[ تطبيق ] Nanocoulter تقييم خمس طرق عزل الحويصلات خارج الخلية
التاريخ:2024-10-21اقرأ:1
في السنوات الأخيرة ، حويصلات خارج الخلية ( EVS ) قد جذبت الكثير من الاهتمام لما لها من دور هام في البحوث الطبية الحيوية ، ليس فقط أنها تلعب دورا رئيسيا في الاتصالات بين الخلايا ، ولكن أيضا لديها امكانات كبيرة في التشخيص المبكر والعلاج من المرض . ومع ذلك ، وكيفية عزل هذه الحويصلات بكفاءة وجودة عالية لا يزال تحديا . في دراسة حديثة ، استخدم الباحثون Nanocoulter الجسيمات محلل على أساس المقاومة النبضية الاستشعار ( RPS ) تقنية لتقييم جودة وكفاءة خمس طرق عزل الحويصلات خارج الخلية[1]وقد وفرت مرجعا قيما للباحثين . التقارير ذات الصلة قد تم تفسيرها بالتفصيل من قبل الجمهور ، انظرتقييم جودة وكفاءة خمس طرق عزل الحويصلات خارج الخلية باستخدام نبضات كهربائية التعريفيمنتدىما هو خارج الخلية الحويصلات
EVS هو نوع من nanosaccular حويصلة صدر من الخلايا ، والتي توجد على نطاق واسع في الدم والبول واللعاب وغيرها من سوائل الجسم . هذه الحويصلات هي غنية في البروتينات الوظيفية ، الجزيئات الصغيرة ، والأحماض النووية وغيرها من الأيضات . EVS موجودة تقريبا في جميع أنواع الخلايا والسوائل في الجسم ، بما في ذلك البلازما والبول واللعاب واللبن . أنواع ومحتويات البروتينات والدهون ميرنا يحملها EVS يمكن أن تعكس مباشرة نوع من المصدر . دراسة EVS يمكن أن تساعد على فهم أفضل cytophysiology وعلم الأمراض ، EV ليس فقط يظهر إمكانات كبيرة في تشخيص المرض ، ولكن أيضا يمكن أن تصبح أداة جديدة في تسليم المخدرات . ولذلك ، من المهم جدا فصل وتوصيف عالية النقاء إف لتلبية الاحتياجات الخاصة من التجارب .
مقارنة شاملة بين خمس طرق الفصل
في هذه الدراسة ، أجرى الباحثون تقييما مفصلا لخمسة تقنيات الفصل EV المشتركة ، بما في ذلك :
1.فرق السرعة الزائدة الطرد المركزي التقليدية ( UC )سرعة دوران أكثر من 30 ، 000 ص / دقيقة تسمى السرعة الزائدة الطرد المركزي . عالية النقاء إف يمكن فصلها عن طريق زيادة سرعة الطرد المركزي الطرد المركزي على أساس السرعة الزائدة ، والتي غالبا ما تعتبر معيار الذهب لاستخراج جسيمات متناهية الصغر .
2.طريقة الترشيح الفائقهذا الاختراع هو مناسبة لأنّ الإنتاج على نطاق واسع .3.Exoeasy غشاء تقارب طريقةباستخدام غشاء ( غشاء تقارب تقارب يجند تعديل ) متوسطة ، عملية بسيطة .4.qev العمود اللونيعلى أساس حجم الاستبعاد اللوني ، EVS يمكن فصلها حسب الحجم الجزيئي من المكونات .5.exoquick البوليمر هطولالطريقة : استخدام البوليمر عالية ( مثل شماعة ) لتغيير الذوبان و تشتت EVS ، بحيث تجمع في الحل ، ثم من خلال الطرد المركزي هطول الأمطار . هذا الأسلوب له مزايا قصيرة وقت الانفصال ، عملية بسيطة ، خفيفة نسبيا على إف .
تيم نتائج خمس طرق الفصل
المقاومة المستحثة النبضية ( RPS ) التكنولوجيا هي واحدة من التكنولوجيات الجديدة في توصيف الجسيمات النانوية .توصيف الجسيماتطريقة . حجم وتركيز الحويصلات خارج الخلية ، زيتا المحتملة تم تقييمها من قبل قياس التغيرات الحالية في micropores . . . . . . . هذا الأسلوب له مزايا دقة ، سرعة ، والبساطة والحساسية العالية ، مما يجعلها أداة مثالية لتقييم نوعية حويصلة الانفصال .

المقارنة بين حجم الجسيمات البيانات خمس طرق الفصل

المقارنة بين تركيز البيانات من خمس طرق الفصل

مقارنة البيانات المحتملة زيتا خمس طرق الفصل
فصلالسر وراء : كفاءات ونقاء
من خلال تقنية RPS ، والباحثين تحليل توزيع حجم الجسيمات ، الجسيمات تركيز ونقاء كل فصل الأسلوب . وأظهرت النتائج أنه على الرغم من أن تركيز الجسيمات عالية يمكن الحصول عليها باستخدام الترشيح الفائق ، qev العمود اللوني و exoquick الأسلوب ، أسلوب الطرد المركزي السرعة الزائدة التفاضلية التقليدية أظهرت أفضل نقاء .
توزيع حجم الجسيماتحجم الجسيمات من EV المعزولة من جامعة كاليفورنيا ، الجبهة المتحدة ، exoeasy و qev هو نفسه تقريبا ، حوالي 71 نانومتر ، في حين أن حجم الجسيمات من EV المعزولة من exoquick أكبر قليلا ، بمتوسط 77 نانومتر .
تركيز الجسيماتالترشيح الفائق ( UC ) أظهرت أعلى تركيز الجسيمات تصل إلى 2.10 × 10 .12/mL, في حين أن تركيز الجسيمات من جامعة كاليفورنيا طريقة منخفضة نسبيا .10/ مل.
نقاءEV نقاء UC الأسلوب هو أعلى ، وعدد من الجزيئات في مليغرام من البروتين تصل إلى 7.88 × 10 .11منتدى

المقارنة بين البيانات من خمس طرق فصل النقاء إف
كيفية اختيار طريقة الفصل الصحيح ؟

كل طريقة الفصل لهاميزة . ووفقا لنتائج الدراسة ، على الرغم من أن عملية الطرد المركزي هو أكثر تعقيدا وأطول وقت ، ولكن عندما EVS مع نقاء أعلى هو المطلوب في التجربة ، superionization الأسلوب لا يزال الخيار الأول . ومع ذلك ، من أجل تحقيق الكفاءة العالية والإنتاج الضخم من التطبيقات ، الفائق و qev العمود اللوني توفر أسرع سرعة الفصل و أعلى تركيز الجسيمات .

رسم تخطيطي من مبدأ عمل nanocoulter تحليل الجسيمات منصة
فهم مزايا وعيوب مختلف أساليب العزل سوف تساعد الباحثين على إجراء البحوث التجريبية وتطوير التطبيقات ذات الصلة خارج الخلية الحويصلات . في هذه الورقة ، خمسة أنواع من أساليب عزل الحويصلات خارج الخلية تم تقييمها من قبل تقنية RPS و nanocoulter دقة الأداء .
اختيار طريقة الفصل المناسبة ينبغي أن تأخذ في الاعتبار الاحتياجات المحددة من التجارب ، بما في ذلك كفاءة ونقاء عملية مريحة . وبالمثل ، فإن اختيار طريقة مناسبة لوصف الجسيمات ،في الدراسة المذكورة أعلاه ، نانو كولتر لديه بعض المزايا في وصف إف :
ميزة 1 : الكشف عن الجسيمات واحدة ، دقة دون تدخل
مع متقدمة تكنولوجيا النانو RPS ، Nanocoulter يدرك دقة التقاط وتحليل كل نانو الجسيمات .تخيل أن في مجمع السوائل البيولوجية ، كل صغيرة EVS يمر من خلال nanopores لا يمكن الهروب من " الفحص البدني الشامل " .ظاهرة تشويه بسبب الجسيمات الكبيرة إشارة التدريع الجسيمات الصغيرة في الطريقة البصرية التقليدية هو كسر .وخاصة بالنسبة polydispersed EVSكل عينة من السوائل البيولوجية ، سواء كان ذلك في الحجم ، والتركيز ، أو زيتا المحتملة ، مستمدة من القياسات المباشرة من الجسيمات الفردية ، وضمان أن النتائج صحيحة وموثوق بها .هذا النوع من الدقة ، يمكن أن تجعل الخلية الحويصلات البحث خطوة إلى مستوى جديد !
ميزة 2 : عالية الدقة ، تحليل متعدد المعلمة
nanocoulter يمكن إجراء تحليل شامل حجم الجسيمات ، توزيع حجم الجسيمات ، وتركيز زيتا المحتملة .دقة تحليل توزيع حجم الجسيمات يمكن أن تساعدنا على فهم حجم التوزيع الفعلي EVS عينة ، وتركيز الجسيمات يمكن أن تعكس وفرة ونوعية EVS الانفصال ، زيتا المحتملة ترتبط ارتباطا وثيقا استقرار EVS والهندسية EV تسليم المخدرات المستهدفة .هذه البيانات توفر لنا معلومات شاملة عن EVS ، وتوفير بيانات قوية لدعم البحوث العلمية والتطبيقات السريرية نانو المخدرات .
ميزة 3 : التكيف مع عينات معقدة
على عكس الطريقة البصرية التقليدية ، Nanocoulter أداء جيدا في مجمع polydisperse العينات .يمكن أن تميز بدقة انخفاض معامل الانكسار ، وارتفاع تركيز أيون أو انخفاض تدفق السوائل النانوية ، حتى في مجمع السوائل البيولوجية يمكن الحصول على نتائج موثوق بها ، والمهنية في مجال الطب الحيوي .
ميزة 4 : سريعة وعملية مريحة
عملية تدفق Nanocoulter بسيطة وسريعة ، لا تحتاج إلى نموذج المعالجة المعقدة ، فضلا عن المعدات الحرارية ومعايرة الخطوات .كل nanoporous رقاقة تم معايرة والتحقق بدقة في الإنتاج ، لا تستهلك المنتجات القياسية في نهاية العميل .هذا يسمح للباحثين للحصول على نتائج أسرع ، وتسريع وتيرة الاكتشافات العلمية .
تطبيق Nanocoulter أبعد من EVS .وقد أظهرت إمكانات هائلة وقيمة في العديد من المجالات مثل الطب الحيوي ، علم المواد ، والرصد البيئي ، وهلم جرا .مع دقة عالية ، والاستقرار عالية ، وتطبيق واسع النطاق ، Nanocoulter أصبحت تدريجيا مساعد مناسب للباحثين .
[1] يانغ إم، غو جي، فانغ إل، وآخرون. تقييم الجودة والكفاءة لخمس طرق عزل البصيلات خارج الخلية باستخدام استراتيجية استشعار النبض المقاوم. طرق الشرج. 2024; 16(32):5536-5544. نشر 2024 أغسطس 15. دوي: 10.1039 / d4ay01158a