الماوس حمض ميريستيك إليسا كيت

الماوس حمض ميريستيك إليسا كيت

دليل الاستخدام

مبدأ الكشف

إليسا كيت مع خطوة واحدة ساندويتش مزدوجة الضد )إليسا).حزمة مقدمايكون肉豆蔻酸（ميريستيكاسيدوالأجسام المضادة هي مغلفة في micropores ، عينة ، المعيار ،HRP المسمى الأجسام المضادة التي تم الكشف عنها من قبل الثقافة الحارة وغسلها . TMB هو تحويلها إلى اللون الأزرق تحت حفز البيروكسيديز ، وأخيرا الأصفر تحت تأثير حمض . عمق اللون في العينة肉豆蔻酸（ميريستيكاسيدوقدمارتباط إيجابي . باستخدام انزيم العلاماتالامتصاصية ( التطوير التنظيمي ) في الطول الموجي 450nm عازمة .

طريقة جمع ومعالجة وحفظ العينات

المصل : استخدام أنبوب اختبار دون پايروجن و الذيفان الداخلي ، وتجنب أي تهيج الخلايا أثناء العملية . بعد جمع الدم ، 3000 يتحول إلى الطرد المركزي لمدة 10 دقائق لفصل المصل من خلايا الدم الحمراء بسرعة وبدقة .

2 - البلازما : يدتا ، سيترات أو الهيبارين لمنع تخثر الدم . 3000 دورة في الدقيقة الطرد المركزي لمدة 30 دقيقة .

3 . طاف : 3000 دورة في الدقيقة الطرد المركزي لإزالة الجزيئات والبوليمرات .

4 - خليط الأنسجة : إضافة كمية مناسبة من الملح الطبيعي إلى الأنسجة الهريس . 3000 دورة في الدقيقة الطرد المركزي لمدة 10 دقائق .

5 . التخزين : إذا كان جمع العينات لا يمكن الكشف عنها في الوقت المناسب ، يرجى ملء في وقت واحد ، وتجميد في - 20 ℃ ، وتجنب تكرار التجميد والذوبان ، في درجة حرارة الغرفة ، وضمان أن العينة متحللة بالتساوي .

البنود الخاصة

1. جهاز وضع العلامات )450 نانومتر)

2. عالية الدقة تغذية عينة وبندقية رئيس :0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. درجة حرارة الغرفة

الاحتياطات التشغيلية

1. كيت المحفوظة في2-8 ℃ استخدام ميزان حرارة الغرفة الأمامية لمدة 20 دقيقة . تركيز سائل الغسيل مأخوذة من الثلاجة يمكن أن تبلور ، الذي ينتمي إلى ظاهرة طبيعية ، حمام الماء يسخن حتى تبلور يذوب قبل استخدامها .

2. لوحات لا تستخدم في التجربة يجب أن توضع مرة أخرى في حقيبة مختومة ، مختومة ( انخفاض درجة حرارة التجفيف ) التخزين .

3. تركيز0 يمكن أن تعتبر سلبية أو فارغة . عينة مخففة خمس مرات كما هو موضح في التعليمات ، والنتيجة النهائية هي مضروبة في خمس مرات من العينة الفعلية التركيز .

4. بدقة وفقا للوقت المحدد في التعليمات ، إضافة كمية السائل و تسلسل الحارة العملية .

5. يهز جميع مكونات السائل جيدا قبل الاستخدام .

تكوين عدة

ملاحظة : المعيار )s0-s5 ) التركيزمن أجلو50、100、200、400و800 pg / مل

إعداد الكواشف

تخفيف 20 × غسل العازلة : الماء المقطر المخفف من 1 : 20 ، وهذا هو ، 20 × غسل العازلة بالإضافة إلى 19 أجزاء من الماء المقطر .

طريقة غسل المجلس

1. دليل غسل لوحة : رمي السائل في حفرة ، ملء كل حفرة مع سائل الغسيل ، لا يزالبعد 1 دقيقة ، صب السائل في حفرة ، بات الجافة على ورقة ماصة ، ثم يغسل المجلس 5 مرات .

2. التلقائي آلة الغسيل : حقن محلول الغسيل في كل حفرة350μL， نقع لمدة 1 دقيقة ، وغسل المجلس 5 مرات .

خطوات التشغيل

1. من درجة حرارة الغرفة التوازنبعد 20 دقيقة من الألومنيوم احباط كيس من اللوح ، اللوح المتبقي مع الختم الذاتي حقيبة وضعت مرة أخرى إلى 4 ℃ . . . . . . .

2. معيار عينة الثقوب الثقوب مع تركيزات مختلفة تضاف على التوالي .50 ميكرولتر؛

3. إضافة عينة اختبار عينة حفرة10μL， إضافة 40 ميكرولتر من محلول مخفف . ثقب فارغ لا تضيف .

4. هورس راديش پراكسيداز أضيفت إلى كل مسام من معيار عينة المسام ، باستثناء الثقوب فارغة )( HRP ) المسمى الأجسام المضادة 100 μ ل ، رد فعل الثقوب كانت مختومة من قبل ختم لوحة الغشاء .

5. التخلص من السائل ، ورقة ماصة بات الجافة ، كل حفرة مليئة سائل الغسيل ، لا يزال1min， رمي بعيدا غسل السائل ، ورقة ماصة بات الجافة ، حتى تكرار غسل المجلس 5 مرات ( كما يمكن استخدام آلة غسل غسل المجلس المجلس ) .

6. إضافة الركيزة في حفرةأ و ب 50 ميكرولتر ، على التوالي ، احتضنت في 37 ℃ لمدة 15 دقيقة .

7. إضافة إنهاء السائل في كل حفرةفي غضون 15 دقيقة ، التطوير التنظيمي قيمة كل ثقب في الطول الموجي 450nm عازمة .

نتيجة الحكم

رسم المنحنى القياسيفي إكسل ورقة العمل ، مع التركيز على مستوى الإحداثي السيني ، المقابلة التطوير التنظيمي قيمة الإحداثي الطولي ، منحنى الانحدار الخطي من مستوى المنتج هو رسمها .
الماوس حمض ميريستيك إليسا كيت