لحم الخنزير circovirus نوع 1 صبغ مضان الكمية PCR كيت

لحم الخنزير circovirusمضان الكمية PCR كيت
فيروس الخنزير 1 (PCV-1)

منتوج & سمة :
لحم الخنزير circovirus نوع 1 صبغ مضان الكمية PCR كيتمع الخصائص التالية :

1 - على استعداد لاستخدام ، يحتاج المستخدم فقط إلى تقديم عينات من الفيروس .

2 - الاشعال محددة مصممة على أساس الحفاظ على تسلسل من لحم الخنزير circovirus نوع 1 صبغ الأسلوب .

3 . حساسية يمكن أن تصل إلى مئات النسخ / ردود الفعل .

4 - أنبوب الفلورسنت الكمية PCR للكشف عن تجنب التلوث اللاحقة .

5 . هذه المجموعة هي كافية للحصول على مضان الكمية PCR ( fq-pcr ) من 20 μ ل 50 مرة .

6 . هذا المنتج هو مناسبة فقط للبحث العلمي ، لا يمكن أن تستخدم في التشخيص السريري .

النقل والتخزينس انخفاض درجة حرارة النقلالحفاظ على درجة الحرارة لمدة سنة واحدةمنتدى

كاشف الذاتيس قالب الحمض النووي ، 10 × روكس ( وفقا لنموذج المقرر ، انظر على وجه التحديد طريقة الاستخدام ) .

طريقة الاستخدام واحدمخففبكر السيطرة الإيجابيةمععلى سبيل المثال 10-e2-10e7 نسخ / μ ل هذه 6 10 مرات تخفيف

1 . ملاحظة : بسبب تركيز عال جدا من المنتجات القياسية ، بعد تخفيف العمليات يجب أن تتم في مناطق منفصلة ، يجب أن لا تلوث العينات أو المكونات الأخرى في هذه المجموعة ) . من أجل زيادة استقرار المنتج وتجنب انتشار مسببات الأمراض المعدية ، هذا المنتج لا يوفر عينة حية إيجابية السيطرة ، فقط يوفر جزء الحمض النووي التي يمكن استخدامها مباشرة إيجابية السيطرة .

2 . مارك 6 أنابيب الطرد المركزي ، 7 ، 6 ، 5 ، 4 ، 3 ، 2 ، على التوالي .

3 - إضافة 45 μ ل fluorescence-pcr قالب خاص مخفف مع بندقية رئيس الأساسية ، على التوالي .

4 - 5 μ ل 1 × 10 E8 نسخة / μ ل السيطرة الإيجابية أضيفت إلى الأنبوب رقم 7 ، و 1 × 10 E7 نسخة / μ ل السيطرة الإيجابية التي تم الحصول عليها . ضعي الثلج جانبا .

5 - تغيير بندقية الرأس ، إضافة 5 μ ل 1 × 10e7 نسخة / μ ل السيطرة الإيجابية ( الحصول على تخفيف الخطوة السابقة ) في أنبوب 6 ، صدمة 1 دقيقة كاملة ، والحصول على 1 × 10e6 نسخة / μ ل السيطرة الإيجابية . ضعي الثلج جانبا .

6 - تغيير بندقية الرأس ، إضافة 5 μ ل 1 × 10 × 6 نسخة / μ ل السيطرة الإيجابية في أنبوب 5 ، صدمة 1 دقيقة كاملة ، والحصول على 1 × 10 نسخة / μ ل السيطرة الإيجابية . ضعي الثلج جانبا .

7 - كرر العملية أعلاه حتى 6 تخفيف الضوابط الإيجابية التي تم الحصول عليها . ضعي الثلج جانبا .

عينةإعداد الحمض النوويس

8 - إذا كان هناك ن عينات ، يجب تعيين ن + 2 استخراج ، أكثر من واحد هو جهاز كمبيوتر ( عينة إعداد مراقبة إيجابية ) ،

نعمNC ( السلبية السيطرة على إعداد العينة ) . يمكن استخدام PCR إيجابية السيطرة على 10 ميكرولتر في الخطوة 4 ( تركيز 1 × 10 نسخة / ميكرولتر ، 10 ميكرولتر ما يعادل 10000 نسخة ) أو 5 ( تركيز 1 × 10 نسخة / ميكرولتر ، 10 ميكرولتر ما يعادل 10000 نسخة ) بالإضافة إلى كمية معينة من الماء لجعل الحجم الإجمالي كما هو مطلوب في كل إعداد ، وذلك باستخدام جهاز كمبيوتر .

9. تنقية عينة من self-selective طريقةDNA， هذه المجموعة هي متوافقة مع معظم مجموعات الحمض النووي الفيروسي في السوق . يمكنك أيضا شراء الشركة من نوع أنبوب فيروس dnaout أو ترقية نسخة من فيروس العمود dnaout . . . . . . . هذه المجموعة هي خالية من فيروس أنبوبي dnaout 15 مرةمنتدى

ثالثاً - الإعدادرد فعل QPCR ( نظام 20 ميكرولتر ، التي أجريت في غرفة إعداد العينة ) :

10. إذا كان فقطن + 9 أنابيب الاسترداد المسمى ، ن + 2 تستخدم للحصول على ن + 2 أنابيب الاسترداد .

عينةواحد كان يستخدم PCR السلبية السيطرة ، و 6 كانت تستخدم PCR إيجابية السيطرة . إذا كنت تفعل ذلك مرتين أو ثلاث مرات ، رد فعل عدد من الإعدادات بنسبة 2 أو 3 مرات .

11. إضافة المكونات في علامة أنبوب على النحو المبين في الجدول أدناه ( هذا الجدول يكرر مرة واحدة فقط - بعد الانتهاء من أنبوب العينة و المقارنة السلبية ، يجب أن تكون العينة إيجابية حتى يتم تخزين جميع الأنابيب مع غطاء ) .

الحواشيفقط abi7500 7700 , و 7900 الصكوك تحتاج إلى استخدام روكس مثل السيطرة . iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene3000、RotorGene 6000 و lightcycler480 ) لا تحتاج إلى استخدام روكس ، ثم استبدال المياه .

12 - بعد تغطية الجهاز ، وفقا للمعايير التالية من أجل الاسترداد ( محددة PCR المعلمات يمكن أن تكون مختلفة وفقا لمختلف الأجهزة الأمثل ) .

13 - جمع البيانات

العملية تتم وفق الإجراءات الموصى بها من قبل الجهاز . هذا المنتج يحتوي على الأصباغ الفلورية فيفي الحمض النووي ، أقصى طيف الامتصاص في 471 نانومتر ، أقصى طيف الامتصاص في 500 نانومتر ، أقصى طيف الانبعاث في 530 نانومتر عند الجمع بين الحمض النووي .

رابعاً - معالجة البيانات :

14 - إذا كان هذا كاشف عدة تستخدم في الكشف الكمي ، سجل قيمة إيجابية السيطرة على تركيز المحور الأفقي ، CT قيمة المحور الطولي ، رسم المنحنى القياسي . ثم سجل قيمة تركيز الحمض النووي من العينة التي تم الحصول عليها من منحنى القياسية باستخدام التصوير المقطعي قيمة العينة التي يمكن قياسها .

15 - إذا كان هذا كاشف عدة تستخدم في الكشف النوعي ، الحكم فقط إيجابية أو سلبية ، ثم السيطرة السلبية CT يجب أن يكون أكبر من أو يساوي 40 . يجب أن يكون هناك زيادة اللوغاريتم مضان ، نموذجية منحنى التضخيم ، CT قيمة أقل من أو يساوي 30 . عينة اختبار سلبي إذا كان التصوير المقطعي هو أكبر من أو يساوي 40 و إيجابية إذا كان أقل من أو يساوي 35 . إذا كان بين 35 و 40 ، كرر ذلك مرة أخرى . CT قيمة تكرار التجارب السلبية إذا كان أكبر من أو يساوي 40 ، إذا كان أقل من 40 ، إيجابية .

لأغراض البحث العلمي فقط ، لا تستخدم في الفحص السريري والعلاج .