رات الميلاتونين ، طن متري إليسا كيت

رات الميلاتونين ، طن متري إليسا كيت

lكاشف عدة تستخدم في المختبر الكشف الكميمصل الدم ، البلازما ، خليط الأنسجة وما يتصل بها من عينات السائلوسطالفئران الميلاتونين( أ )MTالمحتوى .

lمدة الصلاحية : 6 أشهر

lشروط الحفظ :2-8℃

lهذه المجموعة هي لأغراض البحث العلمي فقط ، لا ينبغي أن تستخدم في التشخيص السريري

مبدأ التجربة

إليسا كيت كان يستخدم خطوة واحدة ساندويتش مزدوجة الأضداد . الأجسام المضادة التي تم التقاطها من قبل الفئران الميلاتونين ( طن متري ) كانت مغلفة في micropores ، ثم عينات ، والمعايير ، HRP المسمى الأجسام المضادة أضيفت إلى micropores ، ثم تم تربيتها و غسلها . TMB هو تحويلها إلى اللون الأزرق تحت حفز البيروكسيديز ، الأصفر النهائي تحت تأثير حمض . هناك علاقة طردية بين عمق اللون و الميلاتونين ( طن متري ) في الفئران . الامتصاصية ( التطوير التنظيمي ) تم قياسها في 450nm الطول الموجي مع انزيم المسمى الصك .

تجهيز العينات والمتطلبات

1. سيرومسعينات الدم التي تم جمعها من مصل الدم فصل أنبوب يوضع في درجة حرارة الغرفة لمدة 2 ساعة أو 4 ℃ بين عشية وضحاها ، ثم 1000 × ز الطرد المركزي لمدة 20 دقيقة ، يمكن أن يكون طاف ، أو طاف يوضع في - 20 ℃ أو - 80 ℃ التخزين ، ولكن ينبغي تجنب تكرار التجميد والذوبان .
2. البلازماسعينات تم جمعها باستخدام EDTA أو الهيبارين كما anticoagulant . العينات التي تم جمعها في 2-8 ℃ 1000 × ز الطرد المركزي لمدة 15 دقيقة بعد 30 دقيقة .
3 . نسيج خليط :شطف الأنسجة مع precooled برنامج تلفزيوني ( 0.01m ، الرقم الهيدروجيني = 7-4 ) لإزالة بقايا الدم ( تقسيم خلايا الدم الحمراء في خليط يمكن أن تؤثر على نتائج القياس ) ، وقطع الأنسجة بعد وزنها . قطع الأنسجة مع حجم المقابلة من برنامج تلفزيوني ( عادة في نسبة الوزن إلى حجم 1 : 9 ، على سبيل المثال ، 1G عينات الأنسجة المقابلة 9 مل من برنامج تلفزيوني ، حجم معين يمكن تعديلها وفقا للاحتياجات التجريبية ، وجعل السجلات . إضافة مثبطات الأنزيم البروتيني في برنامج تلفزيوني ) في الزجاج خلاط ، وطحن تماما على الجليد . من أجل مزيد من الانقسام من خلايا الأنسجة ، بالموجات فوق الصوتية يمكن أن تكون مكسورة أو الطين موحدة مرارا وتكرارا تجميد والذوبان . بعد الطرد المركزي الخليط في 5000 × ز لمدة 5 ~ 10 دقائق ، طاف الكشف .

4 - خلية ثقافة طاف أو غيرها من العينات البيولوجية :من فضلك 1000 × ز الطرد المركزي لمدة 20 دقيقة ، إزالة طاف يمكن الكشف عنها ، أو وضع طاف في - 20 ℃ أو - 80 ℃ التخزين ، ولكن ينبغي تجنب تكرار التجميد والذوبان .

ملاحظة : انحلال الدم في العينة سوف تؤثر على نتائج الاختبار ، لذلك لا ينبغي أن يكون اختبار انحلال الدم في العينة .

الكواشف والمعدات اللازمة ولكن لم تقدم

• انزيم أداة وسم ( 450nm )

• عالية الدقة تغذية عينة بندقية رئيس : 0.5-10ul 2-20ul , 20-200ul , 200-1000ul

• درجة حرارة الغرفة

• الماء المقطر أو منزوع الأيونات الماء

تكوين عدة

رات الميلاتونين ، طن متري إليسا كيتإعدادالحواشيس

1 - تركيز المعايير : 80 , 40 , 20 , 10 , 5 , 2.5 بيكوغرام / مل ، على التوالي .

2 . بعد الكثير من العينات العادية ، والتركيز الطبيعي قيمة العينة كلها ضمن نطاق الكشف التي تقدمها عدة . إذا كان جزء من قيمة العينة يتجاوز تركيز زوي ، عينة يمكن أن تضعف بشكل صحيح قبل إجراء التجربة .

الاحتياطات

• الحفاظ على درجة الحرارة في الوقت المحدد بدقة لضمان دقة النتائج . جميع الكواشف يجب أن تصل إلى درجة حرارة الغرفة 20-25 ℃ قبل استخدامها . الحفاظ على الكاشف في الثلاجة مباشرة بعد الاستخدام .

• غسل لوحات بشكل غير صحيح يمكن أن يؤدي إلى نتائج غير دقيقة . تأكد من أن السائل في حفرة جافة قدر الإمكان قبل إضافة الركيزة . لا تدع micropores تجف في عملية الاحتباس الحراري .

• القضاء على بقايا السائل بصمة الاصبع في الجزء السفلي من لوحة ، وإلا تؤثر على قيمة التطوير التنظيمي .

• الركيزة الحل يجب أن يكون عديم اللون أو لون فاتح جدا ، الركيزة الحل الذي تحول الأزرق لا يمكن استخدامها .

• تجنب التلوث عبر الكواشف والعينات لتجنب نتائج خاطئة .

• تجنب التعرض المباشر لأشعة الشمس القوية أثناء التخزين الحراري .

• التوازن في درجة حرارة الغرفة ثم فتح الختم لمنع قطرات الماء من التكثيف على لوحة الباردة .

• أي رد فعل كاشف لا يمكن الاتصال مع غاز قوي المنبعثة من التبييض المذيبات أو التبييض المذيبات . أي عنصر التبييض يمكن أن تدمر النشاط البيولوجي من رد فعل كاشف في عدة .

• لا يمكن استخدام المنتج منتهية الصلاحية .

• إذا كان من الممكن أن ينتشر المرض ، جميع العينات يجب أن تدار بشكل جيد ، والعينات المجهزة وفقا للإجراءات المنصوص عليها وأجهزة الاختبار .

إعداد الكواشف

عدة مأخوذة من البيئة المبردة يجب أن تكون متوازنة في درجة حرارة الغرفة قبل استخدامها .

تمييع 20 × غسل العازلة : الماء المقطر المخفف في 1 : 20 ، وهذا هو ، 1 × 20 غسل العازلة بالإضافة إلى 19 أجزاء من الماء المقطر .

خطوات التشغيل

1. بعد 20 دقيقة من التوازن في درجة حرارة الغرفة ، تحتاج إلى إزالة اللوح من احباط الالومنيوم حقيبة .

2. معيار عينة الثقوب الثقوب مع تركيزات مختلفة من 50 ميكرولتر .

3. 50 μ ل أضيفت إلى عينة حفرة . ثقب فارغ لا تضيف .

4. وبالإضافة إلى الثقوب فارغة ، هورس راديش پراكسيداز ( HRP ) المسمى الكشف عن الأجسام المضادة 100 ميكرولتر أضيفت إلى كل ثقب من ثقب عينة القياسية ، رد فعل الثقوب كانت مختومة من قبل ختم لوحة الغشاء .

5. تخلص من السائل ، ورقة ماصة بات الجافة ، كل حفرة مليئة سائل الغسيل ( 350 ميكرولتر ) ، لا تزال قائمة لمدة 1 دقيقة ، ورمي سائل الغسيل ، ورقة ماصة بات الجافة ، حتى تكرار غسل المجلس 5 مرات ( كما يمكن استخدام آلة غسل المجلس غسل المجلس ) .

6. ركائز أ و ب أضيفت إلى كل مسام في 50 ميكرولتر ، على التوالي .

7. في غضون 15 دقيقة ، التطوير التنظيمي قيمة كل حفرة في 450nm تم قياسها .

حساب النتائج التجريبية

أخذ التطوير التنظيمي قيمة قياس مستوى الإحداثي السيني و تركيز قيمة معيار تنسيق ، رسم المنحنى القياسي على تنسيق ورقة أو البرامج ذات الصلة ، والحصول على معادلة الانحدار الخطي ، محل التطوير التنظيمي قيمة العينة في المعادلة ، وحساب تركيز العينة .

أداء عدة

• نطاق الكشف : 2.5 بيكوغرام / مل - 80 بيكوغرام / مل .

• الحساسية : انخفاض تركيز أقل من 0.1 بيكوغرام / مل .

• خصوصية : لا عبر التفاعل مع غيرها من نظائرها الهيكلية القابلة للذوبان .

• التكرار : معامل الاختلاف في لوحة أقل من 10 ٪ ، معامل الاختلاف بين لوحات أقل من 15 ٪ .

إيضاحات

لأن الظروف الحالية و المستوى العلمي والتكنولوجي لا يمكن تحديد وتحليل جميع المواد الخام الموردة من قبل جميع الموردين ، قد يكون هناك بعض المخاطر التقنية على جودة المنتج .

• النتائج النهائية ترتبط ارتباطا وثيقا بصحة الكواشف ، عملية ذات الصلة من المجرب و البيئة التجريبية في ذلك الوقت .

• دفعات مختلفة من نفس المنتج قد تختلف قليلا ، مثل : الكشف عن الحد ، والحساسية ، لون الوقت ، وما إلى ذلك ، وفقا لتعليمات من عدة عمليات تجريبية ، النسخة الإلكترونية من دليل الموقع كمرجع فقط .

• فقط عندما يتم استخدام مجموعة كاملة من الكواشف ، يمكن ضمان تأثير الكشف ، وغيرها من المنتجات التجارية لا يمكن أن تكون مختلطة . نتائج اختبار * يمكن الحصول عليها إلا من خلال التقيد الصارم تعليمات الاختبار من هذه المجموعة .

• شركتنا هي المسؤولة فقط عن عدة نفسها ، وليس مسؤولا عن استهلاك العينة الناجمة عن استخدام هذه المجموعة ، يرجى النظر في إمكانية استخدام العينة قبل الاستخدام ، والحفاظ على ما يكفي من العينات .

• خليط من الأنسجة والخلايا المستخرجة من المواد الكيميائية يمكن أن يؤدي إلى انحرافات في اليسا النتائج .

• إذا كانت العينة هي خلية ثقافة supernatants ، وهناك العديد من العوامل المزعجة ، مثل حالة الخلية ، عدد الخلايا ، وقت أخذ العينات ، وهلم جرا .

• بعض البروتينات الطبيعية أو البروتينات المؤتلف ، بما في ذلك prokaryon و eukaryon البروتينات المؤتلف ، قد لا يتم الكشف عنها بسبب عدم تطابق مع الكشف عن الأجسام المضادة و التقاط الأجسام المضادة المستخدمة في هذا المنتج .