“

　　تحسين ظروف السلطة الوطنية الفلسطينية التوليف باستخدام purepep chorus

حمض الببتيد النووي ( السلطة الوطنية الفلسطينية ) هو نوع من الحمض النووي النظير مع ببتيد مثل هيكل عظمي ، ولها العديد من الخصائص الفيزيائية والكيميائية . العمود الفقري لسلسلة السلطة الوطنية الفلسطينية يتكون من ن ( 2-aminoethyl ) - جليكاين و قاعدة الحمض النووي من خلال ربط الميثيلين الكربونيل .

الشكل 1 : مخطط هيكلي من الأحماض النووية الببتيد

غير أيوني الحمض النووي الريبي الببتيد نظائرها ، لأن السلطة الوطنية الفلسطينية لا تحمل شحنة سالبة ، لا كهرباء تنافر مع الحمض النووي الريبي ، وبالتالي فإن الجمع بين الاستقرار والخصوصية قد تحسنت كثيرا ، مع الحمض النووي أو الحمض النووي الريبي جزيء التهجين قدرة متفوقة على الحمض النووي / الحمض النووي أو الحمض النووي الريبي ، أداء عالية جدا في التهجين والاستقرار ، تسلسل محدد القدرة على الاعتراف ، وليس من قبل nuclease البروتيني التحلل .

PNAs يمكن أن تمنع التعبير الجيني من خلال ربط الحمض النووي الريبي التكامل . وعلاوة على ذلك ، في ظل ظروف معينة ، ونحن يمكن أن تعزز التعبير الجيني من خلال الجمع بين الحمض النووي المزدوج تقطعت بهم السبل حبلا الغزو الآلية . استنادا إلى المزايا المذكورة أعلاه ، السلطة الوطنية الفلسطينية قد استخدمت على نطاق واسع في العديد من المجالات في السنوات العشر الأخيرة ، مع تقارب عالية وخصوصية ، السلطة الوطنية الفلسطينية أصبحت أداة قوية ليس فقط في العلاج ، ولكن أيضا في التشخيص .

جنبا إلى جنب مع البحوث الأساسية في السلطة الوطنية الفلسطينية و ظهور التكنولوجيا الجديدة ، السلطة الوطنية الفلسطينية سوف تظهر أداء أفضل و تطبيق أوسع الآفاق .

　　التحديات الحالية

بسبب سهولة بلمرة و العديد من ردود الفعل السلبية في عملية deprotection ، توليف PNAs تحديا كبيرا . من أجل حل مشكلة سهلة البلمرة ، فإن الاستراتيجية العامة هي استخدام الكثير من الكواشف في التكثيف من ردود الفعل . ومع ذلك ، فإن تكلفة n-terminal حماية السلطة الوطنية الفلسطينية مونومر الكواشف المستخدمة في التوليف عالية نسبيا ، و هذه الطريقة لا تستخدم على نطاق واسع . ولذلك ، من الضروري تطوير عملية التوليف الاقتصادية والكفاءة النسبية من أجل مساعدة السلطة الوطنية الفلسطينية لتحقيق النجاح التجاري .

　　تحسين الظروف الاصطناعية على purepep تشوروس

في هذه الورقة ، فإننا سوف تظهر كيفية تحقيق التحسين السريع من السلطة الوطنية الفلسطينية في حالة purepep chorus التوليف التلقائي أداة .

السلطة الوطنية الفلسطينية 1 سوف تستخدم للإشارة إلى تسلسل دراسة توليفات مختلفة من المعلمات ، مثل معامل فائض من السلطة الوطنية الفلسطينية مونومر ، وقت رد الفعل ، ودرجة الحرارة . أعلى نقاء السلطة الوطنية الفلسطينية 1 سوف تستخدم لتجميع 5 سلاسل أخرى مع أطوال مختلفة من البيورين ( الأدينين و جوانين المحتوى ) ( انظر الجدول 1 ) . نقاء هو عامل رئيسي في التحقيق في توليف السلطة الوطنية الفلسطينية مونومر ، لأن الفضاء عائق كبير ، فمن السهل أن يسبب رد فعل التكثيف غير مكتملة يؤدي إلى انخفاض نقاء .

الجدول 1 : معلومات عن تسلسل السلطة الوطنية الفلسطينية في هذه القضية

السلطة الوطنية الفلسطينية 1 تم توليفها من قبل purepep chorus ببتيد الاصطناعية الصك ، مع ما يعادل 25 μ mol و 0.27 ملمول / غرام من استبدال الراتنج ، تليها fmoc / tbu متعامد نظام الحماية . في درجة حرارة الغرفة ، 20 ٪ تأكسد DMF الحل كان يعمل على إزالة حماية fmoc المجموعة . نظام hctu و nmm المستخدمة في التكثيف من ردود الفعل . بعد الانتهاء من رد فعل التكثيف ، وختم العملية تتم باستخدام 10 ٪ أنهيدريد الخل DMF الحل ، رد فعل في درجة حرارة الغرفة لمدة 5 دقائق . بعد إزالة الحماية النهائية ، الراتنج هو وضعها في قطع السائل ( TFA : تيس : H2O = 95 : 2.5 : 2.5 ) لمدة 4 ساعات في درجة حرارة الغرفة .

العملية المذكورة أعلاه يمكن أن تكون مجموعة مختلفة من البروتوكولات على البرمجيات وفقا للشروط المطلوبة ، والبرمجيات تلقائيا بحساب الكمية المطلوبة من الكواشف ، أداة تعمل تلقائيا ، مما يوفر المزيد من العمل اليدوي ، ويضمن أن اختبار البرنامج بدقة تنفيذها .

الجدول 2 - دراسة حالة التكثيف

من تحليل البيانات في الجدول 2 ، يمكننا أن نرى أن نقاء المنتج الخام يمكن أن تصل إلى 81 في المائة عند السلطة الوطنية الفلسطينية يعادل 10 مرات . ومع ذلك ، على أساس ارتفاع أسعار المواد الخام الاصطناعية fmoc-pna مونومر ، التصميم المذكور أعلاه ليست مقبولة بسهولة . نقاء المنتج الخام انخفض إلى 72 في المائة عن طريق الحد من رد فعل السلطة الوطنية الفلسطينية يعادل 4 مرات . عند هذه النقطة ، رد فعل السلطة الوطنية الفلسطينية معادلة معامل الحفاظ على 4 مرات ، رد فعل درجة الحرارة ترتفع إلى 45 ℃ التكثيف الوقت انخفض إلى 5 دقائق ، نقاء المنتج الخام انخفض إلى 61 في المائة . هذا يدل على أن 5 دقائق وقت رد الفعل قصير جدا عن التكثيف رد الفعل . وفي الوقت نفسه ، فإن الظروف الأخرى لم تتغير ، وقت رد الفعل هو زيادة 10 دقائق ( التجربة د ) و نقاء الخام الببتيد تصل إلى 82 في المائة . التجربة هـ يستخدم لمزيد من التحقيق في حالة رد فعل ، رد فعل معامل التكافؤ هو تعديل 2 ، واثنين من عينات من ردود الفعل . نقاء المنتج الخام بنسبة 5 ٪ في نفس الوقت التكثيف باستخدام نفس المبلغ من المواد الخام .

نحن تحديد شروط التوليف على أساس أعلى نقاء من السلطة الوطنية الفلسطينية 1 المنتجات ، وترك العديد من متواليات سيتم تصنيعه بنفس الطريقة كما في السلطة الوطنية الفلسطينية 1 ( أي طريقة هـ ) .

الجدول 3 : نتائج الخام من السلطة الوطنية الفلسطينية من خلال طريقة هـ

نقاء الخام من المنتجات التي تم تصنيعه من قبل السلطة الوطنية الفلسطينية المذكورة أعلاه هي ما بين 66 و 91 في المائة . ومن المثير للاهتمام ، السلطة الوطنية الفلسطينية المنتجات مع أعلى محتوى البيورين لديها أعلى نقاء .

الشكل 2 : 5 pnas المنتجات التي تم جمعها من uplc-uv النظام في 210nm الطول الموجي . uplc نظام المياه h-class uplc / esi-ms ، العمود الكروماتوجرافى C18 ( 1.7 μ م ، 2-1 × 50 ملم ) . المرحلة المحمول هو 0.1 ٪ TFA في محلول مائي ( أ ) مختلطة مع الأسيتونيتريل ( ب ) .

　　ملخص

في هذه الورقة ، فإننا مناقشة كيفية استخدام purepep تشوروس نظام لتحسين السلطة الوطنية الفلسطينية التوليف . في البداية ، ونحن استخدام 10 مرات ما يعادل السلطة الوطنية الفلسطينية التكثيف في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة واحدة . ونحن ملتزمون بتخفيض كمية المتفاعلة و التقليل إلى أدنى حد من تأثيرها على نقاء الخام لجعل رد الفعل أكثر اقتصادا ، أكثر استدامة وأكثر تمشيا مع متطلبات الكيمياء الخضراء . في نهاية المطاف ، وضعنا طريقة للحد من كمية من المتفاعلة و نقاء عالية . نقاء السلطة الوطنية الفلسطينية 1 يمكن أن تثار من 81 في المائة إلى 87 في المائة في 45 ℃ لمدة 5 دقائق في كل مرة ما يعادل 2 مرات من رد الفعل . وأخيرا ، تم تطبيق هذه الطريقة على توليف 5 أخرى السلطة الوطنية الفلسطينية .

هذه الطريقة يمكن الحصول على نتائج جيدة في مختلف أطوال مختلفة البيورين المحتوى . إن purepep chorus ببتيد synthetizer هو أداة جيدة لهذا العمل ، لأن نظام التوليف يمكن تعديلها بمرونة وفقا لمتطلبات . على سبيل المثال ، تعديل معامل التكافؤ ، تكرار مرات ، درجة الحرارة والوقت . وفي الوقت نفسه ، التلقائي حساب وظيفة من أدوات التشغيل الآلي والبرمجيات يساعد على الحد من عملية يدوية ، والحد من مخاطر الأخطاء ، وتحسين ظروف التوليف يمكن تطبيقها بسهولة على غيرها من السندات الإذنية التوليف .