◆ 1 - أخذ العينات الميكروبية : منذ العديد من الكائنات الحية الدقيقة يمكن أن تتكرر على لوحة أجار ، الخطوة الأولى هي العثور على الثقافة الصحيحة الشرط . بسيطة و تقنية شائعة من زراعة الخلايا على أجار لوحة يمكن أن تجعل من السهل إعداد العينة . على سبيل المثال ، يمكن الحصول على نتائج موثوق بها للغاية من خلال زراعة البكتيريا لمدة 16-24 ساعة في الأرباع مع اختلاف كثافة الخلية على أجار لوحة . المستعمرات التي تم جمعها من الربع الثالث فقط . وقد وجد أن مفتاح النجاح يكمن في توحيد شروط جمع وتماسك نمو البكتيريا على أجار لوحة . ويمكن أيضا إدخال بعض التحسينات ( مثل التحول إلى وسائل الإعلام السائلة أو تغيير الوقت / درجة الحرارة ) . ومع ذلك ، يجب التأكد من أن جميع القياسات تتم تحت نفس الظروف للحصول على نتائج موثوق بها .

◆ 2-bacterial تكنولوجيا القياس : التكنولوجيا المستخدمة في تحديد الكائنات الحية الدقيقة تحتاج إلى أن تكون بسيطة و التكرار عالية جدا . عندما حل الميكروبية يجف ببطء ، الخلايا الميكروبية تنتج بيوفيلم الصلبة . من خلال الاستفادة المثلى من هذه العملية ، من السهل أن تعمل عملية إعداد عينة تم الحصول عليها ، والتي يمكن أن تلبي الحاجة إلى تكرار الأشعة تحت الحمراء قياس . الأشعة تحت الحمراء ضوء تخترق الأغشية الحيوية و يمتص من قبل مختلف الجزيئات الموجودة في الخلايا لإنتاج بصمات الأصابع الكيميائية الخاصة لكل سلالة .

من أجل تحديد FT - IR الكائنات الحية الدقيقة ، المشكلة الأكثر إثارة للقلق هو دقة النتائج التي تعتمد على نوعية إشارة الطيف . من أجل ضمان موثوقية النتائج ، ونحن بحاجة إلى إنشاء نظام المكتبة تحت ظروف موحدة .

أولا ، من الضروري ضمان تكرار زراعة الكائنات الحية الدقيقة . الأشعة تحت الحمراء أطياف تتأثر وسائل الإعلام والثقافة الظروف ( مثل الوقت ، درجة الحرارة ) و عينة المعالجة .

ثانيا ، nonhomologies والاختلاف ( مثل حجم العينة ، درجة جفاف الغشاء ، وما إلى ذلك ) و قياس العوامل ( مثل تشتت الضوء الناجم عن الجسيمات ، وما إلى ذلك ) تؤثر على الأشعة تحت الحمراء أطياف . ولذلك ، من الضروري قياس نفس العينة عدة مرات لضمان تكرار الأشعة تحت الحمراء الطيفية .

وثالثا ، فإن مصداقية المجهول عينات الأشعة تحت الحمراء لتحديد الهوية على أساس الاعتماد على قاعدة بيانات مرجعية الطيف . ولذلك ، يجب تحديد سلالات مرجعية باستخدام أساليب موثوق بها . خلاف ذلك ، معلومات غير صحيحة في قاعدة البيانات الطيفية يمكن أن يؤدي إلى الانحراف في تحديد النتيجة النهائية . من خلال الجمع بين عدة مناطق طيفية كبيرة ، قاعدة بيانات معروفة سلالات بكتيرية يمكن بناؤها . من أجل تصنيف وتحديد البكتيريا غير معروف ، معلومات طيفية مقارنة مع قاعدة بيانات مرجعية معروفة البكتيريا . التشابه بين أطياف مختلفة من الكائنات الحية الدقيقة كما يمكن وصفها في شكل شجرة الرسم البياني .