الأغنام القلاعية فيروس orfv الحمض النووي عدة إليسا ،

[ اسم المنتج ]فيروس الخروف القلاعية )أورففطقم اختبار الحمض النووي )

[ مواصفات التغليف ]صندوق

[ طريقة المنتج ]في الوقت الحقيقي مضانطريقة الاسترداد

فيروس الخروف القلاعية )أورففطقم اختبار الحمض النووي )[ العنصر الرئيسي ]

RT-PCR فعل الحل ، مختلطة انزيم الحل ، السيطرة الإيجابية والسلبية السيطرة .

[ ظروف التخزين وفترة الصلاحية ]

تجنب الضوءالحفاظ على درجة حرارة أقل من 20 ℃ ، وتجنب تكرار التجميد تحسن ، صالحة لمدة 12 شهرا .

[ الصكوك المنطبقة ]
أبي سلسلة ، سلسلة بيو راد ، اجيلنت stratagene MX سلسلة ، روش lightcycler R480 ، سيفيد smartcycler ، روتر جين سلسلة ، وهانغتشو Bori سلسلة .

[ طريقة الاختبار ]

إعداد الكاشف ( الكاشف إعداد المنطقة )

（1 ) إزالة عدة من الثلاجة ، وإزالة كاشف اللازمة للتجربة من عدة ، وذوبان تماما وخلط بشكل موحد وعلى الفور طرد مركزي لإزالة السائل تعلق على جدار الأنبوب .

（2 ) حساب عدد من ردود الفعل المطلوبة في التجربة الحالية ( ن ) ، وحساب كمية الكواشف المطلوبة في التجربة الحالية على أساس نظام رد الفعل المبين في الجدول أدناه .

ن = عدد السيطرة السلبية ( 1 ر ) + عدد السيطرة الإيجابية ( 1 ر ) + خطأ الحجز ( 1 ر ) + عدد العينات

（3 ) إضافة الكواشف المذكورة أعلاه في أنبوب الطرد المركزي العقيم ، الطرد المركزي الفوري بعد الاختلاط الكامل . الكواشف كانت معبأة في تفاعل البلمرة المتسلسل ( PCR ) أنبوب في 20 ميكرولتر / أنبوب .

（4 ) بعد رد فعل PCR أنبوب مغطى بإحكام ، رد فعل PCR أنبوب نقل إلى عينة تجهيز المنطقة . الكواشف المتبقية يتم تخزينها في الثلاجة تحت 20 ℃ . . . . . . .

2 . إعداد العينة ( عينة تجهيز المنطقة )

استخدامqiagen و روش الحمض النووي الحمض النووي استخراج عدة استخراج qudna qudna , عملية محددة وفقا لتعليمات من عدة .

3 - إضافة عينات

في إعداد أعلاهالحمض النووي من العينات التي تم تجهيزها 5 μ ل و 25 μ ل / أنبوب أضيفت إلى تفاعل البلمرة المتسلسل ( PCR ) أنبوب عينة ، على التوالي . السيطرة السلبية والإيجابية على حد سواء إضافة 5 ميكرولتر مجموعات من السيطرة السلبية والإيجابية على حد سواء ، مع حجم النهائي 25 ميكرولتر / أنبوب ، بعد تغطية رد فعل البلمرة المتسلسل مختلطة بالتساوي ، على الفور انخفاض سرعة الطرد المركزي ، ونقل إلى بكر الصك .

بكر ( PCR التضخيم المنطقة )

（1 ) أخذ عينات من منطقة المعالجة لإعداد رد فعل PCR أنبوب ، ووضعها في الوقت الحقيقي الاسترداد الكمية الفلورية جهاز عينة فتحة في موقف المقابلة ، وتسجيل وضع النظام .

（2 ) إعداد المعلمات ذات الصلة لتضخيم الحمض النووي في الجدول التالي لتضخيم PCR .

ملاحظة :أبي سلسلة PCR الفلورسنت جهاز لا يختار روكس التصحيح عند الإعداد ، مجموعة التبريد يختار لا شيء .

القيمة المرجعية ( إشارة النطاق )

1 . تحديد فعالية عدة :

（1 ) مراقبة إيجابية : هناك عادة S - نوع منحنى التضخيم أو CT قيمة أقل من 35 .

（2 ) السيطرة السلبية : CT قيمة > 38 أو لا CT القيمة ، خط مستقيم أو مائل قليلا ، أي فترة من النمو المتسارع .

2 - تحديد نتائج العينات :

（1 ) إيجابية : نتيجة فحص العينات CT قيمة أقل من أو يساوي 35 أو فترة النمو المتسارع الواضح .

（2 ) المشبوهة : نتائج الكشف عن عينة من CT قيمة 35 ~ 38 . في هذا الوقت ، ينبغي أن يكون اختبار عينات مرارا وتكرارا ، إذا كان تكرار نتائج الاختبار لا تزال في نطاق 35-38 CT ، هناك زيادة كبيرة في الفترة ، ثم الحكم على إيجابية ، أو سلبية .

（3 ) السلبية : نتيجة فحص العينات CT قيمة > 38 أو لا قيمة CT .

[ القيود المفروضة على طرق الاختبار ]

عندما يكون تركيز الحمض النووي في الكشف عن عينة أقل من الحد الأقصىنتائج سلبية كاذبة قد تحدث في دي حد الكشف .

هذه المجموعة هي فقط تستخدم في الفحص الأولي من العينات ، وينبغي أن تستخدم في مزيد من الثقافة طريقة لتشخيص نتائج إيجابية من هذه المجموعة .

[ ملاحظة ]

المختبرات التي تستخدم هذه المجموعة يجب أن تدار بدقة وفقا لمعايير إدارة المختبرات ذات الصلة من التضخيم الجيني اختبار الصادرة عن الإدارات ذات الصلة في الدولة .

تجنبالحمض النووي الريبي هو المتدهورة ، عملية معالجة العينة يجب أن تعمل في 0-4 ℃ ، و بعد الانتهاء من التجربة ، على الفور على متن الطائرة الكشف ؛ المواد الاستهلاكية من الأجهزة المستخدمة في تجهيز العينة يجب أن تكون خالية من رايبوزيم العلاج .

المواد في كل منطقة هي لأغراض خاصة ، لا ينبغي أن تستخدم عبر لتجنب التلوث . تنظيف الجدول فورا بعد الاختبار .

عند امتصاص رد فعل السائل ، فقاعة ينبغي تجنبها قدر الإمكان . أعلىقبل بكر الصك ، ينبغي إيلاء الاهتمام إلى التحقق من ما إذا كان رد فعل الأنابيب مغلقة بإحكام لتجنب تبخر السائل يسبب نتائج غير دقيقة .

جميع الكواشف يجب أن تذوب في درجة حرارة الغرفة و تكون مختلطة تماما قبل استخدامها ، و يجب أن يكون الطرد المركزي على الفور .

السلبية والإيجابية الضوابط في عدة ينبغي نقلها إلى منطقة إعداد العينة وتخزينها بشكل منفصل قبل الاستخدام الأول .

من أجل منع التدخل مضان ، الاتصال المباشر بين اليدين العاريتين ينبغي تجنبها .تفاعل البوليميراز المتسلسل ( PCR ) أنبوب ، وينبغي تجنب أي علامة على تفاعل البوليميراز المتسلسل أنبوب .

شفط المستخدمة في عملية الاختبار يجب أن تصل مباشرة إلىفي 10 ٪ من النفايات حمض هيبوكلوريك اسطوانة ، بكر رد فعل الأنابيب التي تم الكشف عنها ، لا تفتح الغطاء ، جنبا إلى جنب مع غيرها من النفايات المعقمة بعد التخلص منها . مقاعد البدلاء العمل وجميع أنواع المواد التجريبية ينبغي أن تستخدم بانتظام 10 ٪ حمض هيبوكلوريك ، 75 ٪ من الكحول أو الأشعة فوق البنفسجية مصباح التطهير ؛

9 - البارامترات ذات الصلة من أجل تضخيم الصك يجب أن تكون مجموعة وفقا للمتطلبات ذات الصلة من هذه المواصفات . الكواشف مع دفعات مختلفة لا يمكن أن تكون مختلطة . و استخدامها خلال فترة الصلاحية .