قبل أخذ العينات : تحديد الاحتياجات وإعداد قاعدة

التخطيط قبل أخذ العينات هو شرط مسبق لضمان فعالية . وينبغي وضع خطة محددة جنبا إلى جنب مع الكشف عن الهدف ( مثل رصد البيئة ، وتقييم تأثير التطهير ، والبحث العلمي والتحليل ، وما إلى ذلك ) .

1 . اختيار نوع العينات بعقلانية

مبادئ مختلفة لأخذ العينات مناسبة لمختلف السيناريوهات والخصائص الميكروبيولوجية ، واختيار نوع مطابقة هو الأساس :

تأثير نوع العينات ( مثل أندرسون المتتالية أثر العينات ، شق أثر العينات ) : من خلال سرعة عالية تدفق الهواء إلى تأثير الكائنات الحية الدقيقة على وسائل الإعلام أو التقاط الفيلم ، مناسبة لزراعة البكتيريا الحية الكشف ( مثل تحديد عدد المستعمرات ) ، مناسبة خاصة لالتقاط مختلف حجم الجسيمات الدقيقة ( المتتالية أثر يمكن أن تميز توزيع حجم الجسيمات الهباء الجوي ) .

تصفية العينات ( على سبيل المثال ، غشاء الترشيح العينات ) : استخدام غشاء فلتر ( على سبيل المثال ، البولي غشاء ، غشاء السليولوز مختلطة ) اعتراض الكائنات الحية الدقيقة ، ومناسبة للكشف عن حساسية عالية ( على سبيل المثال ، qpcr الكمي ، الكشف عن الفيروس ) ، أو الحاجة إلى تحليل في وقت واحد من الكائنات الحية الدقيقة والجسيمات المرتبطة السيناريوهات ، ولكن يجب الانتباه إلى تأثير المواد غشاء الترشيح على النشاط الميكروبي ( على سبيل المثال ، اختيار انخفاض امتصاص غشاء الترشيح ) .

تسوية العينات ( على سبيل المثال ، لوحة التسوية ) : عملية بسيطة ، ولكن انخفاض الكفاءة ، ومناسبة فقط من أجل الكشف عن الكائنات الحية الدقيقة البيئية الخام ( على سبيل المثال ، غرفة نظيفة الرصد اليومي ) ، لا ينصح انخفاض تركيز أو حجم الجسيمات الدقيقة العينات .

الطرد المركزي : أخذ العينات من خلال قوة الطرد المركزي لفصل الكائنات الحية الدقيقة ، تنطبق على تدفق المشهد أخذ العينات ( على سبيل المثال ، ورشة عمل ، في الأماكن العامة ) ، والميزة هي صغيرة الحجم ، محمولة ، ولكن كفاءة التقاط يتأثر إلى حد كبير استقرار تدفق الهواء .

2 - تحسين اختيار وسائل الإعلام محاصرة

محاصرة وسائل الإعلام ( وسائل الإعلام ، أغشية الترشيح ، امتصاص السوائل ) مباشرة تحديد كفاءة التقاط الكائنات الحية الدقيقة وبقائها على قيد الحياة :

اختيار وسائل الإعلام : اختيار وسائل الإعلام الخاصة وفقا لخصائص الكائنات الحية الدقيقة المستهدفة ( على سبيل المثال ، المغذيات أجار للكشف عن البكتيريا ، البطاطس الجلوكوز أجار المساعد الشخصي الرقمي للفطريات ، وسائل الإعلام انتقائية للكشف عن البكتيريا المسببة للأمراض ) ؛ التأكد من أن وسائل الإعلام الجديدة ( 4 ℃ بعد إعداد التبريد لا أكثر من 7 أيام ) ، سمك موحد ( حوالي 3-5 ملم ) ، لتجنب تكسير أو التلوث .

اختيار مرشح غشاء : يفضل انخفاض الامتزاز ، المسامية العالية ( مثل بولي تترافلوروإيثيلين السليكوون غشاء ، غشاء النتروسليلوز ) للحد من فقدان الميكروبات بسبب الكهرباء الساكنة أو الامتزاز . حجم المسام من غشاء الترشيح يجب أن تتطابق مع حجم الميكروبات ( عادة 0.22 ميكرومتر أو 0.45 ميكرومتر ، 0.1 ميكرومتر غشاء الترشيح يمكن استخدامها لأخذ العينات الفيروسية ) .

اختيار امتصاص السائل : عندما تستخدم في امتصاص السائل أخذ العينات ، امتصاص السائل يجب أن تأخذ في الاعتبار " التقاط الكفاءة " و " الحفاظ على النشاط الميكروبي " ( على سبيل المثال ، مع محلول فسيولوجي أو العازلة التي تحتوي على 0.05 ٪ - 0.1 ٪ توين 80 للحد من ترسب وامتصاص الكائنات الحية الدقيقة ؛ أخذ العينات الفيروسية يمكن أن تضاف مع جيش صرب البوسنة لحماية هيكل الفيروسية ) .

3 . تجنب التلوث قبل أخذ العينات

أخذ العينات الميكروبية هي عرضة للتلوث الخارجي ، لذلك يجب أن يكون هناك رقابة صارمة على " بيئة معقمة " قبل أخذ العينات .

أخذ العينات ( على سبيل المثال ، فوهة ، فلتر فيلم كليب ، وأخذ العينات أنبوب ) يجب أن تكون معقمة مسبقا ( 121 ℃ / 20 دقيقة من ارتفاع ضغط البخار ، أو 160 ℃ / 2 ساعة من الحرارة الجافة التعقيم ؛ المكونات البلاستيكية يمكن مسح مع 75 ٪ من الكحول لمدة 30 دقيقة بعد الأشعة فوق البنفسجية التعقيم ) .

جمع وسائل الإعلام مثل الثقافة المتوسطة ، غشاء الترشيح ، وما إلى ذلك يجب أن تكون محملة تحت ظروف معقمة ( على سبيل المثال ، تعمل في سوبر نظيفة المنضدة ) لتجنب الاتصال اليدوي أو التعرض للتلوث الجوي .

قبل أخذ العينات ، وأخذ العينات في المنطقة قبل " التوازن " ( على سبيل المثال ، غرفة نظيفة قبل أخذ العينات قبل إغلاق النوافذ والأبواب لمدة 30 دقيقة ، وتجنب الناس المشي يسبب اضطراب تدفق الهواء ) .

أخذ العينات : تحسين إعداد المعلمة و مواصفات التشغيل

السيطرة على المعلمات و تفاصيل التشغيل في عملية أخذ العينات هي جوهر تحسين التقاط الكفاءة .

تحسين معايير أخذ العينات الأساسية

ضبط البارامترات الرئيسية لتحقيق أقصى قدر من الكفاءة التقاط وفقا لنوع العينات والكشف عن الطلب :

أخذ العينات تدفق : تدفق يجب أن تتطابق مع تصميم العينات ( على سبيل المثال ، أندرسون العينات الموصى بها تدفق 28.3l / min ، شق العينات يمكن تعيين 10-30l / min ) . انخفاض معدل التدفق يمكن أن يؤدي إلى انخفاض حجم الجسيمات الدقيقة ( < 5 μ م ) . ارتفاع معدل التدفق يمكن أن يؤدي إلى تعطيل الكائنات الحية الدقيقة أو دفقة من وسائل الإعلام . من المستحسن أن معايرة معدل التدفق قبل أخذ العينات ( الخطأ هو أقل من ± 5 ٪ ) .

وقت أخذ العينات : التوازن بين " التقاط " و " النشاط الميكروبي " . أخذ العينات في وقت قصير ( 5-15min ) هو مناسبة لارتفاع تركيز البيئة ( على سبيل المثال ، ورشة عمل ملوثة ) ، وتجنب الإفراط في ترطيب أو تراكم الكائنات الحية الدقيقة في الثقافة المتوسطة . أخذ العينات على المدى الطويل ( 30-60 دقيقة ) هو مناسبة لأنّ تركيز منخفض من البيئة ( مثل غرفة نظيفة ، غرفة العمليات ) ، ولكن ينبغي أن نولي الاهتمام : تأثير العينات لا ينبغي أن يكون أكثر من 60 دقيقة من وقت أخذ العينات ( لتجنب تجفيف وسائل الإعلام ) ، تصفية العينات يجب أن تمنع انسداد غشاء فلتر ( يمكن إزالة الجسيمات الكبيرة قبل الترشيح ) .

أخذ العينات الارتفاع والموقع : تحديد نقطة أخذ العينات على أساس الكشف عن الهدف :

الرصد البيئي : أخذ العينات ارتفاع 1.2-1.5m ( على قدم المساواة مع الناس في منطقة التنفس ) ، كل منطقة مع 3-5 نقاط أخذ العينات ( موزعة بالتساوي لتجنب زاوية الجدار ، تنفيس ، مصدر التلوث مباشرة فوق ) .

تقييم تأثير التطهير : أخذ العينات في نفس الموقع قبل وبعد التطهير لضمان الاتساق في المقارنة .

الهباء الجوي التتبع : يمكن تعيين نقاط أخذ العينات على ارتفاعات مختلفة ( على سبيل المثال ، 0.5m ، 1.5m ، 3M ) لتحليل التوزيع الرأسي الكائنات الحية الدقيقة .

تدفق الهواء التحكم في الاستقرار : تجنب أخذ العينات مباشرة تواجه فتحات التهوية ، والمراوح ، أو الناس تتحرك في الاتجاه ؛ إغلاق معدات التهوية المحلية إذا لزم الأمر ، أو استخدام مصدات الرياح لتحديد العينات ، والحد من تدفق الهواء الاضطرابات الناجمة عن أخذ العينات الانحراف .