معبأة العمود الكروماتوجرافى هو عنصر أساسي من عناصر التحليل الكروماتوغرافي ، أدائها يؤثر بشكل مباشر على كفاءة الفصل والكشف عن الدقة . العلمية والمعيارية في عملية الاستخدام يمكن أن تحسن بشكل كبير من كفاءة العمود ، وإطالة أمد الحياة ، النقاط الرئيسية التالية من إعداد قبل التحميل ، عملية التحميل ، وإدارة العمليات والصيانة .
المعالجة قبل التحميل
فحص وتنظيف العمود الكروماتوجرافى
مناسبة الحشو ( على سبيل المثال ، غير قطبية قطبية C18 ، السليكا هلام ) تم اختيارهم حسب قطبية الهدف .
عمود فارغ أنبوب مغمورة في حمض الهيدروكلوريك المخفف لمدة 2 ساعة ، ثم شطف مع الماء النقي إلى محايد ، ثم تغسل مع الميثانول لضمان عدم وجود شوائب مسعور تدخل في الجدار الداخلي .
إعداد و تعبئة الخليط
عند استخدام طريقة الترسيب ، وملء في تعليق موحد ( الصلبة المحتوى حوالي 5 ٪ ) ، مع مساعدة من مضخة فراغ شفط لجعل التعبئة والتغليف التعبئة والتغليف عن كثب . طريقة التحميل الجاف يحتاج إلى ضرب اسطوانة في طبقات للقضاء على الفجوة .
غربال لوحة مثبتة على كلا نهايات من العمود السرير ( حجم المسام أقل من 1 / 3 من حجم الجسيمات من حشو ) لمنع تسرب حشو .
أخذ العينات ومراقبة العملية
التوازن و التنشيط
عند استخدام العمود الجديد ، تدفق فقاعة مع انخفاض سرعة التدفق الأولي ( 0.5 مل / دقيقة ) لمدة 2 ساعة . عكس المرحلة العمود يحتاج إلى زيادة نسبة العضوية المرحلة تدريجيا إلى ظروف العمل لتجنب انهيار المرحلة الثابتة .
قبل أخذ العينات ، معايرة مع فارغة المرحلة المحمول خط الأساس .
مبدأ المعلمة الأمثل
التحكم في سرعة التدفق : الحفاظ على أفضل سرعة خطية ( عادة 1 ~ 2 ملم / ثانية ) من هبلك ، وزيادة انتشار دوامة عالية جدا ، وانخفاض منخفض جدا يؤدي إلى زيادة مقاومة النقل الجماعي .
درجة الحموضة مجموعة الحد : السليكا هلام مصفوفة يتجنب الرقم الهيدروجيني > 8 ، البوليمر التعبئة والتغليف لديها مجموعة واسعة من التسامح ، ولكن درجة الحموضة الخاصة يسرع الذيل بوند الكسر .
إدارة درجة الحرارة : ارتفاع درجة حرارة العمود يمكن تحسين شكل ذروة ، ولكن أكثر من 60 ℃ من السهل أن يسبب فقدان الترابط المرحلة ، تحتاج إلى التعاون مع وحدة التحكم في درجة الحرارة دقة التحكم في درجة الحرارة .
الصيانة اليومية والتجديد
استراتيجيات مكافحة التلوث
إن liposoluble الملوثات يتم غسلها مع التدرج ( على سبيل المثال ، والميثانول ، ثنائي كلورو ميثان والميثانول ) ؛ الأيونية بقايا يشطف مع محلول الملح ( 0.1m كلوريد الصوديوم ) .
إزالة العمود عند انسداد خطير ، وإزالة الطبقة العليا تعديل حشو ، ملء جديدة بعد إعادة الضغط .
الحفاظ على المدى الطويل مواصفات
على المدى القصير الخمول ( < 1 أسبوع ) : مختومة في حاويات تحتوي على مرحلة الجوالة ، شطف لمدة 30 دقيقة في الأسبوع .
التخزين على المدى الطويل ( > > يناير ) : استبدال الأسيتونيتريل / كحولالأيسوبروبيل خليط ( 1 : 1 ) ، مختومة في كلا طرفي بعد الوقوف في مكان بارد .
رابعاً - الاعتبارات الرئيسية
لا تغيير مفاجئ في الظروف : الخطوة الانتقالية المطلوبة عند تبديل المرحلة المحمول ، ومنع تقلبات حادة في العمود الضغط الناجم عن تغير مفاجئ في المذيبات اللزوجة . استبدال محلول الملح العازلة مع خامل المذيبات مثل الأسيتونيتريل قبل التوقف .
عينة المعالجة : عينة بيولوجية معقدة ينبغي تنقيته من قبل جمعية مهندسي البترول العمود لتجنب ترسب البروتين انسداد العمود السرير . حجم العينة أقل من 1 ٪ من قدرة العمود ، مما يؤدي إلى خطورة زائدة .
تشخيص الظواهر الشاذة : استمرار ارتفاع ضغط العمود يشير إلى تراكم الجسيمات ، خط الأساس الانجراف يشير إلى اختلال التوازن بين مرحلتين ، شبح الذروة الناجمة عن التلوث المنتظم .
من خلال صقل عملية الصيانة الدورية ، نظرية صينية عدد معبأة العمود الكروماتوجرافى يمكن الحفاظ على أكثر من 90 ٪ من القيمة الأولية ، تحليل واحد وقت الانحراف أقل من 2 ٪ . في الممارسة العملية ، عملية موحدة يجب أن تكون جنبا إلى جنب مع خصائص محددة من التعبئة والتغليف ، و تخفيف منحنى كفاءة العمود ينبغي تسجيلها بحيث يمكن استبدالها في الوقت المناسب .