إعداد العمود الكروماتوجرافى من هبلك هو أداة هامة لفصل وتنقية المركبات في الأداء العالي اللوني السائل ) .

- أنابيب العمود : عادة ما تكون مصنوعة من الفولاذ المقاوم للصدأ أو الزجاج ، مع مقاومة ضغط جيدة والاستقرار الكيميائية . القطر الداخلي من العمود الكروماتوجرافى يحدد حجم التعبئة وفصل الحجم .

-- التعبئة : هو الجزء الأساسي من العمود الكروماتوجرافى ، والتعبئة المشتركة هي هلام السيليكا ، والألومينا ، البوليمر العضوي المجهرية وهلم جرا . السليكا هلام التعبئة والتغليف لديها قوة ميكانيكية جيدة والاستقرار الكيميائية ، من خلال الربط بين مختلف المجموعات الوظيفية ( على سبيل المثال ، C18 ، C8 ، C4 ، الخ . )

- لوحة غربال : تقع على طرفي أنبوب العمود ، وتستخدم لدعم التعبئة ، ومنع تسرب التعبئة ، مع ضمان أن المرحلة المحمول يمكن أن تمر عبر العمود الكروماتوجرافى بالتساوي .

خطوات إعداد العمود الكروماتوجرافى باستخدام هبلك :

1 - الأعمال التحضيرية

- التفتيش الأمني : ضمان سلامة مناطق المختبرات ، وارتداء معدات الحماية الشخصية مثل ملابس المختبرات والقفازات والنظارات الواقية .

- جهاز التفتيش : التحقق من حالة المعدات هبلك ، وضمان التشغيل العادي من العمود ، كاشف ، مضخة ، الخ . فتح نظام هبلك ، تعيين درجة الحرارة المناسبة ، سرعة التدفق وغيرها من المعالم ، حتى أن النظام يمكن أن تصل إلى حالة مستقرة .

- إعداد المرحلة الجوالة : إعداد المرحلة الجوالة وفقا لمتطلبات التجربة ، وتصفية المذيبات أو المرحلة الجوالة باستخدام ورقة فلتر 0.2 ميكرون ، وتجري إزالة فقاعات الهواء والشوائب فيها بواسطة الموجات فوق الصوتية .

- إعداد العينة : حل العينة المراد قياسها بالمذيبات المناسبة المخففة إلى التركيزات المناسبة ، وتصفيتها من خلال غشاء الترشيح 0.2

2 - تركيب العمود الكروماتوجرافى : إعداد العمود الكروماتوجرافى المثبتة في نظام هبلك ، وإيلاء الاهتمام إلى اتصال وثيق لمنع تسرب السائل . قبل التثبيت ، يمكنك التحقق من ما إذا كان مظهر العمود الكروماتوجرافى معطوب .

3 . نظام التوازن : غسل العمود الكروماتوجرافى مع مرحلة الجوالة ، غسل الوقت 15-30 دقيقة ، حتى خط الأساس هو ثابت ، لضمان أن العمود الكروماتوجرافى هو الكامل من مرحلة الجوالة وتحقيق التوازن .

4 . أخذ العينات : تحديد طريقة أخذ العينات المناسبة وكمية حقن العينة في نظام هبلك . البيانات التي تم جمعها من أجل تسجيل الوقت الاحتفاظ ذروة العرض ، وارتفاع ذروة المعلومات .

5 - معالجة البيانات وتحليلها : استنادا إلى البيانات المسجلة ، البارامترات ذات الصلة من العمود الكروماتوجرافى ، مثل عدد من لوحات النظرية ، غير المتماثلة عامل درجة الفصل ، وما إلى ذلك ، يتم حسابها لتقييم أداء العمود الكروماتوجرافى . طرق معالجة البيانات المشتركة تشمل تحديد منطقة الذروة ، ذروة الارتفاع ، التحليل الكمي والتحليل النوعي .

6 - تنظيف وحفظ العمود الكروماتوجرافى : بعد الانتهاء من التصميم ، تنظيف العمود الكروماتوجرافى مع المذيبات المناسبة ، وإزالة العينات المتبقية و المرحلة المحمول . عكس المرحلة الكروماتوجرافى العمود ، وعادة ما تكون الأولى مع الميثانول أو الأسيتونيتريل شطف ، ثم شطف المياه النقية . العمود الكروماتوجرافى العادي يمكن غسلها مع المذيبات العضوية مثل الهكسين . بعد التنظيف ، والحفاظ على العمود الكروماتوجرافى بشكل صحيح لتجنب التجفيف والتلوث .