واحدببتيد الاصطناعية الصكالمبدأ التقني : المنطق الأساسي المرحلة الصلبة الببتيد التوليف ( SPPS )

على أساس الحالة الصلبة الببتيد التوليف ( SPPS ) التي اقترحها بروس ميريفيلد في عام 1963 ، ببتيد التوليف هو أداة تستخدم لتحديد ج محطة من الأحماض الأمينية في الراتنج الناقل ، إضافة ن محطة حماية الأحماض الأمينية سلسلة ببتيد التمديد . وفيما يلي الخطوات المحددة :

الراتنج المعالجة

اختيار مناسب الصلبة الناقل ( على سبيل المثال ، رينك اميد ريسين ) تورم الراتنج مع ثنائي كلورو ميثان

إزالة الحماية

استخدام المذيبات القلوية ( مثل 20 ٪ hexahydropyridine / DMF الحل ) لإزالة FMOC حماية مجموعة من الأحماض الأمينية السابقة ، تعرض المجموعة الأمينية للمشاركة في الخطوة التالية من ردود الفعل .

رد فعل اقتران

الأحماض الأمينية الجديدة ( ن المحطة الطرفية حماية ) مختلطة مع تفعيل الكواشف ( مثل hbtu و DCC ) على شكل استرات نشطة ، ثم وضعت في المفاعل ، ثم ربط مع deprotected الأمينية لتشكيل ببتيد السندات .

غسل وتنقية

بعد كل رد فعل ، DMF ، والميثانول وغيرها من المذيبات المستخدمة لغسل لإزالة المواد الخام والمنتجات غير رد الفعل ، والحد من تراكم الشوائب .

تكسير وإطلاق

بعد التوليف ، ببتيد كان مقطوع من الراتنج مع حمض trifluoroacetic ( TFA ) وغيرها من الانحلال الحراري السائل ، ثم عجل مع الأثير ، الطرد المركزي والتجفيف للحصول على الخام الببتيد .

المزايا التقنية :

التشغيل الآلي : الحد من الأخطاء البشرية ، وتحسين التكرار .

تنقية عالية الكفاءة : من السهل فصل المرحلة الصلبة الناقل ، وتجنب تعقيد عملية تنقية وسيطة في المرحلة السائلة التوليف .

الإنتاج على نطاق واسع : دعم ملليغرام غرام الصف التوليف ، لتلبية احتياجات البحث والتطوير من المخدرات .

المكونات الرئيسية والوظائف : الأجهزة الأساسية لمراقبة دقيقة

تصميم الأجهزة من ببتيد synthetizer يؤثر بشكل مباشر على كفاءة و نقاء المنتج .

مفاعل

مادة : زجاج أو مادة البولي بروبيلين ، ومقاومة التآكل الكيميائي .

السعة : تغطي 30 μ mol ( دراسة صغيرة ) إلى 3G الراتنج ( الإنتاج الصناعي ) .

تصميم متعدد القنوات : دعم 2 / 4 / 6 قنوات موازية التوليف ، وتحسين تدفق عالية القدرة .

المذيبات نظام التسليم

التلقائي وحدة النقل : دقة التحكم في معدل تدفق DMF ، DCM وغيرها من المذيبات ( خطأ أقل من 1 في المائة ) .

حماية غاز خامل : عزل الأكسجين من النيتروجين / الأرجون لمنع أكسدة الأحماض الأمينية .

وحدة التحكم في درجة الحرارة

الدقة : ± 0.5 ℃ ، والحد من الآثار الجانبية راسمي .

النطاق : درجة حرارة الغرفة إلى 60 ℃ مناسبة لإزالة مختلف المجموعات الواقية .

الكشف عن نظام التحكم

رصد الأشعة فوق البنفسجية : في الوقت الحقيقي الكشف عن رد فعل السائل الامتصاصية ، الحكم على نقطة النهاية من deprotection / اقتران .

تحليل الطيف الكتلي : على الخط الطيف الكتلي يمكن استخدامها لتحديد هيكل المنتج في كل خطوة .

ثالثاببتيد الاصطناعية الصكالعملية : سلسلة كاملة من إعداد كاشف لتنقية المنتج

معايرة المعدات وإعداد

التحقق من اتصال من المذيبات خزان الغاز الأنابيب لضمان عدم تسرب .

معايرة درجة الحرارة ، الضغط ، السائل مع إبرة وغيرها من المعالم ، تشغيل برنامج الفحص الذاتي .

إعداد الكواشف والمواد

وزن الأحماض الأمينية ، تفعيل الكواشف ( مثل hbtu ) ، والمذيبات ( DMF ، DCM ) .

الراتنج هو إضافة إلى المفاعل ، ثم يتم ضخها من قبل DCM تورم .

تكوين إعدادات البرنامج

إدخال سلسلة ببتيد ، وتحديد رد الفعل ( درجة الحرارة ، والوقت ، المذيبات نسبة ) .

على سبيل المثال : fmoc deprotective ( 20 ٪ تأكسد / DMF ، 5 دقائق × 2 مرات ) ؛ رد فعل اقتران ( 3 مرات أكثر من الأحماض الأمينية ، 1 ساعة ) .

التلقائي توليف

بدء الإجراء ، وأداة تلقائيا يكمل فصل الحماية ، اقتران ، والغسيل الدورة الدموية .

رصد عملية رد الفعل ، مثل امتصاص الأشعة فوق البنفسجية استقرت بعد الانتقال إلى الخطوة التالية .

الانحلال الحراري وتنقية المنتجات

إضافة ( TFA / الماء / triisopropylsilane = 95 : 2.5 : 2.5 ) مع التحريك لمدة 2 ساعة في درجة حرارة الغرفة .

الراتنج هو إزالتها عن طريق الترشيح ، الببتيد الخام هو عجل مع الأثير بعد التركيز على تكسير السائل .

عالية النقاء الببتيد ( 95 في المائة ) تم الحصول عليها من خلال تنقية عالية الأداء اللوني السائل ) .