وفيما يلي وصف شامل للعوامل الرئيسية التي تؤثر على دقة تحليل الخلايا الجسمية في الحليب ، والتي تغطي عدة أبعاد من معالجة العينة إلى أداء الجهاز :

جمع العينات وتجهيزها

أخذ العينات ممثل

يجب أن تتبع بدقة مبدأ أخذ العينات الطبقية ، ولا سيما على نطاق واسع خزان الحليب أو سيارة النقل ، ينبغي أن يكون في أعلى ، وسط ، وانخفاض طبقة على التوالي أخذ العينات والخلط ، وذلك لتجنب فصل الدهون الناجمة عن تفاوت توزيع الخلايا الجسدية . إذا كان حجم العينة ليست كافية ( أقل من 50 مل ) سوف تضخيم كلمة خطأ ، فمن المستحسن أن تأخذ ما لا يقل عن 100 مل من العينات المركبة وفقا لمعايير المنظمة الدولية للتوحيد القياسي .

الحفاظ على ظروف النقل

العينة يجب أن تكون مبردة في 4 ℃ و الكشف عن الانتهاء في غضون 6 ساعات . غير مؤذية المواد الحافظة ( مثل أزيد الصوديوم ) ينبغي أن تضاف إلى النقل لمسافات طويلة لتجنب صدمة شديدة .

التجانس في المعاملة

غير متجانس تماما مثل الحليب من السهل أن تظهر الدهون الكرة التكتل ، التدريع المجهر المجال البصري أو عرقلة تدفق داخلي . العلاج بالموجات فوق الصوتية موحدة ( 20 كيلو هرتز ، 30 ثانية ) ينبغي أن تستخدم لتفريق الجسيمات ، وفي الوقت نفسه ، التحكم في درجة الحرارة أقل من 40 ℃ لمنع لمسخ البروتين .

مؤشرات الأداء الأساسية

دقة النظام البصري

تدفق عداد الكريات ( FCM ) يعتمد على شدة الضوء المتناثرة إلى التمييز بين أنواع الخلايا ، الطول الموجي ليزر الاستقرار ( ± 0.5nm ) و حساسية مضخم أنبوب مباشرة تحديد نسبة الإشارة إلى الضوضاء . بدء التشغيل اليومي يحتاج إلى إجراء فحص السائل غمد فارغة ، والقضاء على الضوضاء الخلفية التدخل .

تحديد عتبة العقلانية

إلى الأمام ( FSC ) و تشتت الجانبي ( SSC ) يجب تجنب النجاسة إشارة المنطقة عند البوابة . على سبيل المثال ، نشط خلية جسدية المجتمع يقتصر على زاوية تشتت محددة ، والقضاء على الخلايا الظهارية تقشر والكائنات الحية الدقيقة من التلوث .

هيدرودينامي السيطرة

إجهاد القص في تدفق داخلي يؤدي إلى تفكك الخلايا الهشة ، ومعدل التدفق يجب أن تسيطر على 5-10 ميكرولتر / ثانية . عندما يتقلب ضغط السائل غمد أكثر من 5 ٪ ، والشيخوخة درجة مضخة الهواء ضيق الطريق يجب التحقق منها .

إدارة الكواشف والمواد الاستهلاكية

صبغ الجودة

التريبان الأزرق وغيرها من الأصباغ الحية يجب أن تستخدم في الوقت الحاضر ، والحفاظ على ضوء . تعطيل تلطيخ يمكن أن تجعل الخلايا الميتة تلطيخ غير طبيعي ، مما يؤدي إلى إيجابية كاذبة العد . كل دفعة من الكواشف الجديدة تحتاج إلى استخدام معيار خلية تعليق لمعايرة كفاءة الصباغة ( > 95 في المائة ) .

بقايا سائل التنظيف

بقايا سائل التنظيف ( على سبيل المثال ، هيبوكلوريت الصوديوم ) على الجدار الداخلي من حقن الإبرة يمكن أن تتحلل غشاء الكريات البيض ، مما يؤدي إلى عدم الكشف . شطف الأنابيب مع ديونيزيد المياه ثلاث مرات قبل وبعد كل اختبار ، واستبدال السوائل المتبقية مع الهواء .

عد حمام النظافة

ترسب البروتين في جدار الشعيرات الدموية الصغيرة يمكن أن تمتص الخلايا ، يجب أن تكون مغمورة في حل بالإنزيم ( التربسين + EDTA ) كل أسبوع .

رابعاً - العوامل البيئية والبشرية

التحكم في درجة الحرارة والرطوبة

انحراف درجة حرارة المختبر من 25 ℃ ± 2 ℃ يمكن أن يؤدي إلى تغيير في معدل التفاعل من كاشف . درجة حرارة ثابتة والرطوبة نظام مستقل يجب أن تكون مجهزة وحدة التجفيف .

الفرق في مهارات المشغل

سمك غير موحدة ( مثالية سمك 10-20 μ م ) من شريحة الزجاج يمكن أن يؤدي إلى تراكم المحلية تأثير . التدريب يشمل تقييم القدرة على التعرف على التشكل الخلوي .

مراقبة الجودة والتحقق من التردد

معدل الاسترداد من الحليب المجفف القياسية ( بما في ذلك 500 ، 000 / مل من الخلايا الجسمية ) مع تركيز معروف تم اختبارها يوميا . منحنى المعايرة يجب إعادة بنائها بعد الصيانة الشهرية .