إعداد تقنية تنقية البروتين حشو ناضجة نسبيا ، ويمكن تحقيق الإنتاج الصناعي على نطاق واسع . بغض النظر عن حجم صغير من البروتين تنقية البحث في المختبر ، أو على نطاق واسع في إنتاج البروتين الصيدلانية البيولوجية على نطاق واسع في الشركات ، ونحن يمكن أن تختار التعبئة المناسبة والمواصفات والكميات وفقا للاحتياجات الفعلية ، وتلبية متطلبات تنقية مستويات مختلفة ، وضمان استقرار جودة المنتج .
المبادئ الأساسية لتنقية البروتين حشو :
( أ ) التفاعل القائم على التهمة
العديد من البروتينات تنقية الحشو تحمل شحنة كهربائية محددة المجموعات ، على سبيل المثال ، أنيون تبادل الحشو تحمل شحنة سالبة و تبادل الأيونات الموجبة الحشو تحمل شحنة موجبة . تحت بعض الظروف العازلة ، جزيء البروتين يمكن أن كثف مع حشو كهرباء حسب طبيعة الشحنة الكهربائية . عندما القوة الأيونية أو قيمة الرقم الهيدروجيني من حل العازلة التغييرات ، تهمة الجذب بين البروتين و حشو هو ضعف ، وبالتالي فإن الهدف من البروتين هو مزال ، في حين أن النجاسة البروتين يبقى على العمود أو فصلها في ظل ظروف مختلفة بسبب اختلاف خصائص الشحنة الكهربائية أو قوة ملزمة من حشو .
` 2 ` التفاعلات القائمة على مسعور
مسعور مسعور مجموعة موجودة على سطح حشو تنقية البروتين مسعور مسعور المنطقة موجودة أيضا في جزيء البروتين . في ظل ارتفاع تركيز الملح ، مسعور المنطقة من البروتين سوف تكون قريبة من بعضها البعض من خلال التفاعل مسعور مسعور مجموعة من الحشو . مع انخفاض تركيز الملح ، هذا التفاعل مسعور يضعف البروتين المستهدف هو مزال ، وبالتالي تحقيق تنقية البروتين . هذه الطريقة تقوم على تنقية مسعور هو أكثر فعالية في تنقية بعض البروتينات غشاء مسعور مثل البروتينات .
' 3 ` على أساس خصوصية الألفة
كروماتوجرافيا الألفة يستخدم عالية تقارب محددة بين البروتين و يجند محددة لتحقيق تنقية . على سبيل المثال ، هناك تقارب محددة بين انزيم الركيزة ، المانع ، الأجسام المضادة للمستضد . يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند يجند الهدف من البروتين يمكن desorbed من حشو و جمعها عن طريق تغيير ظروف عملية الاستخراج ، مثل استخدام الأساليب التي تحتوي على يغاندس تنافسية أو تغيير تكوين العازلة ، وبالتالي تحقيق درجة عالية من النقاء .
` 4 ` على أساس مبدأ المنخل الجزيئي
المنخل الجزيئي تنقية البروتين التعبئة والتغليف لديها بنية مسامية محددة مع حجم المسام . عندما يمر من خلال خليط البروتين حشو ، أصغر البروتينات ذات الوزن الجزيئي يمكن أن تدخل المسام من حشو ، في حين أن أكبر البروتينات ذات الوزن الجزيئي هي مستبعدة . في عملية الاستخراج ، وانخفاض الوزن الجزيئي للبروتينات بطيئة نسبيا في عملية الاستخراج بسبب طول مسار نشر في المسام . الوزن الجزيئي للبروتين هو مزال بسرعة ، وبالتالي تحقيق فصل وتنقية البروتين حسب الوزن الجزيئي .