في الوقت الحقيقي محلل الخلية المسمى

xCELLigence RTCA S16في الوقت الحقيقي غير المسمى محلل الخلية ( 1x16 ) .انتشار الخلايا الحية ، مورفولوجيا و قوة لاصقة تم رصدها في الوقت الحقيقي باستخدام أجهزة الاستشعار .

xCELLigence RTCA S16في الوقت الحقيقي محلل الخلية المسمىتعمل في مستوى ثاني أكسيد الكربون خلية حاضنة ، محطة العمل يقع خارج حاضنة . برامج سهلة الاستخدام يمكن تحقيق في الوقت الحقيقي رصد ومراقبة الصك ، ولها وظيفة تحليل البيانات في الوقت الحقيقي .

خصائص

1 - الحصول على الوقت المستمر نقطة تحليل الخلايا في كل عملية تجريبية .

2 - RTCA يمكن أن توفر قراءات كمية مستمرة من عدد الخلايا ، معدل الانتشار ، حجم / شكل الخلية ، خلية مصفوفة التصاق قوة .

تقنية

تحليل المعاوقة الخلوية

الكشف عن الخلية هو أداة هامة في البحوث الأساسية والتطبيقية في علم الأحياء . ومع ذلك ، فإن فائدة العديد من أساليب الكشف عن الخلايا قد انخفضت بسبب العوامل التالية : ( 1 ) الحاجة إلى استخدام علامات ، ( 2 ) عدم القدرة على الرصد المستمر ( أي فقط إنتاج البيانات النهائية ) ، و ( 3 ) عدم التوافق مع غيرها من أساليب الكشف متعامد ، ( 4 ) عدم القدرة على توفير قراءات موضوعية / كمية . ومع ذلك ، كل من هذه العيوب يتم التغلب عليها من قبل غير الغازية ، في الوقت الحقيقي الكشف عن خلية مقاومة لا تحتاج إلى علامة .

وحدة وظيفية للكشف عن مقاومة الخلية

وحدة وظيفية خلية مقاومة الكشف هو مجموعة من microelectrodes الذهب تنصهر على السطح السفلي من microtitrant لوحة ( الشكل 1 ) . عندما تكون هذه الأقطاب هي مغمورة في حل موصل ، مثل عازلة أو معيار نسيج الثقافة المتوسطة ، عبر القطب الكهربائي تطبيق الجهد الكهربائي يسبب تدفق الالكترونات من القطب السالب ، من خلال حل الجسم ، ثم تترسب على القطب الموجب ، وبالتالي استكمال الدائرة . لأن هذه الظاهرة تعتمد على التفاعل بين القطب و الحل ، الخلايا الملتصقة الموجودة في واجهة بين القطب و الحل يمكن أن تعوق تدفق الالكترونات . حجم هذه المقاومة يعتمد على عدد الخلايا ، حجم وشكل الخلايا ، ونوعية التصاق الخلايا إلى المصفوفة . الأهم من ذلك ، سطح الذهب microelectrode أو الجهد المطبق ( 22 ملي فولت ) لا تؤثر على صحة الخلية أو السلوك .

معاوقة الكهربائي

الذهب microelectrode biosensor يغطي 70-80 ٪ من المساحة ( اعتمادا على ما إذا كان أو لم يكن هناك مجال للمراقبة ) في كل مسام من اجينت الالكترونية microtitrant لوحة ( e-plates ) . على عكس زوج من أقطاب مبسطة كما هو مبين في الشكل 1 ، الأقطاب الكهربائية في كل حفرة من e-plates ترتبط في " الشريط " على شكل مجموعة متداخلة ( الشكل 2 ) . هذا الترتيب يمكن رصد السكان الخلية في وقت واحد ، وبالتالي يمكن أن تكون حساسة للغاية للكشف عن عدد من الخلايا التي تعلق على لوحة ، حجم / شكل من الخلايا ، التصاق الخلايا إلى مصفوفة الجودة .

في الوقت الحقيقي تحليل منحنى مقاومة

مقاومة تدفق الالكترون الناجم عن خلية التصاق هو مبين من قبل المعلمة غير الأبعاد خلية الأس ( CI ) ، حيث CI = ( مقاومة في الوقت نقطة ن - مقاومة في خلوي ) / اسمي مقاومة القيمة . الشكل 3 مثال عام في الوقت الحقيقي منحنى مقاومة الخلايا أثناء الإعداد والتشغيل .

في الساعات الأولى بعد إضافة الخلايا إلى ثقافة المسام ، مقاومة الزيادات بسرعة . هذا يرجع إلى حقيقة أن الخلايا تسقط من تعليق الدولة ، وترسب على الأقطاب الكهربائية ، وتشكيل التصاق بؤري . إذا كان عدد الخلايا التي أضيفت في البداية كانت صغيرة ، و هناك مساحة حرة في الجزء السفلي من المسام ، الخلية سوف تتكاثر ، مما يؤدي إلى زيادة مطردة في مؤشر الخلية ( CI ) . كاريتاس الدولية القيم تميل إلى أن تكون ثابتة عند الخلايا تصل إلى التقاء الدولة ، مما يشير إلى أن أجزاء من سطح القطب التي يمكن أن تكون على اتصال مع عدد كبير من وسائل الإعلام لم تعد تتغير . عند هذه النقطة ، إضافة إلى موت الخلايا المبرمج محفز يؤدي إلى انخفاض قيمة كاريتاس الدولية إلى الصفر . هذا هو بسبب الخلايا تصبح الجولة و تسقط من الجزء السفلي من الثقافة المسام . على الرغم من أن هذا المثال العام ينطوي على إضافة أدوية إلى التقاء الخلايا ، معاوقة المستندة إلى القياسات هي مرنة جدا ، ويمكن أيضا تقييم معدل ومدى التصاق الخلايا الأولية إلى الأقطاب الكهربائية ، أو معدل ومدى انتشار الخلايا .

العلاقة بين مقاومة الظواهر الخلوية

في الوقت الحقيقي تحليل الخلايا ( RTCA ) يوفر وسيلة لتحديد كمية الخلايا ، معدل الانتشار ، حجم الخلية / التشكل ، ونوعية التصاق الخلايا المصفوفة . لأن هذه الخصائص الفيزيائية هي مزيج من الآلاف من الجينات المختلفة / منتجات البروتين ، RTCA التكنولوجيا يمكن أن تعكس على نطاق واسع حالة صحية وسلوك الخلايا . من وظيفة الحاجز البطانية ، chemotaxis الخيطية pseudopods حركية ، immunocyte بوساطة انحلال الخلايا ، xelligence الصك قد نجحت في تحليل العديد من الظواهر الخلوية . على الرغم من مجموعة واسعة من التطبيقات ، xcelligence الفحص لا تزال قادرة على استكشاف محددة جدا الكيمياء الحيوية والخلوية الظواهر . من خلال ترشيد استخدام تقنيات التحكم و / أو متعامدة ، يمكننا ربط خصائص مقاومة المنحنيات مع خلية معينة / الجزيئية الظاهرة . من أجل الحصول على فهم أفضل لكيفية إنشاء هذه الرابطة ، و تشهد على حساسية وتنوع xcelligence RTCA التكنولوجيا ، يرجى زيارة العديد من التطبيقات المحددة التي تركز هنا .

مبدأ العمل

في الوقت الحقيقي الكشف عن سلوك الخلية تحت الظروف الفسيولوجية

إن xcelligence RTCA أداة تعتمد على مقاومة التكنولوجيا ، والتي يمكن الكشف عن صحة الخلية والسلوك بشكل مستمر تلقائيا في مستوى ثاني أكسيد الكربون خلية ثقافة عدة ثوان إلى عدة أيام . ببساطة عن طريق إضافة الخلايا إلى e-plate ، عدد الخلايا ، معدل انتشار الخلايا ، حجم الخلية ، مورفولوجيا الخلايا ، خلية مصفوفة قوة الالتصاق يمكن رصدها في الوقت الحقيقي .

مواصفات مقاومة الخلية

حساسية عالية في الوقت الحقيقي خلية تحليل المعاوقة يستخدم الذهب الكهربائي تنصهر في الجزء السفلي من e-plate للكشف عن خصائص الخلية غير الغازية . وجود خلايا ملتصقة على الحدود بين القطب و الحل يمنع تدفق الالكترونات . قوة مقاومة يعتمد على عدد وحجم وشكل الخلايا ، فضلا عن قوة الالتصاق بين الخلايا المصفوفة . سطح microgold الكهربائي و الجهد الكهربي ( 22 ام ) لا تؤثر على نشاط الخلية و سلوك الخلية .

بسيطة ومستقرة الكشف عن سير العمل

إن xcelligence RTCA تدفق العمل يمكن أن تساعد المستخدمين على الحصول على حساسية عالية ، وارتفاع تكرار التحليل الكمي للبيانات ، وفي الوقت نفسه يقلل كثيرا من وقت التجهيز اليدوي . في الوقت الحقيقي الكشف عن عدد الخلايا ، معدل انتشار الخلايا ، حجم الخلية ، مورفولوجيا الخلية ، خلية مصفوفة قوة الالتصاق يمكن أن تبدأ فقط بإضافة الخلايا إلى e-plate المسام لوحة . خلية مؤشر ( CI ) يستخدم لوصف مقاومة الخلية الحالية الناجمة عن خلية ملتصقة .

تطبيق .

الكشف عن الخلايا المناعية القاتلة

قتل الخلايا المناعية التقليدية اختبار تستغرق وقتا طويلا وشاقة ، تحتاج إلى استخدام مجموعة متنوعة من التقنيات لجمع البيانات من عدة نقاط في الوقت المناسب . وعلى النقيض من ذلك ، غير المسمى xcelligence RTCA يوفر معلومات شاملة عن قتل الخلايا المناعية و يحاكي النشاط في الجسم الحي . حساسية عالية ، واستنساخ عالية مباشرة في الوقت الحقيقي الكشف عن فعالية الخلايا المناعية القاتلة . هذه بسيطة ، وارتفاع تدفق العمل يمكن أن توفر نظرة ثاقبة في آلية عمل الخلية ، استمرار قتل و الإرهاق .

الكشف عن تأثير الفيروس

استخدام اجيلنت xcelligence RTCA أداة للكشف عن الفيروس cytopathic تأثير ( CPE ) في الوقت الحقيقي وبدقة ، وتعزيز البحوث الخاصة بك على العلاج المضاد للفيروسات أو تطوير لقاح ، دون الحاجة إلى إجراء اختبار اللوحة تستغرق وقتا طويلا وشاقة . رصد الفيروس التعليم المهني المستمر تلقائيا في غضون دقائق إلى أيام ، والحد بشكل كبير من عبء العمل ، وتجهيز العينات يدويا . الهدف : دراسة حركية انتشار الخلايا ، وتحديد الوقت الأمثل نقطة العدوى الفيروسية في مختلف كثافة الخلية ، وتقييم الفيروس بوساطة cytopathic المرض في سير العمل .

تحليل السمية

الآثار السامة للخلايا من المخدرات أو المركبات التي تم تحديدها من قبل في الوقت الحقيقي رصد انتشار الخلايا ، حجم الخلية أو التشكل ، خلية مصفوفة التصاق قوة . هذا بسيط ، وارتفاع تدفق cytotoxicity التحليل يستخدم لرصد حركية طويلة الأجل استجابة الخلايا . في حالة عدم زيادة عبء العمل ، اتخاذ قرار مستنير حول وقت المعالجة الخلوية ، وتوليد منحنى الاستجابة للجرعة بسهولة في عدة نقاط في الوقت المناسب .

خلية التصاق الكشف

الملايين من خلايا السرطان الأولية سوف تسقط في الدورة الدموية أثناء تكوين الورم ، والمعروفة باسم تعميم الخلايا السرطانية ( CTCs ) . CTCs يمكن إعادة الالتزام ، ونشرها ، ونقلها إلى الأجهزة البعيدة . باستخدام xcelligence RTCA ، حركية التصاق الخلايا المختلفة يمكن رصدها على نحو مستدام ، وتعقيد نقل يمكن أن يكون مفهوما على نحو أفضل . في الوقت الحقيقي تقييم كمي التصاق وتمديد الخلايا دون استخدام وكلاء الفلورسنت أو الأصباغ .

الكشف عن الخلية إشارة تنبيغ

مستقبل مقترن بالبروتين ج ، gpcrكيناز التيروسين( راديو وتلفزيون كوسوفو ) أو هرمون النووية بوساطة تنبيغ الإشارة غالبا ما يؤدي إلى التغيرات البيوكيميائية التي تؤثر على عدد الخلايا الموجودة ، حجم / شكل الخلية ، ودرجة ضيق التفاعل بين الخلايا و سطح المسام . مع xcelligence RTCA ، يمكنك التقاط التغيرات في حجم الخلية ، مورفولوجيا ، ومعدل انتشار الخلايا مع إشارة تنبيغ الأحداث . هذا غير المسمى الرصد المستمر يسمح التقييم الكمي استجابة الخلايا في الدقائق القليلة الأولى و أيام بعد العلاج .

الكشف عن الخلايا الجذعية

دراسة الخلايا الجذعية يساعد الناس على فهم آلية المرض ، ويساعد على تطوير الطب التجديدي ، ويوفر طريقة بديلة لاختبار موثوقية وفعالية الأدوية الجديدة . استخدام xcelligence RTCA للتنبؤ وظيفة من منتجات الخلايا الجذعية وتقييم التغيرات في الخلايا الجذعية الوسيطة ( MSCS ) للتغلب على التحديات في إنتاج منتجات العلاج بالخلايا . مع عدد أقل من الخلايا إلى حد كبير تحسين الكفاءة التحليلية ، باستمرار الكشف عن عدد من الخلايا ، وقوة الالتصاق ، مورفولوجيا التغييرات الشاملة لضمان الاتساق في كل مرحلة .

تحليل وظيفة حاجز الخلية

حاجز الخلية وظيفة توفرها الخلايا البطانية و الخلايا الظهارية التي يمكن أن تتضرر في كثير من الحالات . الخلايا البطانية هي مرتبة على السطح الداخلي من الأوعية الدموية و الأوعية اللمفاوية . الخلايا الظهارية تشكل سطح الجسم بمثابة حاجز لحماية الجسم من الجزيئات الغريبة . المقاومة على أساس xcelligence RTCA هو طريقة حساسة الكمية التي يمكن أن تحل محل الأساليب التقليدية مثل اختبار نفاذية المذاب و transendothelial المقاومة ( TEER ) اختبار للكشف عن حاجز الفشل .