- البريد الإلكتروني
- الهاتف
-
العنوان
منطقة بودونغ الجديدة ، شنغهاي
شنغهاي بيبو التكنولوجيا الحيوية المحدودة
موت الخلايا المبرمج للخلايا Staun الخامس طقم إليسا
قابلة للتفاوضتحديث05/06
- نموذج
- طبيعة المصنع
- المنتجين
- فئة المنتج
- مكان المنشأ
نظرة عامة
Staun v-apc موت الخلايا المبرمج للخلايا كشف عدة هو CA2 + تعتمد فسفوليبيد ملزمة البروتين مع الوزن الجزيئي 35-36kd ، والتي يمكن أن تربط مع تقارب عالية محددة بس انقلبت خارج الغشاء أثناء موت الخلايا المبرمج . ملاحظة : الشتر يحدث قبل نواة الخلية ، الحمض النووي الشظايا و موت الخلايا المبرمج البروتين ذات الصلة ، مما يجعل من الممكن ربط Staun الخامس مع ملاحظة في وقت مبكر من موت الخلايا المبرمج . . . . ـ
تفاصيل المنتج
Staun الخامس المبرمجكشف عدة
حفظ درجة الحرارة :2-8 ℃ تجنب الضوء
Staun الخامس المبرمجكشف عدةالاحتياطات
1 - لا تستخدم على المدى الطويل - 20 ℃ التخزين .
annexin v-apc تلطيخ الحل يتجنب تكرار التجميد تحسن . العديد من التجميد تحسن يمكن أن يؤدي إلى الفشل .
عندما v-apc Stannexin تلطيخ الحل يحتاج إلى الحفاظ على المدى الطويل ، يمكن أن تكون معبأة في كميات صغيرة - 20 ℃ . . . . . . .
4 - بعد فتح كاشف ، يرجى استخدام في أقرب وقت ممكن !
annexin v-apc تلطيخ الحل يتجنب تكرار التجميد تحسن . العديد من التجميد تحسن يمكن أن يؤدي إلى الفشل .
عندما v-apc Stannexin تلطيخ الحل يحتاج إلى الحفاظ على المدى الطويل ، يمكن أن تكون معبأة في كميات صغيرة - 20 ℃ . . . . . . .
4 - بعد فتح كاشف ، يرجى استخدام في أقرب وقت ممكن !
فترة الصلاحية
سنة
طريقة الكشف
قياس التدفق الخلوي ، FCM
ليزر متحد البؤر
3 - مجهر فلوري
ليزر متحد البؤر
3 - مجهر فلوري
عينة مناسبة
تعليق خلية
2 - خلية ملتصقة
2 - خلية ملتصقة
ميزات المنتج
1 . مريحة : يمكن الكشف عنها بواسطة التدفق الخلوي أو مضان المجهر .
2 . سريعة : 1 ساعة لإكمال التجربة .
3 - دقة : يمكن أن تميز بدقة الخلايا الحية والخلايا المبرمج ونخر الخلايا ، عد نسبة كل مجموعة من الخلايا .
2 . سريعة : 1 ساعة لإكمال التجربة .
3 - دقة : يمكن أن تميز بدقة الخلايا الحية والخلايا المبرمج ونخر الخلايا ، عد نسبة كل مجموعة من الخلايا .
تطبيق المنتج
قياس التدفق الخلوي ، FCM
ليزر متحد البؤر
3 - مجهر فلوري
ليزر متحد البؤر
3 - مجهر فلوري
إعداد الصك
قياس التدفق الخلوي أو مضان المجهر أو ليزر متحد البؤر
2 - أجهزة الطرد المركزي
3 . ماصة
4 - الثلاجات
صندوق الثلج
2 - أجهزة الطرد المركزي
3 . ماصة
4 - الثلاجات
صندوق الثلج
إعداد الكواشف
برنامج تلفزيوني العازلة ( الرقم الهيدروجيني 7-4 ، 10mm حمض الفوسفوريك العازلة المستخدمة في المختبرات ( 1x ) .
2 . أو hbss ( هانك حل الملح )
2 . أو hbss ( هانك حل الملح )
إعداد المواد الاستهلاكية
1 . أنابيب الطرد المركزي
2 . شفط
3 . المتاح القفازات
4 . رقائق الألومنيوم
2 . شفط
3 . المتاح القفازات
4 . رقائق الألومنيوم
Staun الخامس المبرمجكشف عدةاستخدام الاحتياطات
1 . المسمار غطاء أنبوب كاشف كاشف في الدقيقة قبل فتح الغطاء لفترة وجيزة الطرد المركزي ، السائل على الجدار الداخلي من غطاء أنبوب أسفل ، لتجنب فقدان السائل عند فتح الغطاء يؤدي إلى عدم كفاية كاشف الكمية .
2 . التعامل مع الخلايا يجب أن تكون حذرا ، في محاولة لتجنب تلف الخلايا البشرية . قوة الطرد المركزي هي صغيرة قدر الإمكان دون فقدان الخلية ، الخلية هو تعليق العمل ينبغي أن تكون لينة ، وتجنب تكرار ضربة عنيفة . لا دوامة مذبذب .
annexin v-fitc ( الخ ) و propidium iodide ( الخ ) هي مواد حساسة للضوء ، يرجى الانتباه إلى تجنب الضوء أثناء العملية ، والتقليل إلى أدنى حد من التعرض للضوء . إذا لزم الأمر ، استخدام الجليد مربع مع غطاء أو احباط الالومنيوم ورقة لتجنب الضوء . بعد وضع العلامات ، الخلايا تبقى في ضوء تجنب البيئة . التعرض لفترة قصيرة من الضوء ( أقل من 30 ثانية ) أثناء نقل مقبول .
4 - موت الخلايا المبرمج هو عملية سريعة وديناميكية ، ثم تحليلها مباشرة بعد تلطيخ .
2 . التعامل مع الخلايا يجب أن تكون حذرا ، في محاولة لتجنب تلف الخلايا البشرية . قوة الطرد المركزي هي صغيرة قدر الإمكان دون فقدان الخلية ، الخلية هو تعليق العمل ينبغي أن تكون لينة ، وتجنب تكرار ضربة عنيفة . لا دوامة مذبذب .
annexin v-fitc ( الخ ) و propidium iodide ( الخ ) هي مواد حساسة للضوء ، يرجى الانتباه إلى تجنب الضوء أثناء العملية ، والتقليل إلى أدنى حد من التعرض للضوء . إذا لزم الأمر ، استخدام الجليد مربع مع غطاء أو احباط الالومنيوم ورقة لتجنب الضوء . بعد وضع العلامات ، الخلايا تبقى في ضوء تجنب البيئة . التعرض لفترة قصيرة من الضوء ( أقل من 30 ثانية ) أثناء نقل مقبول .
4 - موت الخلايا المبرمج هو عملية سريعة وديناميكية ، ثم تحليلها مباشرة بعد تلطيخ .
5 - استخدام v-fitc Staun عدة للكشف عن موت الخلايا المبرمج في الخلايا الحية . لا تثبيت الخلايا ، عملية التثبيت يمكن أن تتداخل مع النتائج .
طريقة الاستخدام
عينة صبغ :
1 . الطرد المركزي جمع تعليق الخلايا . الطرد المركزي الطرد المركزي 300 × ز - 500 × ز القوة ، 2-8 درجة مئوية ، 5 دقائق ، التخلي عن وسائل الإعلام .
2 . غسل الخلايا مرتين مع البرد برنامج تلفزيوني . ( 300 × ز - 400 × ز ، 2-8 درجة مئوية ، الطرد المركزي الوقت 5 دقائق لجمع الخلايا ) .
3 - تعليق الخلايا مع 100 μ ل 1 × 5 × 106 الخلايا / مل .
4 - 5 μ ل Staun v-apc تلطيخ أضيفت إلى تعليق خلية ، ثم احتضنت لمدة 5-15 دقيقة في 2-8 ° C .
5 - إضافة بي ( أو 7-aad ) وصمة عار ، ثم مزيج بلطف في 2-8 ° C ، احتضان لمدة 1-3 دقائق . هذه الخطوة يمكن أن تستخدم فقط في آسيا والمحيط الهادئ الصباغة حسب التجربة .
6 - إضافة 400 ميكرولتر من برنامج تلفزيوني أو 1 × Stannexin الخامس حل ملزم ، مزيج بلطف .
7 - قياس التدفق الخلوي فورا .
تحليل التدفق الخلوي :
الخلايا المعالجة ثم يمكن تحليلها من قبل قياس التدفق الخلوي .
حسب الروتين تدفق عداد الكريات .
مضان الإثارة الطول الموجي من v-apc Stannexin 652 م و 670 م و 535 م و 620 م على التوالي .
قبل أن يتم الكشف عن الجهاز ، ومراقبة الجودة عينة من الخلايا التي سيتم الكشف عنها يجب أن تستخدم لتحديد مضان تعويض التدفق الخلوي و مجموعة من البوابات .
( ط ) غير transfected هذه الشراكه المسمى الخلايا
① فارغة أنبوب : مجموعة مراقبة سلبية الخلية ، الخلية دون تلطيخ . لا Stannexin الخامس / APC ، بي . الجهد المنظم .
② monochromatic القناة : الخلايا كانت واضحة ، فقط Staun الخامس / APC تلطيخ . تعديل التعويض .
قناة واحدة : هناك موت الخلايا المبرمج ، فقط بي تلطيخ . تعديل التعويض
④ الكشف عن أنبوب : الخلايا المعالجة التي سيتم الكشف عنها ، إضافة Staun الخامس / APC ، بي . بعد تنظيم الجهد التعويض باستخدام أنبوب فارغة واحدة إيجابية أنبوب ، تدفق البيانات المطلوبة يتم الحصول عليها .
تعداء هذه الشراكه الخلية
لا transfected فارغة أنبوب : لا transfected الخلايا ، الخلايا السلبية في السيطرة على المجموعة ، لا تلطيخ الخلايا . لا Stannexin الخامس / APC ، بي . الجهد المنظم .
transfected هذه الشراكه فارغة أنبوب : مجموعة مراقبة الخلايا transfected هذه الشراكه ، لا تلطيخ الخلايا . لا Stannexin الخامس / APC ، بي . تعديل التعويض
③ لا transfected monochromatic أنبوب : الخلايا التي لم transfected و أفكارك واضحة ، فقط Staun الخامس / APC تلطيخ . تعديل التعويض .
لا transfected monochromatic أنبوب : الخلايا التي لم transfected و أفكارك كانت واضحة ، فقط بي تلطيخ أضيفت . تعديل التعويض
أنبوب اختبار : اختبار الخلايا المعالجة ، إضافة Staun الخامس / APC ، بي . بعد تنظيم الجهد التعويض باستخدام أنبوب فارغة واحدة إيجابية أنبوب ، تدفق البيانات المطلوبة يتم الحصول عليها .
1 . الطرد المركزي جمع تعليق الخلايا . الطرد المركزي الطرد المركزي 300 × ز - 500 × ز القوة ، 2-8 درجة مئوية ، 5 دقائق ، التخلي عن وسائل الإعلام .
2 . غسل الخلايا مرتين مع البرد برنامج تلفزيوني . ( 300 × ز - 400 × ز ، 2-8 درجة مئوية ، الطرد المركزي الوقت 5 دقائق لجمع الخلايا ) .
3 - تعليق الخلايا مع 100 μ ل 1 × 5 × 106 الخلايا / مل .
4 - 5 μ ل Staun v-apc تلطيخ أضيفت إلى تعليق خلية ، ثم احتضنت لمدة 5-15 دقيقة في 2-8 ° C .
5 - إضافة بي ( أو 7-aad ) وصمة عار ، ثم مزيج بلطف في 2-8 ° C ، احتضان لمدة 1-3 دقائق . هذه الخطوة يمكن أن تستخدم فقط في آسيا والمحيط الهادئ الصباغة حسب التجربة .
6 - إضافة 400 ميكرولتر من برنامج تلفزيوني أو 1 × Stannexin الخامس حل ملزم ، مزيج بلطف .
7 - قياس التدفق الخلوي فورا .
تحليل التدفق الخلوي :
الخلايا المعالجة ثم يمكن تحليلها من قبل قياس التدفق الخلوي .
حسب الروتين تدفق عداد الكريات .
مضان الإثارة الطول الموجي من v-apc Stannexin 652 م و 670 م و 535 م و 620 م على التوالي .
قبل أن يتم الكشف عن الجهاز ، ومراقبة الجودة عينة من الخلايا التي سيتم الكشف عنها يجب أن تستخدم لتحديد مضان تعويض التدفق الخلوي و مجموعة من البوابات .
( ط ) غير transfected هذه الشراكه المسمى الخلايا
① فارغة أنبوب : مجموعة مراقبة سلبية الخلية ، الخلية دون تلطيخ . لا Stannexin الخامس / APC ، بي . الجهد المنظم .
② monochromatic القناة : الخلايا كانت واضحة ، فقط Staun الخامس / APC تلطيخ . تعديل التعويض .
قناة واحدة : هناك موت الخلايا المبرمج ، فقط بي تلطيخ . تعديل التعويض
④ الكشف عن أنبوب : الخلايا المعالجة التي سيتم الكشف عنها ، إضافة Staun الخامس / APC ، بي . بعد تنظيم الجهد التعويض باستخدام أنبوب فارغة واحدة إيجابية أنبوب ، تدفق البيانات المطلوبة يتم الحصول عليها .
تعداء هذه الشراكه الخلية
لا transfected فارغة أنبوب : لا transfected الخلايا ، الخلايا السلبية في السيطرة على المجموعة ، لا تلطيخ الخلايا . لا Stannexin الخامس / APC ، بي . الجهد المنظم .
transfected هذه الشراكه فارغة أنبوب : مجموعة مراقبة الخلايا transfected هذه الشراكه ، لا تلطيخ الخلايا . لا Stannexin الخامس / APC ، بي . تعديل التعويض
③ لا transfected monochromatic أنبوب : الخلايا التي لم transfected و أفكارك واضحة ، فقط Staun الخامس / APC تلطيخ . تعديل التعويض .
لا transfected monochromatic أنبوب : الخلايا التي لم transfected و أفكارك كانت واضحة ، فقط بي تلطيخ أضيفت . تعديل التعويض
أنبوب اختبار : اختبار الخلايا المعالجة ، إضافة Staun الخامس / APC ، بي . بعد تنظيم الجهد التعويض باستخدام أنبوب فارغة واحدة إيجابية أنبوب ، تدفق البيانات المطلوبة يتم الحصول عليها .
تحليل المشاكل المشتركة
في التجربة ، لا تلطيخ أو معدل الإيجابية Staun الخامس كان منخفضا . الأسباب المحتملة هي كما يلي :
1 . التدفق الخلوي / المجهر المستخدمة في الكشف عن سوء الإعداد . ضبط إعدادات الأداة الصحيحة .
2 - تحديد ما إذا كان يمكن أن تحفز الخلايا في المختبر . هذه الحالة يمكن استبعادها من خلال تحديد إيجابية مراقبة المخدرات بالضبط تأثير تحريض الخلايا .
3 . الخلايا لم تبدأ . إعادة تحديد الوقت نقطة بداية موت الخلايا المبرمج بعد تحريض .
4 - عدد الخلايا الصغيرة . زيادة عدد الخلايا .
5 - سوء الهضم من خلايا ملتصقة . مزيج من الخامس و ملاحظة يتطلب CA2 + CA2 + في حل ملزم ، يدتا الهضم يمكن أن تؤثر على الصباغة .
معدل الإيجابية في التجربة كانت عالية جدا . الأسباب المحتملة هي كما يلي :
1 . التدفق الخلوي / المجهر المستخدمة في الكشف عن سوء الإعداد . ضبط إعدادات الأداة الصحيحة .
2 . الخلية نفسها ضعيفة جدا . في هذه الدراسة ، ونحن العثور على نسبة عالية جدا من الخلايا الإيجابية مزدوجة Staun الخامس + / بي + بعد تلطيخ الخلايا التي لم تحفز الخلايا . واقترح استخدام التريبان الأزرق تلطيخ على حساب حيوية الخلايا ، التريبان الأزرق رفض الخلايا ينبغي أن يكون أكثر من 95 ٪ . إذا كان النشاط منخفضة ، فمن المستحسن أن الخلايا التي تم إنعاشها حديثا يجب أن تمر على الأقل ثلاث مرات قبل أن يتم اختبارها .
1 . التدفق الخلوي / المجهر المستخدمة في الكشف عن سوء الإعداد . ضبط إعدادات الأداة الصحيحة .
2 - تحديد ما إذا كان يمكن أن تحفز الخلايا في المختبر . هذه الحالة يمكن استبعادها من خلال تحديد إيجابية مراقبة المخدرات بالضبط تأثير تحريض الخلايا .
3 . الخلايا لم تبدأ . إعادة تحديد الوقت نقطة بداية موت الخلايا المبرمج بعد تحريض .
4 - عدد الخلايا الصغيرة . زيادة عدد الخلايا .
5 - سوء الهضم من خلايا ملتصقة . مزيج من الخامس و ملاحظة يتطلب CA2 + CA2 + في حل ملزم ، يدتا الهضم يمكن أن تؤثر على الصباغة .
معدل الإيجابية في التجربة كانت عالية جدا . الأسباب المحتملة هي كما يلي :
1 . التدفق الخلوي / المجهر المستخدمة في الكشف عن سوء الإعداد . ضبط إعدادات الأداة الصحيحة .
2 . الخلية نفسها ضعيفة جدا . في هذه الدراسة ، ونحن العثور على نسبة عالية جدا من الخلايا الإيجابية مزدوجة Staun الخامس + / بي + بعد تلطيخ الخلايا التي لم تحفز الخلايا . واقترح استخدام التريبان الأزرق تلطيخ على حساب حيوية الخلايا ، التريبان الأزرق رفض الخلايا ينبغي أن يكون أكثر من 95 ٪ . إذا كان النشاط منخفضة ، فمن المستحسن أن الخلايا التي تم إنعاشها حديثا يجب أن تمر على الأقل ثلاث مرات قبل أن يتم اختبارها .
