأسيتونيتريل تم اختيار المرحلة المحمول عملية الاستخراج الانحدار مع أقصى قدر من الضغط أقل من 106 بار .
الشكل 3-6 فصل أطياف الحليب المبستر ( انخفاض درجة حرارة الحليب ) ، الحليب المعقم ( الحليب الدافئ ) و حليب الرضع
انزلاق عرض المزيد
اللاكتوفرين حساسة جدا إلى درجة الحرارة ، وارتفاع درجة الحرارة يمكن أن تدمر البنية الكيميائية والبيولوجية النشاط ، مما يجعل من الهيبارين تقارب العمود لا يمكن تخصيبها على نحو فعال . كما هو مبين في الشكل 6-8 ، محتوى اللاكتوفيرين في الحليب المبستر هو 13.4 مغ / كغ . ومع ذلك ، فإن درجة حرارة عالية جدا الحليب المعقم ( الحليب الدافئ ) و حليب الرضع اللاكتوفيرين لم يتم الكشف عنها .
توصيات بشأن المواد الاستهلاكية ذات الصلة اللوني
تحليل وحماية العمود | |
BioBasic 4، 5 ميكروم، 4.6 × 250 مم | (رقم البريد: 72305-254630) |
biobasic حماية العمود الأساسية ، 5 ميكرون ، 4 × 10 ملم ، 4 PK | (رقم البريد: 72305-014001) |
uniguard مباشرة نوع العمود كم واقية | (P/N: 850-00) |
عينة المعالجة | |
hypersep الهيبارين تقارب العمود ، 3 ملغ ، 10 / PK | (P / N: 60105-110-B) |
hypersep الزجاج فراغ الصلبة مرحلة الاستخراج ، 16 بت | (رقم البريد: 60104-232) |
محول ، 1 مل ، 3 مل ، 6 مل SPE ، 15 / PK | (رقم البريد: 60104-259) |
الهدف الوطني المحاقن البلاستيكية الكاملة ، Luer-Slip, 10 mL, 100/pk | (P / N: S7510-10) |
تيتان 3 ماء السليكوون إبرة فلتر ، 17 ملم ، 0.2 ميكرون ، 200 / PK | (النص: 42213-NPL) |
تنزلق إلى أسفل لعرض جميع المحتويات
المراجع
معيار وطني لسلامة الأغذية -- تحديد المنتج في الأطعمة
تحديد المنتج في الحليب ومنتجات الألبان من هبلك
تحديد المنتج في الحليب ومنتجات الألبان من هبلك
[ 4 ] ر / ccaa 70-2023 تحديد محتوى اللاكتوفيرين في حليب الأطفال من هبلك وبالترادف مطياف الكتلة
المقالة الأخيرة:دليل التشغيل واستكشاف الأخطاء وإصلاحها الحرارية العمود اللوني السائل
المقالة التالية:تحديد α - lactoglobulin و β - lactoglobulin في الحليب ومنتجاته