النوع الثاني من الخلايا الظهارية السنخية البشرية

الإنسان الخلايا الظهارية القصبة الهوائية

الخصائص الأساسية للخلايا

الثقافة المتوسطة : تحتوي على سلاح ، إضافات النمو ، penicillin ، streptomycin ، الخ .

تغيير التردد : تغيير كل 2-3 أيام

الخصائص : 2-3 أجيال

عصارة الجهاز الهضمي : 0.25 ٪ pancreaticase دان

الثقافة شرط : بخار المرحلة : الهواء ، 95 ٪ ؛ CO2，5%

الخلايا الظهارية الإنسان القصبة الهوائية المعزولة من أنسجة القصبة الهوائية . القصبة الهوائية ، جزء من الجهاز التنفسي . أنبوب اسطواني مع شقة الجدار الخلفي . في نهاية العلوي من العمود الفقري العنقي السادس شقة الحافة السفلى ، مع الغضروف الحلقي . أسفل العمود الفقري الصدري الرابع والخامس ( أي ما يعادل زاوية الصدري الطائرة ) مفرق ، اليسار واليمين الشعب الهوائية الرئيسية ، فرع يسمى فرع القصبة الهوائية . القصبة الهوائية يتكون أساسا من 14-16 semicircular الغضاريف ، والتي هي مرنة ، الغضروف هو على شكل " ج " الغضروف الدائري ، الشق الخلفي ، كل غضروف حلقة متصلة بواسطة الأربطة ، الشق الخلفي حلقة متصلة بواسطة العضلات الملساء و النسيج الضام الكثيف ، والحفاظ على استمرار فتح الدولة . تجويف بطانة مع الغشاء المخاطي ، السطح مغطى أهداب ظهارة المخاط يفرز من الغشاء المخاطي يمكن أن تنضم إلى استنشاق الغبار الجسيمات في الهواء ، أهداب باستمرار يتأرجح نحو البلعوم المخاط والغبار التفريغ ، من أجل تنقية استنشاق الغاز . ظهارة القصبة الهوائية هو خط الدفاع الأول في مجرى الهواء الاتصال مع البيئة الخارجية ، ليس فقط الخلايا المستهدفة التي تعمل مع مختلف مسببات الأمراض و الوسطاء التحريضية ، ولكن أيضا بمثابة الخلايا المستجيب لتجميع والإفراج عن مختلف الوسطاء التحريضية السيتوكينات المشاركة في التهاب الشعب الهوائية و الاستجابة المناعية . الخلايا الظهارية القصبة الهوائية الأولية في المختبر تلعب دورا هاما في البحوث الأساسية والسريرية بسبب التشابه الكبير بين الخلايا الظهارية القصبة الهوائية والأنسجة في الجسم الحي .

فكرة عزل وزراعة الخلايا الأولية :

استخراج - عزل - زراعة - تحديد

أولا ، تم استخراج الأنسجة من الجسم ، ثم تعامل مع pancreatinase كولاجيناز / تفريق في خلية واحدة ، ثم تم تربيتها في مناسبة متوسطة الثقافة .

الخطوات التجريبية :

ذكر الفئران SD 7-10 أيام أعدموا بعد خلع عنق الرحم العمود الفقري ، نقع في 75 ٪ من الإيثانول لمدة 3-5 دقائق .

الدماغ كله مأخوذ بعد فتح تجويف الجمجمة ، ثم يوضع في برنامج تلفزيوني طبق زجاجي يحتوي على precooling لإزالة المخيخ و mesencephalic . . . . . . .

المتداول ببطء في نصف الكرة المخية على ورقة الترشيح الجاف لإزالة الأوعية الدموية الكبيرة من الحنون و سحائي ، ثم وضعها في برنامج تلفزيوني جديد الزجاج طبق الثقافة مع precooling . . . . . . .

استخدام ملقط تشريح غرامة لإزالة المادة البيضاء في الدماغ ، الأوعية الدموية الكبيرة المتبقية و السحايا الناعمة ، والحفاظ على القشرة المخية .

القشرة المخية كانت مجزأة إلى حوالي 1 مم 3 في dmem ، ثم أضيفت إلى 50 مل أنبوب الطرد المركزي ، مختلطة مع انزيم أنا ( 0.05-0.1 ٪ كولاجيناز النوع الثاني ، 0.025-0.05 ٪ كولاجيناز النوع الرابع ، 200-400u dnasei ) في 37 ℃ لمدة 1-1.5 ساعة .

الطرد المركزي في درجة حرارة الغرفة 1 000 × ز لمدة 8 دقائق ، وإزالة طاف . . . . . . .

إضافة 20 ٪ جيش صرب البوسنة في هطول الأمطار ، تماما مختلطة ، 1 000 × ز ، 20 دقيقة ، 4 ℃ الطرد المركزي ، إزالة طاف . . . . . . .

إضافة 4ml مختلطة انزيم الثاني ( 0.05-0.1 ٪ كولاجيناز / dispersase ، 0.05-0.1 ٪ كولاجيناز النوع الأول ، 100-300u dnasei ) إلى هطول الأمطار ، تعليق ، والخلط ، والهضم في حمام مائي في 37 ℃ 0.5-1h 700 × ز في درجة حرارة الغرفة الطرد المركزي لمدة 6 دقائق ، وإزالة طاف .

إضافة 2 مل dmem الثقافة المتوسطة إلى هطول الأمطار ، ثم وضع على 12ml 50 ٪ بيركول ( 25 ، 000 × ز ، 60 دقيقة ، 4 ℃ ) مع التدرج المستمر ، 1000 × ز ، 4 ℃ الطرد المركزي لمدة 10 دقائق .

إن dmem شطف مرتين ( الطرد المركزي 1000 × دورة في الدقيقة ، 6min ، درجة حرارة الغرفة ) لإزالة طاف . . . . . . .

dmem متوسطة ( 20 ٪ FBS ، 4ug / مل ) أضيفت إلى تعليق مرة أخرى ، ثم تم تلقيح في طبق بتري الخلايا المحتوية على 5 ٪ من مصل الفئران في 37 ℃ لمدة 24 ساعة ، ثم مختلطة متوسطة الثقافة تم استبداله في اليوم التالي .

ملاحظة :

1 - الثقافة يمكن الحفاظ عليها لمدة 3-6 أشهر في 4 ℃ . . . . . . .

2 - الحفاظ على عملية العقيم أثناء زراعة الخلايا .

3 - أثناء مرور الثقافة ، الهضم وقت يي الانزيم لا ينبغي أن تكون طويلة جدا ، وإلا فإنه سوف يؤثر على خلية التصاق ونمو الدولة .

4 - تشير إلى أن العملاء الحصول على الخلايا قبل 3 أيام من كل عدد من الصور الفوتوغرافية من الخلايا ، وتسجيل حالة الخلية لتسهيل التواصل مع قسم التكنولوجيا ؛ يرجى الاتصال بنا في الوقت المناسب للحصول على معلومات مفصلة عن حالة محددة من الخلايا الحساسة ، حتى أن الفنيين لدينا يمكن أن تتبع ، زيارة مرة أخرى حتى يتم حل المشكلة .

منتجات الشركة للبيع :