- البريد الإلكتروني
- الهاتف
-
العنوان
شنغهاي Qifa الكواشف التجريبية المحدودة
شنغهاي كيفا الكواشف التجريبية المحدودة
شنغهاي Qifa الكواشف التجريبية المحدودة
بن أيوب كلينتاك-إستسلسل الإنزيمات المؤتلف البروتين المؤتلف التي تم الحصول عليها عن طريق تنقية متعددة الخطوات .
تعريف النشاطوحدة نشطة 72℃تحت 1 × AM PCR العازلة1و30 دقيقةالداخلية سوف 10 نامول dNTPكمية الانزيمات اللازمة لدمج حمض غير قابلة للذوبان المواد .مميزات
1 . مناسبة خاصة ddNTP إدراج رد فعل تعديل النيوكليوتيدات
2 . مقارنة مع طول تاك الحمض النووي بوليميريز ، وانخفاض نشاط انزيم محددة
نطاق التطبيق
ddNTP طريقة الإنهاءالحمض النووي التسلسل )تسلسل الجيلو
pyrophosphoric التحلل فعل طريقة التمديد SNP تحليل
مراقبة الجودة
بعد رقابة صارمة على الجودة والتفتيش ، لضمان أن المنتج لديه أعلى نشاط ونقاء .
انزيم التخزين العازلة
20 ملم Tris-HCl (درجة الحموضة 8.0) ، 100 ملم KCl ، 1 ملم DTT ، 0.1 ملم EDTA ، 0.5 ٪ Nonidet P40 ، 0.5 ٪ Tween20 ، و 50 ٪ الجليسيرول.
تطبيق المثال
ردود الفعل التالية على سبيل المثال 50 ميكرولترستاندرد الـ PCRنظام , لأنّ مرجع فقط . فعلي الـ PCRأفضل رد فعل الشرط يجب أن يكون الأمثل وفقا لحجم القالب ، التمهيدي و الهدف جزء .
( 1 )إعداد نظام رد الفعل على النحو التالي
عنصر |
حجم/ ميكرولتر |
التركيز النهائي |
10 × AM PCR العازلة 1 |
5 |
س |
dNTPs( أ )2.0 ممو |
5 |
0.2 ملم |
التمهيدي F( أ )10 ميكرومو |
1.5 |
0.3 ميكروم |
التمهيديR( أ )10 ميكرومو |
1.5 |
0.3 ميكروم |
قالب |
قابل للتغير* |
و |
كلينتاك-إستسلسل الإنزيمات )5U / ميكرولترو |
0.5 |
2.5U |
ddH2O |
متغير |
و |
مجموع حجم |
50 |
و |
* قالب الحمض النووي الجرعة المعلمة ( 50 ميكرولتر نظام رد الفعل ) :
الجينوم البشريDNA100-1000 ng ; الحمض النووي الجينوم الميكروبي 10-100ng ;بكر المنتجات المميزة غضب كانجان ، 1ng-10%ن الحمض النووي البلازميدي 5-30 نانغ ؛ cDNA من رد فعل RT 1-5 ميكرولتر.
( 2 )الرد على الشروط التالية
95℃ |
2-5 دقيقة |
|
95℃ |
15 ثانية |
25-35 دورات |
55-72℃ |
20 ثانية |
|
72℃ |
1kb / دقيقة |
|
72℃ |
5 دقايق |
( 3 )الاغاروز الكهربائي الهلاميالـ PCR المنتج ، أو إجراء العملية التالية حسب الغرض من التجربة .
الاحتياطات1.PCR حالة النوع البري تاك الحمض النووي بوليميريز مماثلة محددة الحمض النووي وقد يلزم تحسين استجابة التسلسل .2 . تضخيم قدرة هذا الانزيم هو أعلى من ذلك من النوع البري . Tق DNA بوليميريز انخفض .PCR انخفاض الإنتاج ، لا ينصح للاستخدام الروتيني PCRمنتدى3 - لا تستخدم تقمان طريقة التحقيق q-PCRمنتدى